多酚多糖植物總RNA提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要多酚多糖植物總RNA提取試劑盒等RNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。 主營產(chǎn)品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

特別提示：包括多酚多糖植物總RNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：多酚多糖植物總RNA提取試劑盒
英文名稱：Total RNA Extraction kit from the plant in which polyphenols and polysaccharides are rich
產(chǎn)品貨號(hào)：WH0052
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒可從植物組織，特別是富含多糖多酚或淀粉的植物組織（如棉花葉片，成熟水稻葉片，擬南芥種子，白松松針，香蕉，枇杷葉片，馬鈴薯塊莖，蘋果，梨，西瓜果肉，獼猴桃，月季，煙草，沙棘，百合等）中快速提取總RNA，可同時(shí)處理大量不同樣品。提取的總RNA純度高，沒有基因組、蛋白和其它雜質(zhì)的污染，可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、芯片分析、Northern Blot、Dot Blot、PolyA篩選、體外翻譯、RNase保護(hù)分析和分子克隆等多種下游實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
·針對(duì)性強(qiáng)：專門針對(duì)多糖多酚等難提植物樣本獨(dú)特配置，流程更優(yōu)化，結(jié)果有保障。
·去除基因組：配有DNase I，可在柱上快速去除gDNA。
·簡便快捷：僅需1小時(shí)即可完成RNA提取實(shí)驗(yàn)。
·安全低毒：無需酚和氯fǎng等毒性有機(jī)試劑。

不同植物組織RNA提取預(yù)期得率：（以100mg樣本為例)

樣本	RNA得率
香蕉果肉	3～5μg
西瓜果肉	1.5～2.4μg
梨果肉	1.2～2μg
紅薯塊莖	1.2～2μg
馬鈴薯塊莖	5.5～9μg
白松松針	6～10μg
棉花葉片	15～20μg
月季葉片	20～25μg
枇杷葉片	8～10μg
水稻葉片	20～25μg

分別取100mg香蕉、西瓜、蘋果、梨等果肉，紅薯、馬鈴薯等塊莖，棉花、月季、枇杷、水稻等的葉片及白松松針等植物樣本，采用本試劑盒提取總RNA。洗脫體積30μl，RNA上樣量4～6μl，1%瓊脂糖凝膠電泳，6V/cm電泳30min.
實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明本試劑盒對(duì)廣泛的難提取植物樣本有優(yōu)異的總RNA提取效果。

試劑盒組成：

組分	50T
裂解液SL	30ml
去蛋白液RW1	40ml
漂洗液RW	12ml
RNase-Free ddH2O（瓶裝)	15ml
RNase-Free吸附柱CR3（含2ml收集管)	50套
RNase-Free過濾柱CS（含2ml收集管)	50套
DNase I（1500U)	1支
緩沖液RDD	4ml
RNase-Free ddH2O（管裝)	1ml
Nase-Free離心管（1.5ml)	50個(gè)

保存條件：室溫（15-25℃)保存。RNase-Free DNase I,緩沖液RDD和RNase-Free ddH2O（管裝)置于2-8℃保存；加入β-巰基乙醇的裂解液SL 4℃可放置一個(gè)月。

預(yù)防RNase污染，應(yīng)注意以下幾方面：
1．經(jīng)常更換新手套。因?yàn)槠つw經(jīng)常帶有細(xì)菌，可能導(dǎo)致RNase污染。
2．使用RNase-Free的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3．RNA在本制品中時(shí)不會(huì)被RNase降解。但提取后繼續(xù)處理過程中應(yīng)使用RNase-Free的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min，然后用水徹底清洗，再滅菌，即可去除RNase。
4．配制溶液應(yīng)使用RNase-Free ddH2O。（將水加入到干凈的玻璃瓶中，加入DEPC至終濃度0.1%（V/V，放置過夜，高壓滅菌）。

注意事項(xiàng)：
1．操作前在SL中加入β-巰基乙醇至終濃度5%，如475μl SL中加入25 μl β-巰基乙醇。此裂解液zuì好現(xiàn)用現(xiàn)配。配好的SL 4℃可放置一個(gè)月，裂解液SL在儲(chǔ)存時(shí)可能會(huì)形成沉淀，如果有沉淀出現(xiàn)，請加熱溶解后使用。
2．植物組織裂解是否充分直接影響到RNA提取的質(zhì)量和產(chǎn)量，本試劑盒中提供的裂解液SL，適用于大多數(shù)植物組織的裂解，但有些植物組織（例如玉米的乳白色胚乳，紅豆種子或小麥種子）或絲狀真菌，由于次級(jí)代謝產(chǎn)物較特殊，異硫氰酸胍使樣品產(chǎn)生沉淀，導(dǎo)致RNA提取效果不佳的現(xiàn)象，購買試劑盒時(shí)請?zhí)嵝盐宜緲I(yè)務(wù)人員更換另一種裂解液HL，將解決該問題。
3．次使用前應(yīng)在漂洗液RW中加入無水乙醇，加入量請參見瓶上標(biāo)簽。

DNase I儲(chǔ)存液的配制：
將DNase I干粉（1500U）溶解在550 μl RNase-Free ddH2O中，輕柔混勻，分裝后-20℃貯存（可保存9個(gè)月）。
注意：從-20℃融化后的DNase I儲(chǔ)存液保存于4℃（可保存6周），不要再次凍存。

RNA提取操作步驟：
以下所有離心步驟均在室溫下進(jìn)行。

1．勻漿處理：
  50-100mg植物葉片或果實(shí)果肉在液氮中迅速研磨成粉末，加入500 μl SL（使用前請先檢查是否已加入β-巰基乙醇），立即渦旋劇烈震蕩混勻。
  注意1：對(duì)于預(yù)期RNA得率小于10μg的植物樣本，請使用100mg的起始樣本量；對(duì)于富含淀粉的樣本或成熟葉片，請將裂解液SL用量增加至700 μl。
  注意2：由于植物多樣性非常豐富，而且同種植物的不同生長發(fā)育階段和不同組織的RNA含量都不相同，請根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況選擇合適的植物材料的用量。
2．12000rpm（~13400×g)離心2 min。
3．將上清液轉(zhuǎn)移至過濾柱CS上（過濾柱CS放在收集管中)，12000rpm（~13400×g)離心2 min，小心吸取收集管中的上清至新的RNase-Free的離心管中，吸頭盡量避免接觸收集管中的細(xì)胞碎片沉淀。
4．緩慢加入0.4倍上清體積的無水乙醇，混勻（此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)沉淀），將得到的溶液和沉淀一起轉(zhuǎn)入吸附柱CR3中，12000rpm（~13400×g)離心15 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR3放回收集管中。
  注意：如果上清液體積有損失，請相應(yīng)調(diào)整乙醇的加量。
5．向吸附柱CR3中加入350 μl去蛋白液RW1，12000rpm（~13400×g)離心15 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR3放回收集管中。
6．DNase I工作液的配制：取10 μl DNase I儲(chǔ)存液放入新的RNase-Free離心管中，加入70 μl RDD溶液，輕柔混勻。
7．向吸附柱CR3中央加入80 μl的DNase I工作液，室溫放置15 min。
8．向吸附柱CR3中加入350 μl去蛋白液RW1，12000rpm（~13400×g)離心15 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR3放回收集管中。
9．向吸附柱CR3中加入500 μl漂洗液RW （使用前請先檢查是否已加入乙醇），12000rpm（~13400×g)離心15 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR3放回收集管中。
10．重復(fù)步驟9。
11．12000rpm（~13400×g)離心2 min，將吸附柱CR3放入一個(gè)新的RNase-Free離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加30-50 μl RNase-Free ddH2O，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g)離心1 min，得到RNA溶液。
  注意：洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30 μl，體積過小影響回收效率。RNA樣品請?jiān)?70℃中保存。如果預(yù)期RNA得率大于30 μg，可將步驟11中離心得到的RNA溶液再加入吸附柱CR3中，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g)離心1 min，得到RNA溶液。

RNA純度及濃度檢測：
完整性：RNA可用普通瓊脂糖凝膠電泳（電泳條件：膠濃度1.2%；0.5×TBE電泳緩沖液；150V，15 min)檢測完整性。由于細(xì)胞中70-80%的RNA為rRNA，電泳后UV下應(yīng)能看到非常明顯的rRNA條帶。rRNA大小分別約為5 kb和2 kb，分別相當(dāng)于28S和18S rRNA；植物葉片中由于含有大量的葉綠體RNA，可見4條或更多rRNA。植物RNA樣品中zuì大rRNA亮度應(yīng)為次大rRNA亮度的1.5-2.0倍，否則表示RNA樣品的降解。出現(xiàn)彌散片狀或條帶消失表明樣品嚴(yán)重降解。
純度：OD₂₆₀/OD₂₈₀比值是衡量蛋白質(zhì)污染程度的指標(biāo)。高質(zhì)量的RNA，OD₂₆₀/OD₂₈₀讀數(shù)在1.8-2.1之間，比值為2.0是高質(zhì)量RNA的標(biāo)志。OD₂₆₀/OD₂₈₀讀數(shù)受測定所用溶液的pH值影響。同一個(gè)RNA樣品，假定在10mM Tris，pH7.5溶液中測出的OD₂₆₀/OD₂₈₀讀數(shù)1.8-2.1之間，在水溶液中所測讀數(shù)則可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA不純。
濃度：取一定量的RNA提取物，用RNase-Free ddH2O稀釋n倍，用RNase-Free ddH2O將分光光度計(jì)調(diào)零，取稀釋液進(jìn)行OD₂₆₀,OD₂₈₀測定，按照以下公式進(jìn)行RNA濃度的計(jì)算：
   終濃度（ng/μl）= （OD₂₆₀)×（稀釋倍數(shù)n)×40

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名稱：液體樣品RNA和DNA提取試劑盒
貨號(hào)：BTN80929
規(guī)格：50次
本試劑盒是專門用于從各種微量和痕量樣品中提取DNA和RNA的試劑盒。

試劑盒特點(diǎn)：
1. 核酸的回收率高，可以達(dá)到90%以上，可以跟QIAGEN的同類產(chǎn)品媲美。
2.一管式操作，減少了樣品污染的可能。
3.一站式套裝，除樣品外客戶不需要準(zhǔn)備任何試劑，降低了實(shí)驗(yàn)誤差。
4. 安全，不需要使用苯酚和氯fǎng等有機(jī)溶液。
5.可以處理各種形態(tài)的樣品，包括液體樣品，單個(gè)或少量的細(xì)胞，微小胚胎等等。
6.與PCR、熒光PCR、RT-PCR、熒光RT-PCR等后續(xù)反應(yīng)兼容。
7. 試劑穩(wěn)定，可以長期放置。

試劑盒組成：

成分	50T
溶液A	15ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
溶液D	5ml
說明書	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸，溶液A和溶液D需要4℃保存，溶液B和溶液C室溫保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有揮發(fā)性，使用后需要將瓶蓋擰緊。

使用方法：
1. 將不超過0.1mL的樣品轉(zhuǎn)移到自備的1.5mL 旋蓋塑料離心管中。
2. 加入0.3mL溶液A，蓋上蓋子后振蕩3-5秒。
注意：溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分搖勻后方可使用。
3.室溫靜置10分鐘。
4. 加入0.4mL溶液B，蓋上蓋子后振蕩3-5秒。
5. 15000g室溫離心15分鐘。強(qiáng)烈建議在離心管管壁上用記號(hào)筆做簡單標(biāo)記以區(qū)別離心面和向心面。
6.小心移棄上清。注意不要觸及離心面管底的核酸沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振蕩數(shù)秒后15000g室溫離心5分鐘。
注意：將離心管放入離心機(jī)時(shí)一定要將離心面向外。
8.小心移棄上清。
注意：不要觸及離心面管底的核酸沉淀。
9. 短暫離心數(shù)秒。
注意：將離心管放入離心機(jī)時(shí)一定要離心面向外。
10.小心移棄殘留上清(殘留的溶液C會(huì)影響后續(xù)反應(yīng))。此時(shí)管壁(離心面方向)上將有可見的膜狀沉淀。
11. 加入100μl溶液D，用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀，使其溶解。溶解液如果混濁或有少量不溶物是正?，F(xiàn)象，不溶沉淀物中就裹含有核酸。
12. 直接取適量樣品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

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BTN130976	Oligo(dT)再生溶液	250mL
BTN3110	氧釩核糖核苷復(fù)合物(RVC/VRC)	10mL

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