特別提示:包括PCR產(chǎn)物純化試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:PCR產(chǎn)物純化試劑盒
英文名稱:PCR product purification kit
產(chǎn)品貨號:RFT031
產(chǎn)品規(guī)格:100次|200次
本試劑盒采用離心吸附柱結(jié)合獨特的緩沖液系統(tǒng),從酶切、PCR等反應(yīng)溶液中純化DNA片段,同時除去蛋白質(zhì)、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒可回收100bp–10kb的DNA片段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率為30-50%)。每個吸附柱每次zuì多可吸附的DNA量約為10μg。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。
試劑盒特點:
1、結(jié)合液PB為亮黃色,便于觀察體系的pH是否合適。
2、操作快捷,單個樣品操作少于10分鐘。
操作步驟:
如非指出,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、在PCR反應(yīng)液中直接加入5倍體積的PB液,顛倒混勻后,全部加入到吸附柱CA2中,10000g離心30-60秒,到掉收集管中的廢液,將吸附柱CA2重新放入收集管中。
注意:
a.如果PCR反應(yīng)體系使用了石蠟油,無需去除,但要使用10倍體積的PB液。
b.如果反應(yīng)體系小于50μl,用水補至50μl體系,再加入PB液。
c.如果體系體積大于700μl,請分次上柱,保證全部溶液均加入到吸附柱中。
2、向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),10000g離心30-60秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
3、向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW,10000g離心30-60秒,倒掉廢液。
4、將離心吸附柱CA2放回收集管中,10000g離心2分鐘,盡量除去漂洗液。
注意:此步必不可少!如果漂洗液有殘留,將會影響回收效率和DNA質(zhì)量,進而影響下游實驗;離心后將吸附柱蓋子打開,室溫放置2分鐘,這樣將有助于徹底揮發(fā)殘余乙醇。
5、將吸附柱放到一個干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB,室溫放置2分鐘。10000g離心2分鐘收集DNA溶液。
注意:
a.可將洗脫緩沖液EB預(yù)熱到60-70℃后再加到吸附膜上,這樣可以提高洗脫效率。
b.CA2柱的洗脫體積不應(yīng)少于20μl,體積過小將會降低回收效率。
c.洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率
6、DNA產(chǎn)物-20℃保存。
儲存條件:室溫,有效期12個月。
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關(guān)注
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