Annexin V-FITC細(xì)胞由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗(yàn)，Annexin V-FITC細(xì)胞是我司眾多優(yōu)質(zhì)細(xì)胞凋亡與增殖之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營(yíng)血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國(guó)內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長(zhǎng)期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。 主營(yíng)產(chǎn)品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

特別提示：包括Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：YT131
產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

本試劑盒是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。一個(gè)包裝的本試劑盒共可以檢測(cè)20個(gè)細(xì)胞樣品。

試劑盒組份：
Annexin V-FITC——————100μl
Annexin V-FITC結(jié)合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220μl

Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。

Annexin V選擇性結(jié)合磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱PS)。磷脂酰絲氨酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷脂酰絲氨酸外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷脂酰絲氨酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷脂酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷脂酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。

用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。

本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。

本試劑盒的流式檢測(cè)效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測(cè)效果參考圖3。


圖1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的效果圖。Jurkat細(xì)胞未經(jīng)處理(A)或用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)(B)后，用本試劑盒染色，然后用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞的散射和熒光檢測(cè)。從圖中可以看出，經(jīng)過凋亡誘導(dǎo)劑喜樹堿處理后的細(xì)胞，其Annexin V-FITC染色陽(yáng)性并且PI染色陰性的細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽(yáng)性的細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽(yáng)性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現(xiàn)的細(xì)胞點(diǎn)是許可范圍內(nèi)的檢測(cè)誤差。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。


圖2.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測(cè)效果驗(yàn)證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(shí)后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽(yáng)性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽(yáng)性的凋亡細(xì)胞和雙陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。出現(xiàn)的非預(yù)期的細(xì)胞點(diǎn)完全在許可的誤差范圍內(nèi)。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)可能會(huì)因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

注意事項(xiàng)：
1. 如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
2. 染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
3. 如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
4. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
5. 用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。

儲(chǔ)存條件：4℃避光，有效期6個(gè)月。

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BTN140634 MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 500次
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SNM536 TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒(顯色法，冰凍切片) 50T|20T

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名稱：TUNEL檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照制備試劑盒
貨號(hào)：YT134
規(guī)格：10次
本試劑盒可以用于TUNEL檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照的制備，制備后的陽(yáng)性對(duì)照可以用于一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT135)的熒光，也可以用于顯色法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT137)的顯色檢測(cè)。DNase I可以剪切基因組DNA，使基因組DNA產(chǎn)生片段化(fragmentation)?；蚪M被片段化的細(xì)胞在用TUNEL法檢查時(shí)會(huì)呈陽(yáng)性染色。本試劑盒足夠制備10個(gè)陽(yáng)性對(duì)照。

試劑盒組份：
DNase I—————————10μl
Reaction Buffer(10X)——200μl

注意事項(xiàng)：需自備用于TUNEL檢測(cè)的組織切片、或培養(yǎng)細(xì)胞的片子。需自備TUNEL檢測(cè)試劑盒。

儲(chǔ)存條件：-20℃。

名稱：Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)
貨號(hào)：YT145
規(guī)格：20mM×0.02ml|20mM×0.1ml|5mg
本品是一種可以穿透細(xì)胞膜的泛Caspase抑制劑，可以抑制由Caspase激活導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡，是一種不可逆的Caspase廣普抑制劑。本品是一種zuì常用的細(xì)胞凋亡抑制劑，常用于觀察特定的細(xì)胞凋亡是否通過Caspase激活來介導(dǎo)。本品不僅可以穿透細(xì)胞膜抑制細(xì)胞內(nèi)的Caspase，也可以用于抑制體外純化或粗抽提的Caspase。濃度為20mM，產(chǎn)品配制在DMSO中，可以直接使用，另5mg包裝為粉末裝，根據(jù)配成一定濃度溶液使用。

分子式：C21H28FN3O7
分子量：453.5
純度：＞95%

注意事項(xiàng)：
1. 如果每次使用量少，使用次數(shù)較多，請(qǐng)適當(dāng)分裝。反復(fù)凍融會(huì)影響本抑制劑的使用效果。
2. 如果希望適當(dāng)稀釋后再分裝保存，請(qǐng)使用DMSO進(jìn)行稀釋。
3. 本Caspase抑制劑Z-VAD-FMK在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期一年。

名稱：Annexin V-PE/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：KFS188
規(guī)格：10T|20T|50T|100T
在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素PE 標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。

7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一種核酸染料，它不能通過正常質(zhì)膜，隨著細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡過程，質(zhì)膜對(duì)7-AAD 的通透性逐漸增加，結(jié)合細(xì)胞凋亡中DNA 的有控降解，在合適波長(zhǎng)激發(fā)光的激發(fā)下可發(fā)出明亮的紅色熒光，通過7-AAD 標(biāo)記DNA 的強(qiáng)弱，將細(xì)胞分為三群：7-AAD 強(qiáng)為死亡細(xì)胞，7-AAD 弱是凋亡細(xì)胞，7-AAD-為正常活力細(xì)胞。7-AAD 同PI 有著相似的熒光特性，但其發(fā)射波譜較PI 窄，對(duì)其他檢測(cè)通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI 的zuì佳替代品，可與Annexin V-PE 聯(lián)合使用。

本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)（不推薦用于檢測(cè)組織樣本）。

注意事項(xiàng)
1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當(dāng)，可能引起假陽(yáng)性，而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán)，而影響檢測(cè)?？蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅，請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。

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