特別提示:包括Hoechst 33258 染液(即用型)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Hoechst 33258 染液(即用型)
產(chǎn)品貨號(hào):SY0498
產(chǎn)品規(guī)格:10ml
本系列產(chǎn)品均以溶液形式提供,其中Hoechst 33258 染液 (1mg/ml)(SY0562)為特定濃度的產(chǎn)品,其濃度為1mg/ml。用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。Hoechst 33258染液(即用型)(SY0498)為濃度經(jīng)過優(yōu)化的產(chǎn)品,確保可以滿足各種常規(guī)染色的需要。如需使用粉末狀該產(chǎn)品,可選購(gòu)Hoechst 33258(SY0497)。
Hoechst 33258 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。也可以用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。可用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
中文名稱:二苯甲亞胺, 三氯化氫 2-(4-羥基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑
英文名稱:2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride;bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式:C25H24N6O·3HCl
分子量:533.88
CAS:23491-45-4
純度:≥95%(HPLC)
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期12個(gè)月
結(jié)構(gòu)式
使用方法
對(duì)于1mg/ml的Hoechst33258在使用時(shí)需用PBS或合適的緩沖液配制成0.5-10μg/ml的染色液。
1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織
1) 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258 染色。
2) 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量 Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液,并混勻。室溫放置 3~5分鐘。
3) 吸除 Hoechst 33258 染色液,用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2~3 次,每次3~5 分鐘。
4) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。觀察細(xì)胞凋亡時(shí),會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。激發(fā)波長(zhǎng)350nm,發(fā)射波長(zhǎng)460nm。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織:
a) 細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液,約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液,對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100μl染色液。
b) 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng) 20~30 分鐘。
c) 棄染色液,用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長(zhǎng)350nm,發(fā)射波長(zhǎng)460nm。
注意事項(xiàng)
1) Hoechst 33258 對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2) 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
3) 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
根據(jù)您的關(guān)注的
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關(guān)注
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