小鼠卵白蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)ELISA試劑盒
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本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷,具體說明書請(qǐng)聯(lián)系客服索取，本說明書是通用模板，有些數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確.
小鼠卵白蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)ELISA試劑盒

使用說明書

檢測(cè)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
小鼠卵白蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)ELISA試劑盒

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生里鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1.酶標(biāo)儀（450nm）

2.加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱小鼠卵白蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)ELISA試劑盒

操作注意事項(xiàng)

1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

名稱 96孔配置 48孔配置 備注

微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條 無小鼠卵白蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)ELISA試劑盒

樣本稀釋液 6mL 3mL 無

檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無

20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進(jìn)行稀釋

底物A 6mL 3mL 無

底物B 6mL 3mL 無

終止液 6mL 3mL 無

封板膜 2張 2張 無

說明書 1份 1份 無

自封袋 1個(gè) 1個(gè) 無

注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度都不相同，麻煩聯(lián)系客服索取相應(yīng)說明書

試劑的準(zhǔn)備

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測(cè)濃度小于（參考說明書）

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6個(gè)月

免責(zé)聲明

1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

本品為科研試劑，只對(duì)單位實(shí)驗(yàn)室學(xué)校等正規(guī)用途出售。

如需資料請(qǐng)向客服索取！

武漢純度生物科技有限公司，產(chǎn)主要生產(chǎn)銷售實(shí)驗(yàn)室常用抗原抗體、試劑、Elisa試劑盒、免疫檢測(cè)試劑盒、金標(biāo)試劑盒、金標(biāo)檢測(cè)卡、動(dòng)物血清、血漿、全血、抗血清、生物試劑、培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)室儀器耗材、化學(xué)試劑、生物制品、標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、生化免疫制品、免疫親和柱、菌株、質(zhì)粒、室內(nèi)質(zhì)控品、細(xì)胞、細(xì)胞因子等產(chǎn)品研發(fā)與銷售。

ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品（牛、馬、山羊、綿羊、人、狗、兔、雞、鼠、豬、植物、猴子、大鼠、小鼠、菌類等）種屬，代測(cè)，廠家直銷，全程提供技術(shù)支持！

抗原抗體相關(guān)類產(chǎn)品：抗豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）單克隆抗體、抗弓型蟲（Toxo）單克隆抗體、抗李斯特菌（Listeria monocytogenes）單克隆抗體、抗輪狀病毒（Rotavirus A）單克隆抗體、抗沙門氏菌（Salmonella O-antigens）單克隆抗體、抗鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）單克隆抗體、抗牛冠狀病毒（Bovine corona virus）單克隆抗體、抗牛布魯氏菌（Brucella abortus）單克隆抗體、抗傳染性支氣管炎病毒（IBV）單克隆抗體、抗傳染性法氏囊病毒（IBDV）單克隆抗體、抗甲型流感H5亞型單克隆抗體、抗甲型流感H7單克隆抗體、抗狂犬病毒（RV）單克隆抗體等。

血液制品系列：各種動(dòng)物血清（、新生牛血清、標(biāo)準(zhǔn)馬血清、特級(jí)馬血清、山羊血清、綿羊血清、兔血清、雞血清、大牛血清、小牛血清、豬血清、狗血清、貓血清、魚血清、驢血清、豚鼠血清、大鼠血清、小鼠血清、巴比西鼠血清）
動(dòng)物血漿：、新生牛血漿、大牛血漿、小牛血漿、綿羊血漿、山羊血漿、豬漿、驢血漿、馬血漿、狗血漿等等。
動(dòng)物紅細(xì)胞：綿羊紅細(xì)胞，兔血紅細(xì)胞，雞血紅細(xì)胞，豚鼠血紅細(xì)胞等，濃度可定做。

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