特別提示:包括代謝性骨疾病固定液(pH7.35)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:代謝性骨疾病固定液(pH7.35)
產(chǎn)品貨號:GL0546
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
用途:
代謝性骨疾病組織的固定
注意事項:
主要由甲醛、磷酸鹽緩沖液組成。
儲存條件:室溫,避光,12個月
根據(jù)您的關(guān)注的
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關(guān)注
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名稱:Western一抗二抗清除劑(酸性)
貨號:YT074
規(guī)格:250ml
本品用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后,有時還需要檢測tubulin、actin等表達量相對穩(wěn)定的蛋白作為參照,或檢測其它蛋白進行比較。通過使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個SDS-PAGE膠相比,不僅省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。
使用Western一抗二抗去除液多次重復(fù)使用同一張膜,會導(dǎo)致蛋白信號的減弱。但是,本W(wǎng)estern一抗二抗去除液,經(jīng)過多個抗體的檢測試驗,通??梢灾貜?fù)利用膜3-5次。使用本試劑只需大約40-80分鐘即可實現(xiàn)蛋白膜的重復(fù)使用,然后可以進行封閉等后續(xù)的Western操作。
百奧萊博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結(jié)合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來解除一抗二抗的結(jié)合,同時又不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失。
抗體清除劑選型表:
產(chǎn)品編號
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YT071
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YT072
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YT073
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YT074
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產(chǎn)品名稱
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Western一抗二抗清除劑(強堿性)
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Western一抗二抗清除劑(弱堿性)
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Western一抗二抗清除劑(中性)
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Western一抗二抗清除劑(酸性)
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產(chǎn)品包裝
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250ml
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250ml
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250ml
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250ml
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pH
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強堿性
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弱堿性
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中性
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酸性
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對于膜上蛋白的保留效果
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好
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好
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好
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好
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對于一抗二抗的去除效果
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好
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好
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好
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好
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去除一抗二抗所需時間
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15-20分鐘
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20-30分鐘
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20-30分鐘
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40-80分鐘
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適用膜的類型
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PVDF和NC
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PVDF和NC
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僅PVDF
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PVDF和NC
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腐蝕性
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強
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弱
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無
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弱
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用于普通的Western檢測時蛋白膜上一抗二抗的去除可以任選一種去除液。如果是NC膜,即硝酸纖維素膜時,不宜選用YT071N。從時間角度考慮,強堿性、弱堿性和中性的去除液所需的時間都比較短,可以優(yōu)先考慮。從價格因素考慮,強堿性的去除液zuì高。從安全性考慮,中性的去除液由于沒有腐蝕性而表現(xiàn)出更高的安全性。弱堿性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正確操作,并進行適當防護,使用強堿性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
對于特定的抗原和抗體,很難說哪一種Western一抗二抗去除液的效果zuì好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳時,可以考慮適當延長一抗二抗去除液的孵育時間,同時確保孵育時的溫度不低于20℃。溫度過低時一抗二抗的去除效果會下降。同時也可以考慮嘗試其它的一抗二抗去除液,以摸索出zuì佳的適合您實驗條件的Western一抗二抗去除液。
注意事項:
1. 使用辣根過氧化物酶(HRP),任何一次封閉(blocking)都應(yīng)當使用5%脫脂牛奶,如果使用堿性磷酸酯酶,任何一次封閉都應(yīng)當使用酪蛋白(casein)。
2. 為取得zuì佳效果,推薦使用PVDF膜。但硝酸纖維素膜也可以使用本W(wǎng)estern一抗二抗去除液。
3. 使用化學(xué)發(fā)光試劑進行的Western檢測適用本試劑。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進行的Western檢測,例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。
4. 本W(wǎng)estern一抗二抗去除液有輕微腐蝕性,使用時請注意防護。
儲存條件:室溫,有效期一年。
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