特別提示:包括總RNA提取試劑(組織/細(xì)胞/液體樣本)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:總RNA提取試劑(組織/細(xì)胞/液體樣本)
英文名稱:Total RNA extraction reagent From Tissue,Cell and Liquid Sample
產(chǎn)品貨號(hào):ALH003
產(chǎn)品規(guī)格:50ml|100ml
本試劑是直接從來源于人,動(dòng)植物,酵母,細(xì)菌和病毒的液體樣品中提取總RNA的試劑。它在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。加入lǜ仿后離心,樣品分成水樣層和有機(jī)層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后,RNA可以通過異丙醇沉淀來還原。在除去水樣層后,樣品中的DNA和蛋白也能相繼以沉淀的方式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA,在有機(jī)層中加入異丙醇能沉淀出蛋白。共純化DNA對(duì)于樣品間標(biāo)準(zhǔn)化RNA的產(chǎn)量十分有用。
無論是人、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌組織,該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。本試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)的樣品。所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。本試劑抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆。如果是用于PCR,當(dāng)兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時(shí),建議用擴(kuò)增級(jí)的DNase I來處理抽提的總RNA。
本試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7 kb和15 kb之間不連續(xù)的高分子量條帶,兩條核糖體~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之間 (tRNA, 5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。
注意事項(xiàng):
1. 當(dāng)本試劑用量少于2ml時(shí)建議使用清潔的一次性的聚丙材質(zhì)試管。
2. 當(dāng)本試劑用量較大時(shí),可以使用玻璃試管(Corex)或聚丙材質(zhì)試管,事先檢驗(yàn)以確保該試管可以耐受加入本試劑和lǜ仿后12,000×g的離心力。不可使用有裂縫或者破損的試管。
3. 離心前小心平衡試管。
4. 離心前玻璃管口必須蓋上鋁箔并用石蠟?zāi)し饪冢郾┕鼙仨毶w緊。
5. 從少量的組織(1~10mg)或細(xì)胞(102~104)中分離RNA 樣品:調(diào)整樣品體積到0.25ml,往組織或細(xì)胞中加入0.75ml 本試劑。待樣品裂解后,加入lǜ仿并進(jìn)行步驟2 中的抽提操作。在用異丙醇沉淀RNA 之前,加入5~10μg 無RNA 酶的glycogen 作為水樣層的載體。為降低其黏度在加入lǜ仿前用26 號(hào)注射器抽吸兩次以切斷基因組DNA。Glycogen 會(huì)留在水樣層中并和RNA 共析出。在濃縮到4mg/ml之前它不會(huì)抑制逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)鏈的合成也不會(huì)抑制PCR。
6. 在勻漿化后和加入lǜ仿之前,樣品可以在–60~–70℃ 保存至少一個(gè)月。RNA 沉淀(步驟4,RNA 漂洗)放置于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周,在–5~–20℃下至少可保存一年。
7. 臺(tái)式離心機(jī)zuì大能達(dá)到2,600×g 的離心力的,如果將離心時(shí)間延長(zhǎng)到30~60 分鐘可以滿足步驟2 和步驟3 中的操作。
儲(chǔ)存條件:4℃,有效期12個(gè)月。
本制品別名:人總RNA提取試劑|動(dòng)物總RNA提取試劑|植物總RNA提取試劑|細(xì)菌總RNA提取試劑|酵母總RNA提取試劑
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貨號(hào)
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名稱
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規(guī)格
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動(dòng)物RNA提取試劑(TRIzol)
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BTN130983
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120mL
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關(guān)注
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