特別提示:包括細(xì)胞質(zhì)染色試劑盒-C01在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng):細(xì)胞質(zhì)染色試劑盒-C01
產(chǎn)品貨號(hào):HR0610
產(chǎn)品規(guī)格:500T
C01細(xì)胞質(zhì)染色試劑盒是利用C 系列探針進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)染色的試劑盒。本試劑盒中的C01細(xì)胞質(zhì)染色探針為綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞質(zhì)探針,具有490/515nm的zuì大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)。
C系列探針是對(duì)活細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行選擇性染色的一類(lèi)熒光染料,該系列探針可以選擇性標(biāo)記細(xì)胞質(zhì),只需要納摩爾級(jí)(nM)濃度即可有效標(biāo)記活細(xì)胞。
C系列探針可自由穿過(guò)細(xì)胞膜,適用于觀察細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部生物合成及相關(guān)發(fā)病機(jī)理。
C系列細(xì)胞質(zhì)探針具有多種顏色可以選擇,可根據(jù)情況對(duì)樣品進(jìn)行多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。除了本試劑盒的綠色熒光探針,還可以提供紅色、藍(lán)色、橙色等顏色的染色試劑盒。
C01細(xì)胞質(zhì)綠色熒光探針有強(qiáng)的疏水性,能夠輕易穿透活細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的性分子CF,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi),使胞質(zhì)發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。CA zuì大激發(fā)波長(zhǎng)490nm,zuì大發(fā)射波長(zhǎng)520nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm 左右,發(fā)射波長(zhǎng)為 510~530nm??梢允褂昧魇郊?xì)胞儀或激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞。
除了針對(duì)細(xì)胞質(zhì)的C 系列熒光染色產(chǎn)品,還可以為您各種N 系列、M 系列、E 系列、G 系列和L 系列細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、線(xiàn)粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)熒光染色試劑盒,以及鈣離子、鈉離子、神經(jīng)細(xì)胞等各種熒光染色試劑盒產(chǎn)品。
儲(chǔ)存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。
有效期:六個(gè)月。
使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
使用限制:本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
產(chǎn)品更新:我司會(huì)更新或升級(jí)產(chǎn)品,以?xún)?yōu)化和增強(qiáng)其使用性能,產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)會(huì)進(jìn)行相應(yīng)的版本更新。使用產(chǎn)品時(shí),請(qǐng)參照隨產(chǎn)品附帶的說(shuō)明書(shū),不要參照網(wǎng)上下載的說(shuō)明書(shū),可能是不同的版本。
使用安全:使用時(shí)需要合適的實(shí)驗(yàn)室外套,一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛,應(yīng)立即用水沖洗。
注意事項(xiàng):
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
● 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
試劑盒以外自備試劑和儀器:
● PBS ● HBSS ●離心機(jī) ●熒光顯微鏡/激光共聚焦顯微鏡
使用注意事項(xiàng):
● C01染色液為DMSO溶液,冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài),易粘附在管壁、吸頭壁。注意
需要加熱溶解,吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱,否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
● 使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對(duì)其進(jìn)行簡(jiǎn)短離心使DMSO溶液集中于管底。
● C01探針容易受潮,受潮后穩(wěn)定性較差,注意干燥保存。
● 吸取C01探針母液時(shí)要用干燥的新吸頭,不能使用含水的吸頭。
● 未使用完的C01探針母液請(qǐng)擰緊螺旋蓋,避免受潮失效。
● C01探針工作液含水,配制后不可以長(zhǎng)期保存,須現(xiàn)配現(xiàn)用。
● 細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
●標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類(lèi)而異,根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整,在每次實(shí)驗(yàn)前,請(qǐng)先根
據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求、細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞的膜通透性等進(jìn)行優(yōu)化,確定zuì佳條件。以下方法僅供參考。
●染色后立即進(jìn)行分析。
使用方法:
1.染色工作液配制:
根據(jù)樣本數(shù)量,用染料稀釋液將L03熒光染料10倍稀釋?zhuān)儆孟鄳?yīng)的培養(yǎng)基或者HBSS緩沖液50-100倍稀釋?zhuān)渲瞥扇旧ぷ饕骸?br />
【注】:
● 也可以直接用相應(yīng)的培養(yǎng)基或HBSS等緩沖液稀釋C01染料至所需濃度。
● 建議收到產(chǎn)品后,根據(jù)單次使用量,對(duì)母液進(jìn)行小量分裝,每次使用一管,試劑-20℃避光凍存,一年穩(wěn)定。開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前,使用培養(yǎng)基或HBSS緩沖液稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作濃度。工作濃度為根據(jù)不同細(xì)胞的預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定的zuì佳工作濃度,一般染色終濃度500-1000倍稀釋。
● 工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
● 為了降低探針加載過(guò)度可能引起的假陽(yáng)性,建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。
● 若細(xì)胞在染色后于不含染料的培養(yǎng)基中孵育,熒光信號(hào)會(huì)衰減。
2.細(xì)胞染色
2.1對(duì)于貼壁細(xì)胞
1)將細(xì)胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上,加入合適培養(yǎng)基,使其爬片生長(zhǎng)。
2)待細(xì)胞生長(zhǎng)到合適豐度,吸除培養(yǎng)液,加入適量37℃預(yù)熱的含探針工作液。于生長(zhǎng)狀態(tài)下孵育30分鐘~2小時(shí)(具體孵育時(shí)間需根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型而定)。
3)利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡(含合適濾片)下觀察。
【注】:
● 若染色不夠充分,建議增加染料濃度或延長(zhǎng)染色時(shí)間。
2.2對(duì)于懸浮細(xì)胞
1)離心,吸除上清。
2)利用37℃預(yù)熱的探針工作液重懸細(xì)胞,于生長(zhǎng)狀態(tài)下孵育30分鐘~2小時(shí)(具體時(shí)間需根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型而定)。
3)離心,吸除染色液,加入新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。
4)置于熒光鏡下觀察。
【注】:
●對(duì)于懸浮細(xì)胞,也可將細(xì)胞貼附于經(jīng)細(xì)胞粘合劑處理過(guò)的蓋玻片上,然后使用類(lèi)似于貼壁細(xì)胞的方法進(jìn)行染色。
● 若染色不夠充分,建議增加染料濃度或延長(zhǎng)染色時(shí)間。
3.觀察結(jié)果:
在熒光顯微鏡(含合適濾片)下觀察細(xì)胞。zuì大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為490/515nm。
根據(jù)您的關(guān)注的
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名稱(chēng):甲基綠-派洛寧染色液(MGP染色液)
貨號(hào):YT168
規(guī)格:100ml
本染色液是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成綠色或藍(lán)綠色,把細(xì)胞漿和細(xì)胞核中的核仁染成紅色的染色液。甲基綠可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合,從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色;而派洛寧可以和細(xì)胞漿或核仁中的RNA結(jié)合,從而可以使細(xì)胞漿和核仁被染色。改進(jìn)了染色液配制方法,不含很多甲基綠-派洛寧染色液中使用的劇毒甲醇。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本甲基綠-派洛寧染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行甲基綠-派洛寧復(fù)染。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。
注意事項(xiàng):
1. 需自備4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹(shù)膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備90%乙醇,無(wú)水乙醇以及二甲苯。
2. 次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
儲(chǔ)存條件:室溫避光,有效期一年。
名稱(chēng):酸性酯酶染液
貨號(hào):SNM371
規(guī)格:5ml×4
名稱(chēng):姬姆薩染液(10×)
貨號(hào):KFS121
規(guī)格:25ml
姬姆薩染料為天青色素、伊紅、次甲藍(lán)的混合物,本染色液zuì適于血液涂抹標(biāo)本、血球、瘧原蟲(chóng)、立克次體以及骨髓細(xì)胞、脊髓細(xì)胞等的染色。
染前用蛋白酶等進(jìn)行處理,然后再用姬姆薩染液染色,在染色體上,可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞及染色體圖像。
試劑盒組份:
10×姬姆薩染色原液 25mL
10×姬姆薩稀釋液 25mL
染色步驟1.根據(jù)需要量,取8ml 雙蒸水,加入姬姆薩原液1ml,再加入姬姆薩稀釋液1ml,混勻即為工作液,此工作液常溫可保存兩周(如果無(wú)法短期用完,請(qǐng)確保姬姆薩原液不要見(jiàn)到水或者其他緩沖液)。2.按常規(guī)方法制備血涂片,待血膜干后,用甲醇固定2~3 分鐘;3.將血涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加2~3 滴染色工作液,使覆蓋全部血膜(具體用量視樣品大小而定),室溫染色15~30 分鐘。4.用自來(lái)水緩慢從玻片一端沖洗(注意勿先倒去染液或直接對(duì)血膜沖洗),涼干后鏡檢。
四、注意事項(xiàng)1.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。2.如果染色過(guò)濃或者過(guò)淡,請(qǐng)調(diào)整姬姆薩原液加入量(姬姆薩原液zuì常用的稀釋比例是10 倍,但有時(shí)候可能會(huì)稀釋5 倍或者15 倍)。3.姬姆薩原液采用常規(guī)方法配制(姬姆色素:甘油:甲醇=1:66:66),請(qǐng)?jiān)谑褂脮r(shí)小心不要接觸到水。否則時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)失效。
儲(chǔ)存:2~8℃,避光,有效期12個(gè)月。

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