特別提示:包括大鼠白細(xì)胞分離液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:大鼠白細(xì)胞分離液
產(chǎn)品貨號(hào):BTN120895
產(chǎn)品規(guī)格:200mL
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SY0534 細(xì)胞消化液 100ml
SY0536 膠原酶II型 100mg
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HR8176 細(xì)胞懸液制備試劑盒 100ml
HR8177 人中性粒細(xì)胞分離液試劑盒 400ml
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名稱:淋巴細(xì)胞分離液1.084
貨號(hào):SY0533
規(guī)格:100ml
淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium 1.084,簡稱LSM-1.084)是一種無菌的即用型分離液,基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過一些改良,使得操作簡單快速且分離效率更高。本品是無菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸鈉混合溶液,密度為1.084 g/ml,內(nèi)毒素含量很低(<0.12 EU/ml),是在嚴(yán)格控制的環(huán)境下加工生產(chǎn)的,生產(chǎn)條件符合ISO13485:2003標(biāo)準(zhǔn)和GMP認(rèn)證。相對(duì)于密度為1.077 g/ml的人淋巴細(xì)胞分離液,本品適用于分離更高密度的人單個(gè)核細(xì)胞,包括外周血,臍帶血以及骨髓瘤來源的組織樣本。還適用于分離大小鼠血細(xì)胞,正因?yàn)閲X動(dòng)物的淋巴細(xì)胞密度稍高于人淋巴細(xì)胞。
工作原理
去纖維蛋白或抗凝人血以1:1的比例用無菌生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,小心的添加在分離液上層(不要混雜在一起),之后離心30-40min。離心過程中,差速遷移使其zuì終形成幾個(gè)不同的細(xì)胞分層:
①聚集在管底的顆粒主要是Ficoll 聚集的紅細(xì)胞以及沉淀物;
②緊挨著上面一層的顆粒主要是粒細(xì)胞,其處于LSM-1.084溶液的滲透壓臨界,具有足夠高的密度遷移穿過LSM-1.084溶液層。
③單個(gè)核細(xì)胞分布在血漿和LSM-1.084分離液的中間層,還包括一些沉降系數(shù)低(密度低)的顆粒,如血小板。
淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞和血小板不具有足夠高的密度穿透LSM-1.084分離液層,因此這些細(xì)胞在血漿和LSM-1.084分離液層聚集形成一個(gè)中間分層。吸取中間層,用平衡鹽溶液短暫洗滌,以除去血小板,細(xì)胞分離介質(zhì)和血漿,就可以單個(gè)核細(xì)胞。通常情況下,分離所得的細(xì)胞中95±5%為單個(gè)核細(xì)胞,細(xì)胞存活率>90%,回收率為60±20%。
儲(chǔ)存條件:4~8℃,避光
名稱:膠原酶II型
貨號(hào):SY0536
規(guī)格:100mg
本品為II型膠原酶,≥125 U/mg solid,可用于心、甲狀腺、唾液腺、肝、骨、軟骨等組織和細(xì)胞的解離。本品來源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶粗提物,不僅含有膠原酶(更準(zhǔn)確的稱法為梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分別能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白,多糖和脂質(zhì),使得本品非常適用于組織消化。
膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中)并切割該序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽,但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。
目前商業(yè)化提供的細(xì)菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異,分為四種類型:膠原酶I型,II型,III型和IV型,在應(yīng)用上有所偏向:
1)膠原酶I(Type I Collagenase):含有比較均勻的各種酶活力(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備;
2)膠原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來源細(xì)胞的制備;
3)膠原酶III(Type III Collagenase):含有較低的蛋白酶活性,常用于乳腺細(xì)胞的制備;
4)膠原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰島細(xì)胞的制備,或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。
酶活力單位定義
在37℃,pH7.5 的條件下,5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當(dāng)于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。
儲(chǔ)存條件:4℃,有效期兩年
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