特別提示:包括PCR試劑盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上樣液)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:PCR試劑盒(含YT Taq酶,Buffer,dNTP,上樣液)
英文名稱:PCR Kit with YT Taq
產(chǎn)品貨號:YT381
產(chǎn)品規(guī)格:400次
本PCR試劑盒帶有YT Taq DNA Polymerase(YT373)、PCR buffer、dNTP和上樣緩沖液,自備模板和引物即可進(jìn)行PCR反應(yīng),適合用于各種常規(guī)PCR以及T載體克隆、點(diǎn)突變等,能在擴(kuò)增DNA模板的情況下同時保證高保真性。本試劑盒用于50微升的PCR反應(yīng)體系,足夠用于160個反應(yīng),用于20微升的PCR反應(yīng)體系,足夠用于400個反應(yīng)。
產(chǎn)品組份:
YT Taq DNA Polymerase (5U/μl)————200U
10×Taq Buffer (with Mg2+)——————1ml
dNTP (2.5mM each)——————————0.7ml
6×DNA Loading Buffer————————1ml×2
儲存條件:-20℃
根據(jù)您的關(guān)注的
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關(guān)注
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名稱:PCR級海藻糖溶液
貨號:BTN130506
規(guī)格:1.5mL
本產(chǎn)品為濃度為5M的海藻糖的水溶液,可以直接添加到PCR反應(yīng)體系或逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中提高酶的熱穩(wěn)定性和活性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.在反應(yīng)體系中加入海藻糖,可以增加熱敏感的酶在高溫下的穩(wěn)定性和活性。
2. 海藻糖能增加鼠白血病病毒逆轉(zhuǎn)錄酶(Reverse Transcripatase)的熱穩(wěn)定和熱激活特性,使其在60℃仍具有全部活性,足以在mRNA二級結(jié)構(gòu)誘導(dǎo)終止反應(yīng)之前合成全長的cDNA,反應(yīng)效率大大提高。
3. 有助于提高干燥保存的酶的活性。
儲存條件:低溫運(yùn)輸,4℃保存,保存期一年
使用方法:按照1/3體積,將本產(chǎn)品加入到PCR體系中即可。
名稱:PCR級甲酰胺
貨號:BTN100839
規(guī)格:250mg
本產(chǎn)品為PCR級的甲酰胺,其可以促進(jìn)某些引物、模板退火,降低帶有二級結(jié)構(gòu)的DNA的變性溫度,是一種常用的PCR增強(qiáng)劑。
儲存條件:低溫運(yùn)輸、-20℃保存,有效期一年。
名稱:dNTP套裝(100mM)
貨號:YT389
規(guī)格:4×50μl
本品為包裝的dATP、dCTP、dGTP和dTTP共4種溶液套裝,每種的濃度均為100mM,適合用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反應(yīng)、DNA測序、DNA標(biāo)記等各種常規(guī)分子生物學(xué)反應(yīng)。
本套裝中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液均用超純水配制,并用高純度NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0,濃度為100mM,即100mmol/L。
本套裝中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本套裝中的dATP、dCTP、dGTP和dTTP溶液經(jīng)測試,可以直接用于PCR等各種常規(guī)分子生物學(xué)反應(yīng)。
儲存條件:-20℃。
名稱:2×BAmp MasterMix(含染料)
貨號:WE0106
規(guī)格:5ml
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑組成的預(yù)混體系,濃度為2×。BAmp DNA Polymerase是一種兼具高擴(kuò)增效率和高保真性的耐熱聚合酶。其主要特點(diǎn)是可以擴(kuò)增長片段DNA,尤其在擴(kuò)增>10 kb的DNA片段方面,其更加明顯,所擴(kuò)增的片段zuì長可以達(dá)到40 kb。該酶具有高度的延伸和校對能力,保真度高于普通Taq酶。預(yù)配好的PCR混合液使操作更加簡單快捷,可zuì大限度地減少人為誤差和污染。的MasterMix配方使整個反應(yīng)體系非常穩(wěn)定,重復(fù)性好。本產(chǎn)品已加入染料(藍(lán)色),反應(yīng)結(jié)束后可直接進(jìn)行電泳檢測,無需再使用上樣緩沖液。擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3"端附有一個“A”堿基,因此可直接用于T/A克隆。適用于構(gòu)建基因圖譜、序列測定及分子遺傳學(xué)研究等。
產(chǎn)品組成:
組份
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1ml
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5ml
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2×BAmp MasterMix(With Dye)
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1ml
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5×1ml
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ddH2O
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1ml
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5×1ml
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注意:2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
質(zhì)量控制:
1、經(jīng)檢驗(yàn)無外源核酸酶活性;
2、PCR方法檢測無宿主殘余DNA;
3、能有效地?cái)U(kuò)增多種基因組中的單拷貝基因。
使用方法:
以下舉例為以人基因組DNA為模板,擴(kuò)增1 kb的片段的PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件,實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。
1、PCR反應(yīng)體系
試劑
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50μl反應(yīng)體系
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終濃度
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2×BAmp MasterMix(With Dye)
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25μl
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1×
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Forward Primer,10μM
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2μl
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0.4μM
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Reverse Primer,10μM
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2μl
|
0.4μM
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Template DNA
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<0.5μg
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<0.5μg/50μl
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ddH2O
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up to 50μl
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注意:引物濃度請以終濃度0.1-1.0μM作為設(shè)定范圍的參考。擴(kuò)增效率不高的情況下,可提高引物的濃度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時,可降低引物濃度,由此優(yōu)化反應(yīng)體系。
2、PCR反應(yīng)條件
步驟
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溫度
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時間
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循環(huán)數(shù)
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預(yù)變性
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94℃
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2 min
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變性
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94℃
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30 s
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25-35 個循環(huán)
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退火
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55-65℃
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30 s
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延伸
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72℃
|
30 s
|
終延伸
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72℃
|
5 min
|
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注意:
1)一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引物的熔解溫度Tm低5℃,無法得到理想的擴(kuò)增效率時,適當(dāng)降低退火溫度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時,提高退火溫度,由此優(yōu)化反應(yīng)條件。
2)延伸時間應(yīng)根據(jù)所擴(kuò)增片段大小設(shè)定,BAmp DNA Polymerase的擴(kuò)增效率為2.0 kb/min。
3)可根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的下游應(yīng)用設(shè)定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少,擴(kuò)增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,錯配機(jī)率會增加,非特異性背景嚴(yán)重。所以在保證產(chǎn)物得率的前提下應(yīng)盡量減少循環(huán)次數(shù)。
儲存條件:-20℃,避免反復(fù)凍融。

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