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價格：電議
所在地：上海
型號：
更新時間：2021-03-04
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公司地址：上海市青浦區(qū)徐涇鎮(zhèn)振涇路198號
常婕(女士)
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：20311.05
產(chǎn)品規(guī)格：500次
產(chǎn)品簡介：
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用 于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。MTT 可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物 Formazan。在特 定溶劑存在的情況下，可以被完全溶解。然后通過酶標(biāo)儀可以測定 570nm 波長附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快， 則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。
本試劑盒采用了獨(dú)特的 Formazan 溶解液配方，無需去除原有的培養(yǎng)液，可以直接加入 Formazan 溶解液溶解 Formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時 Formazan 被部分去除而引起的誤差。
本試劑盒本底低，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便。
本試劑盒可以測定 500 個樣品。
包裝清單:
| 產(chǎn)品名稱 | 包裝 | 儲存條件 |
|---|---|---|
| MTT溶液 | 10ml | 4℃/長期保存-20℃、避光 |
| Formazan溶解液 | 55ml | 4℃、避光 |
操作步驟：
1. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入 100μl 2000 個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入 100μl 5000 個細(xì)胞(具體每 孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。按照實(shí)驗需要，進(jìn)行培養(yǎng)并 給予 0-10μl 特定的藥物刺激。
2. 每孔加入 20μl MTT 溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育 4 小時。
3. 每孔加入 100μl Formanzan 溶解液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至在普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn) Formazan 全部溶解。通常 37℃孵育 4 小時左右，紫色結(jié)晶會全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解 的時間會短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時間會長一些，建議室溫或 37℃過夜孵育。
4. 在 570nm 測定吸光度。如無 570nm 濾光片，可以使用 560-600nm 的濾光片。
注意事項 ：
1. 由于使用 96 孔板進(jìn)行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于 96 孔板周圍一 圈最容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加 PBS、水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠 近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
2. MTT 溶液在 4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固，可以 20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. Formazan 溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以 37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。混 勻過程請用移液槍輕輕吹勻，勿上下顛倒，避免氣泡。
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