WH0115 血漿/血清游離DNA提取試劑盒(

血漿/血清游離DNA提取試劑盒(由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,用于科研試驗(yàn),本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多血漿/血清游離DNA提取試劑盒(等DNA提取純化產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購。...
特別提示:包括血漿/血清游離DNA提取試劑盒(磁珠法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:血漿/血清游離DNA提取試劑盒(磁珠法)
英文名稱:Magnetic Serum/Plasma DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào):WH0115
產(chǎn)品規(guī)格:400μl×96次
本試劑盒采用具有獨(dú)特分離作用的磁珠和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),從血清,血漿等樣本中分離純化高質(zhì)量游離DNA。獨(dú)特包埋的磁珠,在一定條件下對(duì)核酸具有很強(qiáng)的親和力,而當(dāng)條件改變時(shí),磁珠釋放吸附的核酸,能夠達(dá)到快速分離純化核酸的目的。整個(gè)過程安全、便捷,提取的游離DNA得率高,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,尤其適合高通量工作站的自動(dòng)化提取。
產(chǎn)品特點(diǎn):
·本試劑盒即可滿足手工提取也可適用于多種高通量平臺(tái)批量提取。
·本試劑盒所得產(chǎn)物滿足下游各類檢測(cè)實(shí)驗(yàn)以及NGS分析。
·本產(chǎn)品適用于0.4- 5ml體積的血清血漿樣本。
試劑盒組成:
組分 | 0.4ml×96次 |
裂解液CFL | 45ml |
去蛋白液PD | 120 ml |
漂洗液RW | 40 ml |
洗脫緩沖液TBC | 30ml |
Proteinase K | 4×1 ml |
磁珠懸浮液WD | 3×1 ml |
儲(chǔ)存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。
注意事項(xiàng):(請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。)
1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的核酸片段較小且提取量降低。
2.用前請(qǐng)?jiān)诹呀庖篊FL中加入異丙醇,漂洗液RW加入無水乙醇。加入體積參照標(biāo)簽。
3.本試劑盒組分以0.4 ml樣本為基礎(chǔ),如果提取其它規(guī)格的樣本,試劑不夠時(shí)需另行購買。
操作步驟:
使用前請(qǐng)?jiān)诹呀庖篊FL加入異丙醇,漂洗液RW加入無水乙醇。加入體積參照標(biāo)簽
1.根據(jù)樣品體積按下表選擇合適規(guī)格的離心管并依次添加試劑。
樣品量 | 耗材規(guī)格 | 裂解液CFL | Proteinase K | 磁珠WD |
400μl | 1.5ml離心管 | 600μl | 40μl | 30μl |
600μl | 1.5ml離心管 | 900μl | 60μl | 30μl |
2ml | 5ml離心管 | 3ml | 200μl | 45μl |
4ml | 15ml離心管 | 6ml | 400μl | 90μl |
注意:本試劑盒以0.4 ml樣本為基礎(chǔ),如果提取其它規(guī)格的樣本,請(qǐng)按照表格中的用量進(jìn)行增加。
2.渦旋振蕩混勻后室溫孵育20 min,期間每3-5 min上下顛倒混勻10 sec,使磁珠和核酸充分結(jié)合。孵育結(jié)束后需簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。
3.將離心管置于磁力架上2 min,待磁珠完全吸附后用移液器小心去除液體,取下離心管。
4.加入750μl去蛋白液PD,上下顛倒混勻30 sec使磁珠充分懸浮,短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。
注意:如果離心管壁上有殘留磁珠,可以再加入200 μl去蛋白液PD漂洗,然后一并轉(zhuǎn)移到1.5ml離心管中。
5.將離心管置于磁力架上1 min,待磁珠完全吸附后用移液器小心去除液體,取下離心管。
6.加入750μl漂洗液RW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),上下顛倒混勻30 sec使磁珠充分懸浮,短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。
7.將離心管置于磁力架上1 min,待磁珠完全吸附時(shí)用移液器小心去除液體,取下離心管。
8.重復(fù)步驟6和7一次。
9.將離心管置于磁力架上,吸出所有液體棄去,室溫晾干5-10min。
注意:乙醇?xì)埩魰?huì)抑制后續(xù)的酶反應(yīng),所以晾干時(shí)要確保乙醇揮發(fā)干凈。但也不要干燥太長(zhǎng)時(shí)間,以免難以洗脫核酸。
10.加入30- 65 μl洗脫緩沖液TBC,用移液器吹吸使磁珠重新懸浮,56℃孵育5 min,期間每2 min輕輕晃動(dòng)使核酸充分洗脫。
11.將離心管放置于磁力架上靜置2 min,待磁珠完全吸附時(shí)小心將核酸溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,并于適當(dāng)條件保存。
根據(jù)您的關(guān)注的血漿/血清游離DNA提取試劑盒(磁珠法),磁珠法游離DNA提取試劑盒,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱:痰液DNA提取試劑盒
貨號(hào):BTN111201
規(guī)格:50次
痰液是重要的檢測(cè)樣品,可以用于診斷肺癌,肺結(jié)核等各種疾病。但是從痰液中純化DNA十分棘手,為此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品,專用于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中純化DNA,用于后續(xù)的分子生物學(xué)分析。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 每次可以處理10-20mL痰液,得到2-5μg DNA。
2. 純度高,可直接用于后續(xù)得PCR檢測(cè)。
3.一管式操作,減少污染,節(jié)約成本。
4.含痰液保存液(溶液A),便于取樣和運(yùn)輸。
5. 環(huán)保,不需要使用苯酚和lǜ仿等有毒的有機(jī)溶液。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A(痰液細(xì)胞固定液) | 500ml |
溶液B(痰液解稠劑) | 500ml |
溶液C | 30ml |
說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
使用方法:
一:痰標(biāo)本的獲取與保存(注意:痰液以及下列操作的廢棄液都可能含有致病性的結(jié)核桿菌等致病菌,需按傳染源相關(guān)規(guī)定流程進(jìn)行操作)
1. 每例患者在常規(guī)痰標(biāo)本采樣時(shí),zuì好連續(xù)三天采集三次樣品以防誤差。具體做法是先在每個(gè)50mL的痰液收集管內(nèi)新鮮加入10mL溶液A和10mL溶液B,待患者晨起漱口后,咳深部痰7~8口(約10-20mL),收集到裝有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集內(nèi),混勻后儲(chǔ)于4℃冰箱或陰涼處。第二、三天重復(fù)此操作。取足三管后一起送實(shí)驗(yàn)室,4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用時(shí),在室溫反復(fù)振搖裝有樣品(總體積約30-40mL)的痰液收集管5~10分鐘,充分混勻直到痰液中無粘稠痰塊而呈均勻的液相。
3. 4℃2500g離心5分鐘,棄上清。
4.沉淀再用自備的PBS液洗兩遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片,用于比較細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析。也可以將細(xì)胞沉淀在0.2mL PBS緩沖液中重懸后轉(zhuǎn)入1.5mL螺旋蓋塑料離心管,-20℃冰箱長(zhǎng)期保存,或立即用于下步的DNA提取。為避免蓋子崩開而出現(xiàn)交叉污染或痰液的分枝桿菌污染環(huán)境,建議不要使用壓蓋式塑料離心管。同時(shí)zuì好設(shè)置一個(gè)陽性和一個(gè)陰性對(duì)照。
二:DNA提取
6.在上步所得的0.2mL樣品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀,用前需37℃加熱融化并搖晃均勻。
7.室溫放置10分鐘。此間可以在每個(gè)管外壁上做個(gè)標(biāo)記,以在下步區(qū)別向心面和離心面。
8. 振蕩數(shù)秒后加入0.7mL自備的異丙醇,旋緊蓋后振蕩30秒混勻。
9. 把離心管的向心面對(duì)向轉(zhuǎn)頭,13,000-15000g室溫離心至少15分鐘。
10.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時(shí)可能看不見)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇,振蕩數(shù)秒后 15000g室溫離心5分鐘。注意:在離心機(jī)中放置離心管時(shí)將其向心面對(duì)向轉(zhuǎn)頭的中央。
12.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時(shí)呈膜狀沉淀)。
13. 將離心管放回離心機(jī)再短暫離心數(shù)秒,然后用移液器移棄約50μL殘留液體(70%乙醇),否則它會(huì)影響后續(xù)反應(yīng)。
14. 加入200μl RNase-free水,用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀DNA沉淀,溶液將呈混濁狀,含少量不溶,短暫離心后存上清(含DNA)。
15. 直接取適量用于PCR,樣品使用量不超過PCR體系的1/2。剩余DNA樣品可以室溫放置2小時(shí),也可保存于-80℃保存一個(gè)月。

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