細(xì)胞內(nèi)Ca2+鈣離子檢測(cè)試劑盒是高品質(zhì)的細(xì)胞生物學(xué)試劑產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，細(xì)胞內(nèi)Ca2+鈣離子檢測(cè)試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)試劑之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營(yíng)血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國(guó)內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長(zhǎng)期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。 主營(yíng)產(chǎn)品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

特別提示：包括細(xì)胞內(nèi)Ca2+鈣離子檢測(cè)試劑盒(F04法)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：細(xì)胞內(nèi)Ca2+鈣離子檢測(cè)試劑盒(F04法)
產(chǎn)品貨號(hào)：HR8227
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T

鈣離子檢測(cè)試劑盒采用F04細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度熒光探針檢測(cè)鈣離子濃度水平的變化。鈣離子濃度變化是活細(xì)胞接受外界刺激后產(chǎn)生級(jí)聯(lián)反應(yīng)的重要信息傳遞方式，因此細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)介導(dǎo)的相關(guān)藥物篩選以及其他相關(guān)實(shí)驗(yàn)中非常重要的一種研究手段。
F04 具有高的細(xì)胞滲透性，經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單孵育即可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞加載。穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成不易透過(guò)細(xì)胞膜的F04新產(chǎn)物，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。F04 游離配體幾乎是非熒光性的，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。但是，當(dāng)它與細(xì)胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，熒光會(huì)增加60 至100倍，zuì大激發(fā)波長(zhǎng)為494nm，zuì大發(fā)射波長(zhǎng)為 516nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm 左右，發(fā)射波長(zhǎng)為 515～530nm?？梢允褂脽晒怙@微鏡、酶標(biāo)儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
F04熒光探針采用可見(jiàn)光激發(fā)，與傳統(tǒng)的紫外光激發(fā)的熒光探針相比，儀器的適用范圍更廣泛，具有更強(qiáng)的探針吸收性能，使得更低濃度的探針即可成功檢測(cè)Ca2+變化，從而降低了對(duì)活細(xì)胞的光毒性，檢測(cè)敏感度更高。

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融。
有效期：六個(gè)月。

※ ※ ※ 使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) ※ ※ ※
使用限制：本試劑僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
產(chǎn)品更新：我公司會(huì)更新或升級(jí)產(chǎn)品，以優(yōu)化和增強(qiáng)其使用性能，產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)會(huì)進(jìn)行相應(yīng)的版本更新。使用產(chǎn)品時(shí)，請(qǐng)參照隨產(chǎn)品附帶的說(shuō)明書(shū)，不要參照網(wǎng)上下載的說(shuō)明書(shū)，可能是不同的版本。需要zuì新電子版說(shuō)明書(shū)時(shí)可以在收到產(chǎn)品后發(fā)郵件索取。
使用安全：使用時(shí)需要合適的實(shí)驗(yàn)室外套，一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗。
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：
儀器
● 激光共聚焦/熒光顯微鏡/流式細(xì)胞儀/熒光酶標(biāo)儀等●離心機(jī)● 移液器●冰箱●冰盒
耗材
●離心管● 吸頭
試劑
● Hanks balanced salt solution(HBSS)● PBS

使用方法：

使用注意事項(xiàng)：
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
● 鈣離子染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài)，易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
●探針為了便于觀察防止誤操作導(dǎo)致?lián)p失，在試劑盒中時(shí)是采用透明管包裝，收到后可以離心移入干燥黑色避光密封管或者用鋁箔包裹避光。
●熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
●細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
●染色后立即進(jìn)行分析。
● F04探針容易受潮，穩(wěn)定性較差，注意干燥保存。從冰箱取出后，請(qǐng)確認(rèn)在干燥的環(huán)境放至室溫后再開(kāi)封。
● F04探針母液時(shí)要用干燥的新吸頭，不能使用含水的吸頭。
● 未使用完的F04探針母液請(qǐng)擰緊螺旋蓋，避免受潮失效。母液遇水易分解，如果長(zhǎng)期不用，建議根據(jù)每次使用量分裝保存，用封口膜封口，并用鋁箔紙包裹，放在一個(gè)密閉性能好的塑料袋中，并放入一包干燥劑，在≤-20℃密封避光保存。
● F04探針工作液含水，配制后不可以長(zhǎng)期保存，須現(xiàn)配現(xiàn)用。
● F04 融解后離心至管底部再打開(kāi)螺旋蓋，防止開(kāi)蓋時(shí)損失。
●可以在染色溶液中加入等體積的20% Pluronic F127溶液(可選步驟)，Pluronic F127可以幫助F04更快進(jìn)入細(xì)胞，不建議在Pluronic F127中長(zhǎng)期保存F04溶液。
●標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先確定zuì佳條件。在正式實(shí)驗(yàn)前先摸索一下細(xì)胞量、鈣離子熒光探針的終濃度、培養(yǎng)時(shí)間等，找到zuì佳實(shí)驗(yàn)條件。以下方法僅供參考。

1．染色工作液的配制：
用 HBSS 稀釋F04溶液400倍-4000倍，配制成F04染色工作液。
【注】：
● 推薦該探針加載終濃度在400-4000倍稀釋，具體的使用濃度需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化。
● 為了避免過(guò)度加載造成細(xì)胞毒性，建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用zuì低探針濃度。
● 工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍存。
2．收集培養(yǎng)好的待測(cè)細(xì)胞樣本，用HBSS洗滌細(xì)胞3次。
【注】：
● 沒(méi)有HBSS也可以用PBS洗細(xì)胞。
●培養(yǎng)基血清中的酯酶會(huì)降解F04，從而降低F04進(jìn)入細(xì)胞的效果。所以加工作液之前必須洗滌細(xì)胞，盡量去除培養(yǎng)基殘留。
3．離心去上清后，將F04染色工作液加入細(xì)胞，在37℃孵育20-60分鐘。
【注】：
● 關(guān)于孵育的時(shí)間，次預(yù)實(shí)驗(yàn)不能確定，建議先孵育30分鐘。
● 根據(jù)熒光效果：如果太強(qiáng)，適當(dāng)縮短時(shí)間；如果熒光強(qiáng)度太弱，適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。
●染色工作液加入量以覆蓋細(xì)胞即可。
4．用HBSS 洗滌細(xì)胞2-3次。
5．用HBSS重懸細(xì)胞。在37℃下再繼續(xù)孵育20-40分鐘。
6．然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光鈣離子檢測(cè)。激發(fā)波長(zhǎng)488-495nm，發(fā)射波長(zhǎng)516nm。

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M00395 雄激素受體拮抗劑(ODM-201) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
M00917 McMMAF 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
M01936 Hydroxyfasudil 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
M02493 Cytidine 1mL(10mM)|1g|5g
M02606 Ac-DEVD-AFC 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
M02608 Vitamin K4 1mL(10mM)|200mg|1g
M03999 Fenticonazole Nitrate 1mL(10mM)|10mg|50mg

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
M01085	integrin受體拮抗劑(GLPG0187)	1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
M01142	DNA損傷劑（Nedaplatin）	10mg|50mg
M01678	山楂酸(Maslinic acid)	1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
M01775	Chlormethine hydrochloride	1mL(10mM)|100mg
M01836	雙去甲氧基姜黃素(Bisdemethoxycurcumin)	1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

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