非變性蛋白裂解抽提液由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品僅用于生物化學(xué)研究方面，我公司的非變性蛋白裂解抽提液品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購(gòu)。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營(yíng)血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國(guó)內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長(zhǎng)期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。

特別提示：包括非變性蛋白裂解抽提液在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：非變性蛋白裂解抽提液
產(chǎn)品貨號(hào)：HR0261
產(chǎn)品規(guī)格：50ml|100ml

非變性蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞和組織的裂解液。能裂解細(xì)胞并充分釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白產(chǎn)物zuì大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細(xì)胞和組織樣本，主要用于Western，免疫沉淀和免疫共沉淀等。
裂解液中已含常用蛋白酶抑制劑，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin和磷酸酶抑制劑。

儲(chǔ)存條件：2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事項(xiàng)：
● 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。
● 整個(gè)過程須保持樣品處于低溫狀態(tài)。
●本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
● 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法：
A．細(xì)胞裂解
1．取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
2．用冷 PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3．每 5×106個(gè)細(xì)胞中加入500μl冷的裂解液(每106個(gè)細(xì)胞加100μl裂解液。大約相當(dāng)于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一個(gè)75 cm2培養(yǎng)瓶加1～2ml。
裂解液和細(xì)胞應(yīng)充分接觸。如果裂解液不足量，細(xì)胞裂解效率將會(huì)降低)，混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
4.在 4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
5．快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。
B．組織裂解
1．取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
2．將組織勻漿吸入另一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
3．將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。
上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br />
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BTN130529 真菌(酵母)專用蛋白酶抑制劑 1mL
YT626 考馬斯亮藍(lán)G250 5g
WE0318 檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液，100×) 100ml
WE0324 BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒(WB IHC) 40ml
SNM384 考馬斯亮藍(lán)G-250 5g
KFS008 免疫染色固定液 100ml
KFS020 TRA-1-81免疫組化試劑盒(IHC) 50T
SY0421 3×Flag-tag重復(fù)多肽 4mg|25mg

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名稱：考馬斯亮藍(lán)快速染色液
貨號(hào)：YT055
規(guī)格：250ml
本品是以考馬斯亮藍(lán)G250為染料，可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白凝膠的無污染、快速、高靈敏染色，或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測(cè)。18分鐘即可檢測(cè)到100ng條帶，約40分鐘可檢測(cè)到10ng條帶，約50分鐘即可獲得背景非常低的凝膠染色，約150分鐘即可獲得幾乎的無背景染色的蛋白條帶。

本考馬斯亮藍(lán)快速染色液是一種，無刺激性氣味的高度環(huán)保型染色液。普通的常規(guī)方法需使用劇毒的甲醇及強(qiáng)刺激性的乙酸，而百奧萊博的考馬斯亮藍(lán)快速染色液則采取全新配方，實(shí)現(xiàn)了染色時(shí)的和無刺激性氣味。

本品可以進(jìn)行高靈敏染色(詳細(xì)請(qǐng)參考使用說明)，zuì低可以清晰檢測(cè)到10ng的蛋白電泳條帶，參考下圖。


蛋白凝膠加入50ml去離子水微波爐高火煮3min，換去離子水后再煮3min，搖床搖5min，染色30min，脫色2h后的效果圖。蛋白(BSA)上樣量如圖中所示，清晰可見10ng條帶，并且凝膠背景已經(jīng)脫色至幾乎的無色。

快速染色時(shí)，使用本考馬斯亮藍(lán)快速染色和常規(guī)的考馬斯亮藍(lán)染色相比，效果基本一致，參考下圖。


百奧萊博考馬斯亮藍(lán)快速染色液(采用快速染色方法)和常規(guī)考馬斯亮藍(lán)法染色蛋白凝膠的染色效果對(duì)比。常規(guī)方法使用百奧萊博的考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(常規(guī)法)。蛋白樣品為BSA，凝膠為12% SDS-PAGE?？捡R斯亮藍(lán)快速染色液染色前，凝膠在去離子水中煮沸3min，搖床搖5min，然后用考馬斯亮藍(lán)快速染色液染色10min，再用去離子水脫色10min(不脫色也可以觀察到類似條帶，但背景會(huì)深一些)。

無需對(duì)蛋白和凝膠進(jìn)行固定，可以不進(jìn)行脫色，操作更加簡(jiǎn)單。本染色液和質(zhì)譜分析兼容，即經(jīng)過本染色液染色的蛋白條帶或蛋白點(diǎn)與常規(guī)的考馬斯亮藍(lán)G250染色一樣，可以用于后續(xù)的質(zhì)譜分析。

注意事項(xiàng)：
1. 本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)作必要防護(hù)。
2. 需自備去離子水。如無去離子水，也可以使用雙蒸水。
3. 如果使用微波爐加熱，請(qǐng)?zhí)貏e注意避免沸騰。以免因暴沸而導(dǎo)致凝膠碎裂。

儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年。

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