免疫組化SP法檢測(cè)試劑盒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學(xué)研究方面，我公司的免疫組化SP法檢測(cè)試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過(guò)多年的開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購(gòu)。...

特別提示：包括免疫組化SP法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：免疫組化SP法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)
英文名稱：SP Kit(Rabbit)
產(chǎn)品貨號(hào)：QN2715
產(chǎn)品規(guī)格：3ml|6ml|18ml|110ml

本試劑盒適合于一抗為兔IgG的免疫組化實(shí)驗(yàn)DAB顯色。SP法檢測(cè)試劑盒是專為免疫組化和其他免疫檢測(cè)而設(shè)計(jì)的，用以顯示組織和細(xì)胞中抗原分布。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，同親和素一樣，對(duì)生物素有高的親和力，親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（PI=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，因此基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。

試劑盒組成：

組分	3ml	6ml	18ml
封閉液（5%BSA）	3ml	6ml	18ml
3% H2O2	3ml	6ml	18ml
生物素-羊抗兔IgG濃縮液	30μl	60μl	180μl
鏈酶親和素-POD濃縮液	30μl	60μl	180μl
稀釋液	10ml	20ml	60ml
20×DAB顯色液A	0.3ml	0.6ml	1.8ml
20×DAB顯色液B	0.3ml	0.6ml	1.8ml

保存：如果長(zhǎng)時(shí)間不使用，請(qǐng)將所有試劑存放于-20℃，如經(jīng)常使用，可將封閉液，3%H2O2和20×DAB顯色液B存放于2-8℃以方便使用。

操作步驟（以石蠟切片為例）：
1．切片常規(guī)脫蠟至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2．3%H2O2室溫處理5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。
3．可選步聚：
  a、熱修復(fù)抗原，將切片浸入0.01M檸檬酸鈉緩沖液（PH6.0），電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5～10分鐘后，反復(fù)1～2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1～2次。
  b、酶消化，滴加消化液，37℃10分鐘，PBS（pH7.2-7.4）洗滌2～3次。
  c、跳過(guò)此步，直接進(jìn)入下一步。
4．滴加封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體，免洗。
5．用稀釋液將一抗按一定比例稀釋（稀釋后的一抗4℃可保存一周），也可另行購(gòu)買抗體稀釋液。滴加稀釋的一抗37℃孵育1小時(shí)左右或20℃2小時(shí)左右，也可4℃過(guò)夜。PBS（pH7.2-7.4）洗滌3次，每次2分鐘。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō)，陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間；背景過(guò)高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）
6．根據(jù)用量，用稀釋液將生物素-羊抗兔IgG濃縮液按1:100稀釋成工作液(1ml稀釋液加入10μl生物素-羊抗兔IgG濃縮液混勻，此工作液4℃可保存一周)。滴加生物素-羊抗兔IgG工作液，20-37℃孵育30分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗滌3次，每次2分鐘。
7．根據(jù)使用量，用稀釋液將鏈酶親和素-POD濃縮液按1:100稀釋成工作液(1ml稀釋液加入10μl鏈酶親和素-POD濃縮液混勻，此工作液4℃可保存一周)。滴加鏈酶親和素-POD工作液，20-37℃，30分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗滌4次，每次5分鐘。
8．DAB顯色：根據(jù)用量，用PBS（pH7.2-7.4）配制，按1mlPBS加入50μl 20×DAB顯色液A，加入50μl 20×DAB顯色液B。充分混勻后滴加到切片上。室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間，一般在5-30分鐘之間。蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。
9．蘇木素輕度復(fù)染。脫水，透明，封片。顯微鏡觀察。

對(duì)于細(xì)胞爬片，固定后，PBS漂洗兩次，再用0.5% Triton X-100室溫孵育20分鐘，PBS漂洗兩次，3%H2O2處理15分鐘；PBS漂洗兩次，接上述第4步。
對(duì)于冰凍切片，固定后，PBS漂洗兩次，接上述第二步。

注意事項(xiàng)：
如果染色背景過(guò)高，在SP反應(yīng)之后，DAB顯色之前，用加有0.01-0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗滌切片4次，PBS洗2次，然后DAB顯色。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
YT075	DAB辣根過(guò)氧化物酶顯色試劑盒	共20ml|共100ml
YT085	漂片抗原修復(fù)液(10X)	100ml
YT088	免疫染色一抗稀釋液	100ml
YT089	免疫染色洗滌液	250ml
ZN1870	EDTA脫鈣液	500ml
ZN1872	Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒	1盒
ZN1906	BSA PBS緩沖系統(tǒng)封閉液(干粉)	1包

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名稱：蛋白A和G瓊脂糖
貨號(hào)：YT883
規(guī)格：2ml
本品主要用于免疫沉淀或免疫共沉淀，也可以用于抗體的純化。

Protein A+G Agarose適合于免疫沉淀所有Protein A Agarose和Protein A+G Agarose單獨(dú)可以免疫沉淀的抗體，包括mouse IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs，以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。

Protein A和Protein G都共價(jià)交聯(lián)到4% agarose beads上，2ml Protein A+G Agarose中共含有約2mg重組的Protein A+G。2 ml Protein A+G Agarose共可以結(jié)合約14mg human IgG。

Protein A+G Agarose配制在TBS溶液中，2ml中共含有0.5ml Agarose beads。

本Protein A+G Agarose如果用于常規(guī)的免疫沉淀，可以免疫沉淀100次。

注意事項(xiàng)：
1. 請(qǐng)勿冷凍保存本產(chǎn)品。
2. Protein A+G Agarose使用前一定要充分重懸，即充分顛倒若干次使混合均勻。
3. 從蛋白樣品收集開(kāi)始，所有步驟中蛋白樣品都必須在4℃或冰上操作。

儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年。

名稱：抗c-Myc標(biāo)簽抗體瓊脂糖介質(zhì)
貨號(hào)：WE0329
規(guī)格：100μl
抗Myc標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)是將抗Myc標(biāo)簽的單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)到瓊脂糖上，此種瓊脂糖能夠用于免疫沉淀或者免疫共沉淀，檢測(cè)含有Myc標(biāo)簽的蛋白。

抗體類型：鼠單克隆抗體IgG1
免疫原：人工合成第410-419位多肽序列(EQKLISEEDL)
應(yīng)用范圍：IP

名稱：EDTA脫鈣液
貨號(hào)：ZN1870
規(guī)格：500ml
保存條件：4℃保存 ,一年有效，避免陽(yáng)光直射。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
在病理實(shí)驗(yàn)制作切片時(shí)，我們會(huì)經(jīng)常碰到一些含鈣組織，而且鈣十分堅(jiān)硬。由于組織中的鈣和石蠟之間的密度不同，含鈣的組織一般不能直接制作切片。骨組織含鈣量zuì多。除了骨組織之外其它組織也可發(fā)生鈣化，在組織中形成鈣化區(qū)，所以需要經(jīng)過(guò)脫鈣過(guò)程。脫鈣是制作骨組織切片的重要環(huán)節(jié)，尤其是要進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色的骨組織。
乙二胺四乙酸(EDTA)與羥基磷灰石結(jié)晶的外層鈣結(jié)合，形成可溶性的非離子化合物，同時(shí)又促進(jìn)晶體內(nèi)層的結(jié)合鈣向外轉(zhuǎn)移。借助這種連續(xù)性的作用使羥基磷灰石晶體逐漸融解，pH中性時(shí)可起螯合作用。其特點(diǎn)是脫鈣時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)骨組織的損傷少，酶活性(堿性磷酸酶)和細(xì)胞抗原性保存較好，制作的切片可用于組織化學(xué)和免疫組化分析。
主要用途：
用于骨組織、牙齒等脫鈣。
使用說(shuō)明：
1．將骨組織截成0.5cm×0.3cm×0.2cm大小骨片，生理鹽水清洗后立即投入冷凍的固定液中，4℃固定 12 h~24 h；固定結(jié)束后骨片在0.2mol磷酸緩沖液中充分漂洗。
2．漂洗后投入脫鈣液中，室溫下脫鈣，每日檢查脫鈣情況，直至骨片脫鈣完全為止。脫鈣結(jié)束后，骨片用蒸餾水沖洗20min，脫鈣液每隔4-5天更換一次新液，經(jīng)過(guò) 3次更換新液后，此后每天更換新液，但請(qǐng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)具體分析。以大頭針能刺進(jìn)骨密質(zhì)為完成脫鈣標(biāo)準(zhǔn)。
3．然后進(jìn)入常規(guī)脫水處理程序并包埋、切片。
注意事項(xiàng)：
1.為使脫鈣更為充分，每次zuì好更換新液，這既棄去了脫掉的鈣鹽，增加脫鈣強(qiáng)度，又起到降低脫鈣溫度的作用。
2.脫鈣時(shí)間以脫鈣完成為標(biāo)準(zhǔn)：以大頭針能輕易刺進(jìn)骨密質(zhì)為準(zhǔn)。
3.脫鈣溫度不要太高，一般以室溫(25℃)為宜，高溫可加快脫鈣速度，但可破壞組織中的核酸而影響染色效果。低溫(4℃)則會(huì)減慢脫鈣速度，使組織在脫鈣液中浸泡過(guò)久而引起損傷。
4.為了提高 EDTA的脫鈣速度，骨組織取材盡量取薄。
5.為了提高 EDTA的脫鈣速度，也可以采用微波脫鈣。用微波爐輔助脫鈣可以大大縮短脫鈣時(shí)間，以微波間歇脫鈣，每次輻射1分鐘，每次輻射之間都將燒杯移至室溫，冷卻 5分鐘，以保證每次的微波輻射脫鈣液的溫度不至于太高(70℃)。脫鈣時(shí)脫鈣液溫度過(guò)高，易導(dǎo)致假陰性，背景色深等缺點(diǎn)。因此，在時(shí)間要求不緊迫的前提下，該方法也不應(yīng)是選。
6.為達(dá)到骨組織既充分脫鈣，又保護(hù)骨組織的抗原不受破壞，需要對(duì)含鈣的組織充分固定之后再進(jìn)行脫鈣。然后再行常規(guī)制片。

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