特別提示:包括BL21(DE3)感受態(tài)細胞(pG-TF2分子伴侶)在內,本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:BL21(DE3)感受態(tài)細胞(pG-TF2分子伴侶)
英文名稱:Chaperone competent cells pG-TF2/BL21(DE3)
產(chǎn)品貨號:JN0127
產(chǎn)品規(guī)格:100μl×10
外源蛋白質在大腸桿菌中的表達常形成包涵體或發(fā)生蛋白酶降解。大多是由于所表達的蛋白未能正確折疊造成。分子伴侶協(xié)同作用,可以幫助外源蛋白正確折疊。不同外源蛋白需要的分子伴侶不同。百奧萊博提供5種表達常用分子伴侶的BL21(DE3)衍生菌株,適用于不同外源蛋白在大腸桿菌中有效折疊。該系統(tǒng)適用于pET系列等依賴T7啟動子的表達載體。本感受態(tài)細胞無污染,轉化效率可達107以上

圖例一)Human種屬的RORG(31KD)在大腸桿菌中獲得可溶表達。
Lane 1:上樣
Lane 2: 流穿
Lane 3: 50mM Imidazole洗脫
Lane 4: 500mM Imidazole洗脫
Lane 5: 蛋白Marker
根據(jù)您的關注的
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名稱:單細胞裂解液(RNA提取)
貨號:BTN130804
規(guī)格:1mL
本產(chǎn)品為單細胞RNA提取專用裂解液,本裂解液經(jīng)多次優(yōu)化,含有多種去污劑、變性劑和鹽,可有效抑制核酸酶在裂解過程中對核酸的破壞,維持核酸結構的穩(wěn)定含有常用。純化所得RNA可用于測序、單細胞PCR等實驗。本產(chǎn)品足夠使用200次以上。
儲存條件:低溫運輸,4℃保存,有效期兩年。
名稱:DNA粘轉平試劑盒
貨號:BTN60107
規(guī)格:20次
本產(chǎn)品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性,將3′或5′突出的DNA片段轉化成平末端,用于克隆工作。
產(chǎn)品特點:
1. 簡單,精心優(yōu)化過的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨準備。
2.適用于任何平末端的DNA載體。
產(chǎn)品組成:
成分
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規(guī)格
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Pfu DNA Polymerase(3U/μL)
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20μl
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2×Polishing Buffer
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0.5ml
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說明書
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1份
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儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。
使用方法:
1. DNA片段的準備:
無論是來源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,還是用限制性內切酶制備的DNA片段,粘轉平之前均需要將DNA沉淀以便去除反應液中的無關成份。沉淀DNA的方法包括經(jīng)典的鹽/純沉淀法,離心柱DNA 吸附法和百奧萊博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 設置粘轉平(Polishing)反應:
在一個干凈的離心管中,分別加入
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3′或5′突出的DNA片段
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10-500ng
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2×Polishing Buffer
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25μL
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Pfu DNA polymerase
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1μL
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補水到
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50μL
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72℃保溫2小時。
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注意:如果不使用熱蓋式PCR 儀器加熱,則需要在反應管中再加入適量液體石蠟以防反應過程中水份蒸發(fā)。
3.反應后處理
粘轉平反應后,樣品可以放-20℃長期保存,也可以直接用于T4 DNA連接酶催化的連接反應。對10μL的連接反應體系,一般需要加入1-2μL粘轉平反應液。由于Pfu DNA polymerase在連接反應的溫度條件下幾乎沒有活性,所以不必去除。但文獻報道,去除后連接效率更高。
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