GL0413 軟骨染色液

北京百奧萊博供應(yīng)的軟骨染色液用于科研目的,我公司的軟骨染色液品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購(gòu)。...
特別提示:包括軟骨染色液(阿利新藍(lán)法,pH2.5)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:軟骨染色液(阿利新藍(lán)法,pH2.5)
產(chǎn)品貨號(hào):GL0413
產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml
用途:
軟骨染色,主要顯示羥基酸性粘液物質(zhì)
注意事項(xiàng):
主要由酸化液、Alcian 染色液(PH2.5)組成。染色結(jié)果為:酸性黏蛋白呈藍(lán)色,細(xì)胞核呈淺藍(lán)色。
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月
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貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
KFS183 | 細(xì)胞質(zhì)綠色熒光染料 | 100μL |
BTN160270 | MacFarlane染液 | 250mL |
GL0377 | 網(wǎng)織紅細(xì)胞染色液 | 50ml|100ml |
GL0383 | Dacie氏液 | 100ml |
GL0424 | Thomas磷鉬酸蘇木素染色液 | 2×100ml |
GL0454 | 鞣酸/單寧酸水溶液(5%) | 100ml |
GL0481 | 堿性磷酸酶染色液(改良Gomori鈣鈷法) | 3×50ml|3×100ml |
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名稱:高爾基體紅色熒光探針
貨號(hào):KFS126
規(guī)格:100μg
高爾基體紅色熒光探針(BTR C5-神經(jīng)酰胺)可以用來(lái)研究神經(jīng)鞘脂類的運(yùn)輸和代謝機(jī)制,也可以用來(lái)作為活細(xì)胞或固定細(xì)胞內(nèi)高爾基體的選擇性染料。NBD染料對(duì)于環(huán)境敏感,在水中熒光信號(hào)微弱,但是在非質(zhì)子溶劑和非性環(huán)境中熒光增強(qiáng),Ex/Em=589nm/617nm。
儲(chǔ)存:-20℃,避光,有效期一年。
名稱:細(xì)胞膜染色試劑盒(PKH67)
貨號(hào):HR8659
規(guī)格:500T
熒光染料PKH67 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。
PKH67對(duì)細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。
在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67 的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2 的熒光強(qiáng)度),二次(1/4 的熒光強(qiáng)度),三次(1/8 的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH67 可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。
除了用于細(xì)胞增殖檢測(cè),PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤,標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,陽(yáng)性標(biāo)記率達(dá)98%以上,標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。PKH67 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=490 nm,λem=502 nm。
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存。
【注】:
● PKH67熒光探針在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
●熒光染色劑為DMSO 溶液,冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài),易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短時(shí)間水浴。吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱,否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
有效期:一年。
※ ※ ※ 使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書 ※ ※ ※
使用限制:本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
產(chǎn)品更新:我公司會(huì)更新或升級(jí)產(chǎn)品,以優(yōu)化和增強(qiáng)其使用性能,產(chǎn)品說明書會(huì)進(jìn)行相應(yīng)的版本更新。使用產(chǎn)品時(shí),請(qǐng)參照隨產(chǎn)品附帶的說明書,不要參照網(wǎng)上下載的說明書,可能是不同的版本。需要zuì新電子版說明書時(shí)可以在收到產(chǎn)品后發(fā)郵件索取。
使用安全:使用時(shí)需要合適的實(shí)驗(yàn)室外套,一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛,應(yīng)立即用水沖洗。
注意事項(xiàng):
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
● 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材:
儀器:
● 流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡或激光共聚焦 ● CO2培養(yǎng)箱 ● 離心機(jī) ● 移液器 ● 冰箱 ● 冰盒
試劑:
● PBS緩沖液(pH7.4,實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1×))
●或者HBSS(With:Calcium Magnesium Glucose;Without:Phenol Red。)
耗材:
● 離心管 ● 吸頭 ● 96孔培養(yǎng)板
使用方法:
使用注意事項(xiàng):
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
●染色濃度根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異。
● 配制的PKH67母液易水解,建議分裝保存,分裝后用封口膜密封管口,再用錫箔紙包裹,zuì好和干燥劑一起用塑料袋密封,≦-20℃冷凍保存。
● PKH67 工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,不能提前配制,因?yàn)镻KH67 吸水會(huì)分解,影響染色效果。
● PKH67 易被水解,在水溶液中會(huì)很快變質(zhì)。母液請(qǐng)?jiān)谑褂眠^程中避免接觸水。工作液在標(biāo)記細(xì)胞的過程中和水接觸是在許可的時(shí)間范圍內(nèi)的。
● PKH67 溶解液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以37℃水浴片刻至全部融解后使用。
● 不同的細(xì)胞種類標(biāo)記后可以示蹤的代次或時(shí)間差異較大,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況或參考文獻(xiàn)進(jìn)行檢測(cè)。
1.試劑配制:
從冰箱中取出PKH67試劑,靜置幾分鐘至室溫,或者37℃水浴片刻后,離心盛放PKH67 的管子,開蓋前請(qǐng)務(wù)必離心幾分鐘讓試劑充分落入管底后才能開蓋。
2.根據(jù)需要檢測(cè)的細(xì)胞樣品數(shù),用稀釋液將探針10倍稀釋,再用合適的溶液(如:無(wú)血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)將PKH67母液25倍稀釋,配制成染色工作液。
【注】:
● 也可以不用試劑盒中的稀釋液,直接用HBSS 稀釋即可。
● zuì佳的工作液濃度請(qǐng)根據(jù)不同細(xì)胞和自身的實(shí)驗(yàn)體系來(lái)調(diào)整。
● 一般細(xì)胞使用按試劑盒中的母液的終濃度250倍稀釋即可,有些細(xì)胞可能需要適當(dāng)增加濃度。
3.將制備好的待測(cè)細(xì)胞用100μl染色工作液重懸,至細(xì)胞濃度大約107/ml。
【注】:
● 也可以進(jìn)行原位染色,染色液足夠覆蓋細(xì)胞即可。
4.在2-8℃培養(yǎng)箱中孵育15-30 分鐘。
【注】:
● 建議待標(biāo)記細(xì)胞在染色工作液中于37℃孵育5min,再于4℃孵育15min。
●低溫孵育可降低細(xì)胞對(duì)染料的內(nèi)吞作用,有助于染料對(duì)質(zhì)膜的標(biāo)記,并且降低染料定位細(xì)胞質(zhì)囊泡的可能性。
5.離心后去上清,收集細(xì)胞,用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞1-2次,zuì后加入PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
6.取500μl 細(xì)胞懸液,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Ex/Em=490/502nm。
7.隨后還可按照細(xì)胞的正常培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。
可以在熒光顯微鏡下直接觀察標(biāo)記效果,也可以在培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后再用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖,或用于其他特定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡募?xì)胞熒光示蹤。
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