微藻細(xì)胞核提取試劑盒是高品質(zhì)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)研究產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，微藻細(xì)胞核提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)研究之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營(yíng)血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價(jià)格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國(guó)內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長(zhǎng)期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽(yù)和品牌形象。 主營(yíng)產(chǎn)品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

特別提示：包括微藻細(xì)胞核提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：微藻細(xì)胞核提取試劑盒
英文名稱：Microalgae cell nuclear extraction kit
產(chǎn)品貨號(hào)：HR8193
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T

微藻細(xì)胞核提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種真核類微藻中提取細(xì)胞核。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng)，維持核組分是分開(kāi)和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核，而少交叉污染。
本試劑盒適用于常見(jiàn)的各種綠藻、金藻、硅藻、甲藻、螺旋藻等單細(xì)胞、多細(xì)胞、絲狀體、多核體等形態(tài)真核類藻類。配合適當(dāng)方法調(diào)整，也可以用于藍(lán)藻等原核藻類的細(xì)胞器提取。
本試劑盒提取的胞核組分仍保持其生化功能，適合各種下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA 拼接，gel－shift分析，報(bào)告分析，酶活性分析和WB等。

儲(chǔ)存條件：提取液A和C 2-8℃保存；提取液B-20℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) ※ ※ ※
使用限制：本試劑僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
產(chǎn)品更新：我公司會(huì)更新或升級(jí)產(chǎn)品，以優(yōu)化和增強(qiáng)其使用性能，產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)會(huì)進(jìn)行相應(yīng)的版本更新。使用產(chǎn)品時(shí)，請(qǐng)參照隨產(chǎn)品附帶的說(shuō)明書(shū)，不要參照網(wǎng)上下載的說(shuō)明書(shū)，可能是不同的版本。需要zuì新電子版說(shuō)明書(shū)時(shí)可以在收到產(chǎn)品后發(fā)郵件索取。
使用安全：使用時(shí)需要合適的實(shí)驗(yàn)室外套，一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗。
試劑盒以外自備試劑耗材和儀器：
● PBS ● 吸頭、離心管 ● 移液器 ●冰盒 ●離心機(jī) ● 渦旋振蕩器 ●冰箱

使用方法：

使用注意事項(xiàng)：
● 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
● 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。

1．提取液制備：
每1000μl冷的提取液A中加入10μl提取液B，混勻后置冰上備用。
【注】：
① 根據(jù)需要處理的樣品數(shù)量準(zhǔn)備提取液，提取液B 不可以一次全部加入提取液A。
2．取培養(yǎng)好的微藻樣品，1000g條件下離心5分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
3．用PBS 洗滌微藻細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4．用提取液A重懸微藻細(xì)胞。每100-300μl細(xì)胞壓積中加入1ml 提取液A。
5．將微藻細(xì)胞懸液置振蕩器上37℃或室溫振蕩1-3小時(shí)。
【注】：
① 不同類型的微藻需要處理的時(shí)間差異較大。
6．離心力1000g離心5分鐘，收集細(xì)胞，將上清移入另一離心管保存?zhèn)溆谩?br /> 7．用PBS 洗滌細(xì)胞一次，1000g離心5分鐘，收集細(xì)胞，洗滌后盡可能吸干上清。
8．在細(xì)胞沉淀中加入1ml試劑C重懸細(xì)胞，混勻。
9．將細(xì)胞懸液置振蕩器上振蕩30分鐘。
10．離心力2000g離心5分鐘，棄上清，收集沉淀。
11．沉淀即為微藻細(xì)胞核。將上述微藻細(xì)胞核沉淀用適當(dāng)緩沖液重懸后2-8℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

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BTN100601 細(xì)胞核微量制備試劑盒 50次
HR0233 動(dòng)物線粒體提取試劑盒 50T|100T
HR0237 組織線粒體提取試劑盒 50T|100T
HR0245 溶酶體提取試劑盒 50T|100T
HR0257 酵母線粒體提取試劑盒 50T|100T
HR0241 細(xì)胞核/胞漿分離試劑盒 50T|100T
HR8192 細(xì)菌核糖體提取試劑盒 50T|100T
HR8219 高純度外泌體提取試劑盒(尿液) 20T|50T
HR8220 高純度外泌體提取試劑盒(體液) 20T|50T

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名稱：植物葉綠體純化試劑盒
貨號(hào)：BTN120308
規(guī)格：15次
葉綠體是重要的，負(fù)責(zé)植物光合作用的細(xì)胞器，很多重要的特性(如雄性不育)也跟葉綠體相關(guān)，所以葉綠體是研究植物生理和母系遺傳的重要材料。對(duì)植物葉綠體進(jìn)行生化，遺傳和分子生物學(xué)研究都需要進(jìn)行葉綠體純化。本產(chǎn)品就是基于密度梯度離心的，專門(mén)用于從植物葉片中純化完整葉綠體的試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．即用型試劑盒，用戶不需要單獨(dú)配制各種溶液。
2．提供AB兩種選擇，A型用于葉綠體粗提，所得葉綠體含少量其他細(xì)胞器污染，可用于后續(xù)的SDS-PAGE，Western，ELSIA和蛋白組分析。B型用于葉綠體精提，所得葉綠體完整，可用于后續(xù)的光合作用，電子鏈和磷酸化，跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，體外葉綠體蛋白合成，蛋白定位等研究。還可用于的葉綠體膜，基質(zhì)，類囊體，葉綠體DNA和葉綠體RNA純化。
3．本產(chǎn)品足夠15次提取，每次可處理30g葉片，能得到5mg左右葉綠體。
4．已經(jīng)成功用于菠菜，大豆，萵筍，白菜，煙草和甜菜等植物，還可用于更多植物(可能需要優(yōu)化條件)。


試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A成分一	250ml×2
溶液A成分二(干粉)	3g
溶液B	60ml
帶柄尼龍濾膜	1個(gè)
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸，4℃保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：葉綠體對(duì)溫度高度敏感，所以整個(gè)操作必須在冰上或者在冷室進(jìn)行，所用器皿和溶液均需要在4℃預(yù)冷。離心時(shí)一定要在4℃進(jìn)行，離心力以g而不是rpm計(jì)算。如果需要研究葉綠體的功能，提取過(guò)程還需要在昏暗的光線條件下進(jìn)行。

1．實(shí)驗(yàn)前1-2天將植物放在暗室培養(yǎng)以減少葉綠體中淀粉顆粒的形成，否則離心時(shí)這些顆粒很容易使葉綠體破裂。葉片在實(shí)驗(yàn)前需先用自來(lái)水洗凈，再用蒸餾水淋洗，去掉多余水分。如果葉片采集后不能立即處理，則保存時(shí)需要保持葉片濕潤(rùn)，即使如此，葉片的放置時(shí)間也不能超過(guò)一天。
2．新鮮(實(shí)驗(yàn)當(dāng)天)制備溶液A：將自備的去離子水與溶液A成分一按4：1的比例混合，然后在混合液中加入溶液A成分二干粉到終濃度0.1%(每100mL中加入0.1g干粉)，搖晃溶解后所得溶液即為溶液A，冰上預(yù)冷待用。一次實(shí)驗(yàn)(從30 g葉片提取葉綠體)所需要的溶液A體積跟材料不同而不同。
3．新鮮采集植物葉片，快速去除葉脈并將葉片剪成1-3cm2大小的碎片并浸泡在適量的預(yù)冷的溶液A中(每克葉片加4mL溶液A，但對(duì)煙草和大豆，每克葉片需要加6mL溶液A)。
4．將浸泡了葉片的溶液A轉(zhuǎn)移到Waring勻漿機(jī)(即家用制備果汁的勻漿機(jī))中，低速勻漿10秒，避免起泡沫。用玻璃棒把液面的碎片按入勻漿機(jī)底部后，再低速勻漿10秒。注意：除Waring勻漿機(jī)外，還可以選擇Dounce玻璃勻漿器，Polytron勻漿機(jī)和研磨(加玻璃珠)等裂解細(xì)胞的方法，但這些方法的單次處理量都比較小，需要將樣品分成很多小份單獨(dú)勻漿，然后再匯集。
5．用帶柄尼龍濾膜過(guò)濾勻漿液，可先將濾液收集到預(yù)冷的200mL量筒中，再等分到4個(gè)預(yù)冷的50mL的塑料離心管中(每個(gè)管中的濾液不要超過(guò)35mL)。帶柄尼龍濾膜后可反復(fù)使用。
6．在水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)上4℃ 200g離心3分鐘(對(duì)菠菜，白菜和萵筍材料)或400g離心1分鐘(對(duì)甜菜材料)，白色沉淀為未破裂的細(xì)胞或細(xì)胞核。
7．將上清液(含葉綠體)轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的、預(yù)冷的50mL塑料離心管中。
8．在水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)上4℃ 1000g離心7分鐘，小心棄上清，沉淀含葉綠體，呈淺綠色。
9．在沉淀中加入1.5mL預(yù)冷的溶液A，手彈離心管底部使葉綠體重懸。注意：重懸時(shí)zuì好避免溶液起泡，也不要用槍頭吹打，否則葉綠體容易破裂。沉淀下有白色淀粉屬于正?，F(xiàn)象，但重懸葉綠體時(shí)避免將白色淀粉重懸。
10．將4管葉綠體重懸液匯集(共約6mL)。此溶液為葉綠體粗提產(chǎn)物，可直接用于后續(xù)的SDS-PAGE，Western，ELISA和蛋白組分析。如果需要以之為材料精提葉綠體，就需要將破裂的葉綠體和完整的葉綠體分開(kāi)，根據(jù)植物的不同，可選用下述兩種密度梯度離心法之一進(jìn)行分離。
11．單濃度分離法(適合菠菜，白菜和萵筍等材料)：
a)在50mL塑料離心管中先加入6mL溶液A成分一和4mL溶液B，充分混合均勻。
b)在其液面上小心鋪上第11步匯集得到的約6mL葉綠體重懸液。
c)在水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)上4℃ 1000g離心8分鐘，zuì上層的綠色帶含破碎的葉綠體，線粒體和核糖體等，管底的綠色沉淀為完整的葉綠體。
d)小心將上清倒出后，在葉綠體沉淀中加入預(yù)冷的0.5mL溶液A成分一，手指輕彈管底使之重懸。
e)將葉綠體重懸液轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中并避光保存?？稍谙嗖铒@微鏡下檢查葉綠體完整性。葉綠體必須盡快使用，否則非常容易失去活性。
12．雙濃度分離法(適合煙草，甜菜和大豆等材料)：
a)在14mL塑料離心管中先加入0.5mL溶液A和2mL溶液B，充分混合均勻，得密度梯度重液。
b)在另一試管中將3mL溶液A和2mL溶液B充分混合均勻，得密度梯度輕液。
c)將密度梯度輕液小心鋪在密度梯度重液之上，然后將第10步匯集得到的葉綠體重懸液中的4mL(還剩下2mL)小心鋪在密度梯度輕液之上。
d)在水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)上4℃ 3200g離心15分鐘，zuì上層綠色帶含破碎的葉綠體、線粒體和核糖體等，重液和輕液間的綠色帶為完整葉綠體。
e)用廣口吸管小心將重液和輕液之間的綠色帶(葉綠體)轉(zhuǎn)移到新的離心管中，加入三倍體積的預(yù)冷的溶液A成分一，輕柔混勻。
f)在水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)上4℃ 1700g離心1分鐘，小心將上清倒出后，在綠色的葉綠體沉淀中加入預(yù)冷的0.5mL溶液A成分一，手指輕彈管底使之葉綠體重懸。
g)將葉綠體重懸液轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中并避光保存，也可在相差顯微鏡下檢查葉綠體完整性。葉綠體必須盡快使用，否則非常容易失去活性。所得精提葉綠體可用于后續(xù)的光合作用，電子鏈和磷酸化，跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，體外葉綠體蛋白合成，蛋白定位等研究。還可用于的葉綠體膜，基質(zhì)，類囊體，葉綠體DNA和葉綠體RNA純化。

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