特別提示:包括病毒cDNA鏈合成試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:病毒cDNA鏈合成試劑盒
英文名稱:Virus DNA/RNA 1st cDNA Synthesis Kit
產(chǎn)品貨號(hào):MT0016
產(chǎn)品規(guī)格:20μl×100次|20μl×2000次
本試劑盒采用穩(wěn)定的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系5×RT MasterMix進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),使用時(shí)只需加入模板、引物和RNase-Free H2O即可,大大簡(jiǎn)化了操作過程、提高了效率、減少了操作過程中的人為誤差;該試劑盒適用于病毒RNA 樣品的cDNA合成。該預(yù)混體系包含點(diǎn)突變致RNase H活性缺失的Top MLV Reverse Trans
criptase反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應(yīng)Buffer、gDNA去除試劑和RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉(zhuǎn)錄酶去除了RNase H活性,從而避免反轉(zhuǎn)錄過程中降解RNA。同時(shí)經(jīng)過突變文庫篩選,使得其熱穩(wěn)定性更強(qiáng),可耐受55℃高溫反應(yīng)。相比于低溫條件下反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),采用高溫反轉(zhuǎn)錄可顯著打開RNA二級(jí)結(jié)構(gòu),從而提高復(fù)雜RNA模板的擴(kuò)增性能、提高反轉(zhuǎn)錄cDNA的長(zhǎng)度和產(chǎn)量,從而提高后續(xù)檢測(cè)的靈敏度。合成的鏈cDNA可廣泛用于2nd Strand的合成、雜交、PCR擴(kuò)增、Real-Time PCR反應(yīng)等。
特點(diǎn):
1.55℃進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄的MLV反轉(zhuǎn)錄酶,能更好的轉(zhuǎn)錄含有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的RNA模板。
2.便捷的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系。
產(chǎn)品組成:
組分
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MT0016-100T
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MT0016-2000T
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5×RT MasterMix
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400μl
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1ml×8
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20×Random Primer
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100μl
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1ml×2
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Rnase-Free H2O
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1ml×2
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50ml
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注:1.本試劑盒可有效反轉(zhuǎn)錄mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA。
2.本試劑盒不可反轉(zhuǎn)錄microRNA、病毒DNA/RNA樣品。
保存條件:請(qǐng)置于-20℃,可保存2年;避免反復(fù)凍融。
使用方法:
1.按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液
病毒 DNA/RNA 樣品
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2~10μl
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5×RT MasterMix(with dsDNase)
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4μl
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*20×Random Primer
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1μl
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Rnase-Free H2O
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Up to 20μl
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*注:反轉(zhuǎn)錄引物可根據(jù)需要改用特異性引物。
2.在PCR儀上按以下條件進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng):
25℃ 10分鐘(引物配對(duì))
55℃ *30~60min(cDNA 合成) 85℃ 10分鐘(失活 MLV)
4℃
*注:采用60min通常可以獲得更多的cDNA 產(chǎn)物(100%產(chǎn)量),通常30分鐘也可以獲得足夠的cDNA產(chǎn)物(80%產(chǎn)量)。
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