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價格：電議
所在地：上海
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更新時間：2020-12-02
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公司地址：上海市青浦區徐涇鎮振涇路198號
常婕(女士)
細胞增殖檢測試劑盒（MTS）說明書
產品簡介：
MTS 是一個基于光吸收檢測的均相非標記細胞活力測定試劑。一步操作，可用于細胞增殖和毒性分析，方法 簡便而準確。該試劑可被活細胞還原為具有高度水溶性的，可在490nm處檢測的甲臜染料，甲臜的生成量與活細胞的數量和活力成正比。
試劑的優點：
1、 結果準確，重現性好:試劑不影響細胞活力，顯色產物直接溶解于培養液，直接測定OD值即可準確反應細胞 活力。
2、 操作省時簡單:試劑即開即用，只需一步操作，即可檢測。無需額外清洗，加DMSO等步驟，重現性好。
3、 安全性好:不含放射性同位素和有機溶劑，使用安全。
4、 靈敏度高:靈敏度高于 MTT、XTT、CCK-8等方法。
使用方法:
*以下操作步驟針對 96 孔培養板培養每孔 100μl 細胞，若使用 96 孔外的培養板，試劑用量等比例增減。
1、 取出 MTS 試劑于室溫或 37℃溶解。
2、 于培養有 100μl 細胞/孔的 96 孔培養板中加入 10μl MTS 試劑。
3、 將96孔培養板放回培養箱，37℃孵育1～4 小時。
*如孵育后需立即檢測，請跳至步驟 4；如稍后檢測，每孔加入25μl的20%SDS溶液，避光保存，18 小時內檢測。
4、 用酶標儀于490nm處測定OD值。
結果分析： 將各測試孔的 OD 值減去對照孔或調零孔 OD 值。各平行孔的 OD 值取平均數。
細胞活力% = {(加藥細胞組 OD ? 空白組 OD）/（對照細胞組 OD ? 空白組 OD）}× 100%
注意事項：
1、 試劑加入后輕輕振搖培養板，使 MTS 試劑與培養基充分混勻。
2、 試劑加入后培養時間根據細胞種類的不同和每孔細胞數量的多少而異。對于貼壁細胞，加入 MTS 的培養時間 一般為1～4小時，但在培養 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據細胞種類而定）。與貼壁細胞相比，懸浮細胞較難顯色。對于懸浮細胞，在加入MTS培養1～4小時后，可先從培養箱中取出，目測染色程度或用酶標儀測定決定。白細胞較難顯色，因此需要較長的MTS反應時間或增加細胞數量（105個細胞/孔）。若顯色困難，可以將培養板放回培養箱，繼續培養數小時后再確定。注意：MTS的反應時間以具體顯色的時間為準。
3、 MTS試劑中的試劑會與還原劑反應生成甲臜，如果實驗中有還原劑，需要檢查背景的OD值，即在不含細胞的培養基中加入藥物，然后加入MTS試劑在一定時間內檢測，和不加藥物的培養基進行比較（只加 MTS 試劑）， 如果OD值明顯偏高，則說明有反應。
4、 如果樣品為高渾濁度的細胞懸液，建議設定630nm～700nm作為參比波長，扣除參比波長的OD值即可。
5、 如果要測定細胞的具體數量，需要先做一個標準曲線。
6、 若測得OD值過高，可酌減鋪板細胞數或MTS試劑用量。
試劑包裝:
100 次：1ml×1 瓶；
500 次：5ml×l 瓶；
3,000 次：5ml×6 瓶；
5,000 次：5ml×10 瓶；
10,000 次：100ml×l 瓶。
貯藏條件:
MTS 在避光 0～5℃的條件下存放一年，測定效果完全不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。反復凍融會增加背景值，經常使用時請于 0～5℃條件下保存。
本試劑僅供科研使用。
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