WH0026 多糖多酚植物基因組DNA提取試劑

北京百奧萊博供應(yīng)的多糖多酚植物基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多多糖多酚植物基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)等DNA提取純化產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購。...
特別提示:包括多糖多酚植物基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:多糖多酚植物基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)
英文名稱:Extraction kit for genomic DNA from plant
產(chǎn)品貨號(hào):WH0026
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次
本試劑盒適用于從多種植物的不同組織中快速提取基因組DNA,特別適用于多酚、多糖含量高的植物組織和植物干粉。離心柱中獨(dú)特的硅基質(zhì)材料和其配備的緩沖溶液能有效去除植物組織中多糖、多酚復(fù)合物和酶抑制劑,純化過的基因組DNA可直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
·簡(jiǎn)單快速:1h內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA。
·純度高、質(zhì)量好:純化過的基因組DNA可直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
試劑盒組成:
組分 | 50T | 200T |
緩沖液GP1 | 40ml | 160ml |
緩沖液GP2 | 40ml | 160ml |
緩沖液GD | 13ml | 52ml |
漂洗液PW | 15ml | 50ml |
洗脫緩沖液TE | 15ml | 60ml |
吸附柱CB3 | 50個(gè) | 200個(gè) |
收集管(2ml) | 50個(gè) | 200個(gè) |
保存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。
自備試劑:液氮、無水乙醇、酚lǜ仿、RNaseA(可選)
注意事項(xiàng):(請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小、提取量也下降。
2.若緩沖液GP1和GP2中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,并搖勻后使用。
使用方法:
使用前請(qǐng)先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。
1.取植物新鮮組織約100mg或干重組織約30 mg,加入液氮充分碾磨。
2.將研磨好的粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有700μl 65℃預(yù)熱緩沖液GP1的離心管中(實(shí)驗(yàn)前在預(yù)熱的GP1中加入巰基乙醇,使其終濃度為0.1%),迅速顛倒混勻后,將離心管放在65℃水浴20 min,水浴過程中顛倒離心管以混合樣品數(shù)次。
3.加入700μllǜ仿,充分混勻,12000rpm (~13400×g )離心5 min。
注:若提取富含多酚或淀粉的植物組織,可在第3步前,用酚:lǜ仿/1:1進(jìn)行等體積抽提。
4.小心地將上一步所得上層水相轉(zhuǎn)入一個(gè)新的離心管中,加入700μl緩沖液GP2,充分混勻。
5.將混勻的液體轉(zhuǎn)入吸附柱CB3中,12000rpm (~13400×g )離心30 sec,棄掉廢液。(吸附柱容積為700μl左右,可分次加入離心。)
6.向吸附柱CB3中加入500 μl緩沖液GD(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(~13400×g )離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。
7.向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(~13400×g )離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。
8.重復(fù)操作步驟7.
9.將吸附柱CB3放回收集管中,12000rpm(~13400×g)離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
10.將吸附柱CB3轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200 μl洗脫緩沖液TE,室溫放置2-5 min,12000rpm(~13400×g )離心2 min,將溶液收集到離心管中。
注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50 μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率;且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室溫放置2 min,12000rpm(~13400×g)離心2 min。
DNA濃度及純度檢測(cè):
1.得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)?;厥盏玫降腄NA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。
2.DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
3.OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用ddH2O,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但并不表示純度低。
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