特別提示:包括酵母膜蛋白/細(xì)胞質(zhì)蛋白提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:酵母膜蛋白/細(xì)胞質(zhì)蛋白提取試劑盒
英文名稱:Yeast membrane protein / cytoplasmic protein extraction kit
產(chǎn)品貨號:HR8065
產(chǎn)品規(guī)格:50T|100T
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
酵母膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學(xué)而非去污劑方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。酵母膜蛋白提取試劑盒可以從各種酵母樣本中提取膜蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性,可用于各種下游實(shí)驗(yàn)。
儲存條件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
注意事項(xiàng):
●本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.使用方便。
2.將蛋白提取的時(shí)間縮短至1小時(shí)。
3.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
4.紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
5.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
試劑盒以外自備試劑和儀器:
● 移液器、吸頭 ●離心機(jī)及離心管 ● 渦旋振蕩器 ●冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事項(xiàng):
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
● 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
●蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
●可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
使用方法:
1.每500μl蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制劑混合物,充分混勻后置冰上備用。
2.取50ml酵母培養(yǎng)物,在4℃,2500g條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養(yǎng)基,盡可能吸干,收集酵母沉淀。
3.用冷PBS洗滌酵母兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4.每100μl體積酵母沉淀物中加入500μl酵母蛋白提取液A,混勻后,在室溫或37℃條件下振蕩30-60分鐘。
5.在2-8℃條件下振蕩20-30分鐘。
6.將提取液在4℃條件下12000g離心5分鐘,取上清。
注:此時(shí)酵母已溶解于提取液A,應(yīng)無大量酵母菌體沉淀,若有大量未溶解酵母菌體,請延長步驟4和步驟5的振蕩時(shí)間,振蕩中途可用移液器吹打混勻。
7.在上清中加入5μl提取液B,充分混勻。
8.在37℃水浴10分鐘。
9.在37℃ 1000g離心3分鐘。
10.此時(shí)溶液分為2層,小心吸取上層部分,即為酵母細(xì)胞質(zhì)蛋白。
11.管底部下層部分大約50μl液體即為酵母膜蛋白。用50-100μl膜蛋白溶解液溶解該溶液,即得酵母膜蛋白樣品。膜蛋白和胞質(zhì)蛋白樣品可以用Bradford或BCA方法進(jìn)行定量,調(diào)整相應(yīng)的濃度用于下游實(shí)驗(yàn)。
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名稱:水蛭素溶液(2萬ATU/mL)
貨號:BTN130542
規(guī)格:0.1mL
本產(chǎn)品為水蛭素水溶液,濃度為20000ATU/mL,工作濃度為150-200ATU/mL。水蛭素是從水蛭及其唾液腺中提取的含65個氨基酸殘基的小分子蛋白,水蛭素對凝血酶有強(qiáng)的抑制作用,是迄今為止所發(fā)現(xiàn)zuì強(qiáng)的凝血酶天然特異抑制劑?;蛑亟M水蛭素是一種單鏈環(huán)肽化合物,相對分子量約為7000 道爾頓,是目前發(fā)現(xiàn)的zuì強(qiáng)的凝血酶抑制劑,其作用不依賴于抗凝血酶Ⅲ。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.其優(yōu)點(diǎn)是抗原性弱,少有過敏反應(yīng)。
2. 不與血小板結(jié)合,少導(dǎo)致血小板減少。
3. 穩(wěn)定性好,毒性低。
儲存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存。
活力單位定義:一個抑制單位ATU(anti-thrombin unit)指,37℃下,滅活一個NIH 單位凝血酶的量
使用方法:根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求不同,加入所需要量的本產(chǎn)品。一般建議工作濃度為150-200ATU/mL。用戶可以按照要求稀釋本產(chǎn)品。后續(xù)按照常規(guī)操作即可。
名稱:非變性非還原性蛋白上樣緩沖液(5X)
貨號:YT054
規(guī)格:2ml
本品是一種經(jīng)過改良的以溴酚藍(lán)為染料,5倍濃縮的蛋白上樣緩沖液,本產(chǎn)品中不含SDS等變性試劑,也不含DTT、巰基乙醇等還原性試劑,可以用于常規(guī)的非變性非還原性聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)蛋白樣品的上樣。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
名稱:彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-170kD)
貨號:YT621
規(guī)格:200μl|600μl|3ml
本品包含了從10kD到170kD共10種純化的預(yù)染蛋白質(zhì),其中15kD和70kD條帶為紅色,其余條帶為藍(lán)色(參見下圖),適合作為SDS-PAGE或Western的蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。特別適合在Western時(shí)使用,這樣在轉(zhuǎn)膜后可以直接并清楚地觀察到轉(zhuǎn)膜效果。須注意右圖所示分子量僅適用于常規(guī)的Tris-Glycine凝膠。根據(jù)上樣孔的大小,本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)通常每次上樣3-5微升,即可在電泳時(shí)、電泳后或轉(zhuǎn)膜后觀察到非常清楚的蛋白條帶,一個包裝的本產(chǎn)品大約可以使用約40-65次。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 提供了兩條鮮艷的紅色條帶(15kD和70kD),有利于快速準(zhǔn)確辨認(rèn)蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的條帶。同時(shí)本產(chǎn)品中含有類似于溴酚藍(lán)的指示性紅色染料,電泳時(shí)會呈現(xiàn)紅色條帶并處于zuì前沿。
2. 提供了從10kD到170kD共10條條帶,條帶清晰,分子量范圍比較寬,蛋白分子量比對比較方便。
3. 本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)配制在1×SDS-PAGE上樣緩沖液中,可以直接使用,無需煮沸。

蛋白條帶包括:10kD,15kD,25kD,35kD,45kD,55kD,70kD,100kD,130kD,170kD
注意事項(xiàng):
1. 本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)不可在100℃加熱或煮沸,并不得加熱至40℃以上,室溫融化后混勻即可直接使用。
2. 本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)用1X SDS-PAGE上樣緩沖液配制,不適用于非變性PAGE膠。
3. 預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)每一批次的分子量大小可能有所不同,屬正?,F(xiàn)象。請參考隨產(chǎn)品所附的說明書確定的分子量。
儲存條件:-20℃,有效期一年。

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