特別提示:包括抗原修復(fù)液I在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:抗原修復(fù)液I
產(chǎn)品貨號:ZN1954
產(chǎn)品規(guī)格:12ml
使用說明:組化實(shí)驗(yàn)中的抗原修復(fù)。將修復(fù)液覆蓋組織,修復(fù)時間視組織而定。
根據(jù)您的關(guān)注的
抗原修復(fù)液I,抗原修復(fù)液I,ZN1954,百奧萊博,,,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:
貨號
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名稱
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規(guī)格
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YT098
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抗熒光淬滅封片液(強(qiáng))
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5ml
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SY0774
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檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液(40×)
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125ml
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SY0775
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Tis-EDTA抗原修復(fù)液(50×)
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100ml
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ZN1880
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雙色蛋白上樣緩沖液4×(變性)
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1ml×3/1ml×6
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ZN1901
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麗春紅染色液(1×)
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100ml
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ZN1910
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PBS-T(含有0.05%Tween-20)緩沖系統(tǒng)封閉液
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500ml
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ZN1974
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抗熒光淬滅劑
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10ml
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關(guān)注
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名稱:PVDF膜活化浸潤液
貨號:YT065
規(guī)格:250ml
本品是一種綠色環(huán)保、無害的用于快速浸潤和活化PVDF膜的溶液,并且浸潤活化后的后續(xù)處理非常便捷。一個包裝的本產(chǎn)品可以用于約75-100張常規(guī)尺寸PVDF膜(約6.6×8.5cm)的浸潤和活化。
本產(chǎn)品安全,不含劇毒的甲醇或其它的有毒有害試劑,只需數(shù)秒時間就可以把疏水的PVDF膜充分浸潤和活化。并且浸潤活化后的PVDF膜只需簡單地用轉(zhuǎn)膜液洗滌數(shù)秒,即可被轉(zhuǎn)膜液快速平衡并用于后續(xù)的轉(zhuǎn)膜等實(shí)驗(yàn)。
PVDF膜是western blot實(shí)驗(yàn)中zuì廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì)之一,由于其在蛋白質(zhì)截留能力、機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)相容性上都具有優(yōu)越的性能而被廣泛使用。PVDF膜適用于化學(xué)發(fā)光(如ECL Star、ECL Plus、ECL等)、常規(guī)顯色(如DAB、TMB)、染色、同位素等方法檢測蛋白。常見的PVDF膜孔徑有0.45μm和0.2μm兩種,后者孔徑小,對小分子蛋白有較好的攔截和吸附作用,背景可能會比前者微高。
PVDF膜是疏水性的且不帶電荷,不能被常規(guī)的轉(zhuǎn)膜液所浸潤,所以需要在使用前進(jìn)行預(yù)處理以浸潤和活化。zuì常見的方法是使用劇毒的甲醇浸潤和活化PVDF膜,使PVDF膜中微孔內(nèi)的空氣被低表面張力的甲醇所替代,從而易于后續(xù)水或者緩沖液進(jìn)入PVDF膜中的微孔內(nèi),使PVDF膜從疏水性變成親水性,此時白色的PVDF膜會變成半透明狀。通常情況,浸潤活化后的PVDF膜還需要在轉(zhuǎn)膜液中適當(dāng)平衡2-3次,以充分去除膜上的甲醇并確保轉(zhuǎn)膜時的均一性,才能用于后續(xù)的轉(zhuǎn)膜等實(shí)驗(yàn)。
我公司的PVDF膜浸潤活化液采用了優(yōu)化的特殊配方,含有能產(chǎn)生特殊表面張力的去垢劑,在確保安全情況下,又能實(shí)現(xiàn)PVDF膜的快速浸潤和活化,并且后續(xù)也易被轉(zhuǎn)膜液所平衡,是PVDF膜浸潤活化的理想選擇。
注意事項(xiàng):
1. 本產(chǎn)品含有揮發(fā)性成分,使用完畢后請蓋緊瓶蓋,以防失效。
2. PVDF膜應(yīng)使用鑷子輕輕夾住邊角,以免劃痕損壞PVDF膜。
3. PVDF膜一經(jīng)浸潤和活化,需保持濕潤,可放置于western轉(zhuǎn)膜液或洗滌液中。如不慎被干燥,則需要重新浸潤和活化。
儲存條件:4℃,有效期一年。
名稱:Western一抗二抗清除劑(中性)
貨號:YT073
規(guī)格:250ml
本品用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后,有時還需要檢測tubulin、actin等表達(dá)量相對穩(wěn)定的蛋白作為參照,或檢測其它蛋白進(jìn)行比較。通過使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個SDS-PAGE膠相比,不僅省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強(qiáng)。
使用Western一抗二抗去除液多次重復(fù)使用同一張膜,會導(dǎo)致蛋白信號的減弱。但是,本W(wǎng)estern一抗二抗去除液,經(jīng)過多個抗體的檢測試驗(yàn),通??梢灾貜?fù)利用膜3-5次。使用本試劑只需大約20-30分鐘即可實(shí)現(xiàn)蛋白膜的重復(fù)使用,然后可以進(jìn)行封閉等后續(xù)的Western操作。
百奧萊博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結(jié)合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來解除一抗二抗的結(jié)合,同時又不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失。
抗體清除劑選型表:
產(chǎn)品編號
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YT071
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YT072
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YT073
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YT074
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產(chǎn)品名稱
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Western一抗二抗清除劑(強(qiáng)堿性)
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Western一抗二抗清除劑(弱堿性)
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Western一抗二抗清除劑(中性)
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Western一抗二抗清除劑(酸性)
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產(chǎn)品包裝
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250ml
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250ml
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250ml
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250ml
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pH
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強(qiáng)堿性
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弱堿性
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中性
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酸性
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對于膜上蛋白的保留效果
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好
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好
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好
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好
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對于一抗二抗的去除效果
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好
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好
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好
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好
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去除一抗二抗所需時間
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15-20分鐘
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20-30分鐘
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20-30分鐘
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40-80分鐘
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適用膜的類型
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PVDF和NC
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PVDF和NC
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僅PVDF
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PVDF和NC
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腐蝕性
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強(qiáng)
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弱
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無
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弱
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用于普通的Western檢測時蛋白膜上一抗二抗的去除可以任選一種去除液。如果是NC膜,即硝酸纖維素膜時,不宜選用YT071N。從時間角度考慮,強(qiáng)堿性、弱堿性和中性的去除液所需的時間都比較短,可以優(yōu)先考慮。從價(jià)格因素考慮,強(qiáng)堿性的去除液zuì高。從安全性考慮,中性的去除液由于沒有腐蝕性而表現(xiàn)出更高的安全性。弱堿性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正確操作,并進(jìn)行適當(dāng)防護(hù),使用強(qiáng)堿性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
對于特定的抗原和抗體,很難說哪一種Western一抗二抗去除液的效果zuì好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳時,可以考慮適當(dāng)延長一抗二抗去除液的孵育時間,同時確保孵育時的溫度不低于20℃。溫度過低時一抗二抗的去除效果會下降。同時也可以考慮嘗試其它的一抗二抗去除液,以摸索出zuì佳的適合您實(shí)驗(yàn)條件的Western一抗二抗去除液。
注意事項(xiàng):
1. 使用辣根過氧化物酶(HRP),任何一次封閉(blocking)都應(yīng)當(dāng)使用5%脫脂牛奶,如果使用堿性磷酸酯酶,任何一次封閉都應(yīng)當(dāng)使用酪蛋白(casein)。
2. 本W(wǎng)estern一抗二抗去除液僅適用于PVDF膜。用于硝酸纖維素膜時會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白有非常顯著的損失。
3. 使用化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測適用本試劑。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測,例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
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