特別提示:包括CCK-8法細(xì)胞增殖檢測試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:CCK-8法細(xì)胞增殖檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:KFS320
產(chǎn)品規(guī)格:500T
此試劑盒是用于測定細(xì)胞增殖或毒性試驗中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。實驗的靈敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對細(xì)胞沒有毒性,可直接加入到細(xì)胞樣品中長時間孵育。
注意事項
1. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng),如果待檢測體系中存在較多的還原劑,例如一些抗氧化劑會干擾檢測,需設(shè)法去除。
2. 如果待測溶液有還原性,測定不含細(xì)胞,但含有細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液在450 nm 處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8 檢測溶液,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100 μl 培養(yǎng)基和10 μl 細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液進行檢測。
3. 用酶標(biāo)儀檢測前請確??變?nèi)沒有氣泡,否則會干擾測定。
4. 為保證您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃,含5% CO2 空氣及濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4. 向各孔中加入10 μl 的細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液。
5. 37℃下孵育1~4 小時。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。
結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
2. 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
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名稱:MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒
貨號:BTN140634
規(guī)格:500次
MTS是一種甲臜化合物,和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細(xì)胞里的線粒體脫氫酶降解而產(chǎn)生棕黃色水溶性的甲臜,通過測定甲臜的光譜吸收,進而可以測定細(xì)胞的增殖情況。原理如下:
產(chǎn)品特點:
1.本試劑盒是單溶液式細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑,主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑,溶液的穩(wěn)定性強,反應(yīng)的靈敏度高。
2.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
3.無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
4.與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
5.操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
儲存條件:低溫運輸,-20℃避光保存,有效期半年。
使用效果:
96孔板中加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時,加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,每孔中加入10μL的MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時。490nm波長檢測光密度。
備忘錄:
1.細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD值減去本底OD值(完全培養(yǎng)基加MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T為加藥細(xì)胞的OD值,C為對照細(xì)胞的OD值。
細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
2.求出T/C = 50%時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
名稱:中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
貨號:YT124
規(guī)格:500次
本試劑盒是一種基于細(xì)胞對于中性紅的攝入能力來檢測細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性的試劑盒。中性紅可以被活細(xì)胞所攝入,并在溶酶體中積累。在細(xì)胞增殖加快時,細(xì)胞數(shù)量增多,可以攝入的中性紅的量就會增加。在細(xì)胞受到損傷時,中性紅的攝入能力會下降。這樣通過對于中性紅攝入量的不同就可以確定細(xì)胞的增殖或毒性情況。中性紅同時也是一種pH指示劑,在酸性時呈紅色,在pH6.8升至pH8.0時由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。細(xì)胞核中的核酸呈酸性,因此細(xì)胞核會被染成紅色。由于溶酶體(lysome)中也是酸性環(huán)境,因此溶酶體也可以被中性紅染色液染成紅色。本試劑盒可以用于檢測500個樣品。
試劑盒組份:
中性紅染色液————————10ml
中性紅檢測裂解液——————100ml
注意事項:
1. 需準(zhǔn)備一臺可以測定A540的酶標(biāo)儀或微量分光光度計。
2. 次使用本試劑盒時建議先取少量樣品做好預(yù)實驗。
儲存條件:-20℃,有效期一年。

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