產品簡介
人腦源性神經營養因子(BDNF)檢測試劑盒人（Human）腦源性神經營養因子（BDNF）ELISA檢測試劑盒
公司簡介
南京帕爾斯生物科技有限公司是一家專業經營生物、儀器、試劑耗材的公司，在廣大用戶的幫助和支持下，經過不懈的努力，已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一，代理許多國際先進水平的高科技產品，包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應用領域。公司的服務和業務網絡遍及全國，在同行獲得一致好評。
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產品說明
人腦源性神經營養因子(BDNF)檢測試劑盒檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被腦源性神經營養因子（BDNF）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腦源性神經營養因子（BDNF）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
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酶標儀（450nm）
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加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
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37℃恒溫箱
人腦源性神經營養因子(BDNF)檢測試劑盒操作注意事項
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試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
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實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
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濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，終結果乘以5才是樣本實際濃度。
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嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
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所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
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名稱
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96孔配置
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48孔配置
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備注
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微孔酶標板
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12孔×8條
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12孔×4條
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無
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標準品
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0.3mL*6管
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0.3mL*6管
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無
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樣本稀釋液
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6mL
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3mL
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無
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檢測抗體-HRP
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10mL
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5mL
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無
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20×洗滌緩沖液
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25mL
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15mL
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按說明書進行稀釋
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底物A
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6mL
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3mL
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無
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底物B
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6mL
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3mL
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無
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終止液
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6mL
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3mL
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無
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封板膜
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2張
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2張
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無
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說明書
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1份
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1份
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無
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自封袋
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1個
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1個
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無
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注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、2、4、8、16、32 ng/mL
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
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手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
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自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步驟
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從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
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設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
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樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
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除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
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棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
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每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
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每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
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準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
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靈敏度：低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
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特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
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重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
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貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
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有效期：6個月
免責聲明
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試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
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嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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