特別提示:包括NP-40裂解液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:NP-40裂解液
產(chǎn)品貨號:GL1468
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
用途:
溫和裂解細(xì)胞提取總蛋白質(zhì),主要用于Western,免疫沉淀,免疫共沉淀等
注意事項:
主要由NP-40、氯化鈉、Tris組成,NP-40為zuì常用的去污劑之一。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
儲存條件:-20℃,12個月
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貨號
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名稱
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規(guī)格
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YT616
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His-tag蛋白純化樹脂(鎳柱)
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10ml|100ml
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SNM410
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Bradford法蛋白檢測試劑盒
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100T/96樣
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SNM429
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WB內(nèi)參陽性對照
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100ug
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ALH375
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改良Bradford法蛋白定量試劑盒
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1000次|2500次
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RFT051
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寬分子量蛋白Marker(10~200KD)
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20T(100μl)
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KFS048
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AMCA標(biāo)記抗小鼠免疫熒光染色試劑盒
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300T
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關(guān)注
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名稱:細(xì)菌蛋白提取試劑盒
貨號:RFT159
規(guī)格:100次
細(xì)菌蛋白提取試劑盒使用溫和的非離子型去污劑,適用于大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白提取。提取過程中不需進(jìn)行超聲破碎等復(fù)雜的操作步驟,有效避免了外源蛋白的污染。該試劑盒在抽提試劑的基礎(chǔ)上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制劑混合物,可提高蛋白提取效率并減輕因DNA引起的粘稠現(xiàn)象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物學(xué)活性,可進(jìn)行IP、Western blot實驗,也可直接通過Ni-NTA 等純化填料進(jìn)行蛋白純化。該試劑盒既可適用于小量蛋白表達(dá)檢測,也適用于大量蛋白的表達(dá)純化試驗;既適用于純化可溶型蛋白,也適用于純化包涵體蛋白。每次提取使用1ml 緩沖液計算,該試劑盒可以使用100次。
試劑盒組成:
組份
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規(guī)格
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貯存
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細(xì)菌蛋白提取緩沖液
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100 ml
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常溫
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蛋白酶抑制劑(100×)
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1 ml
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-20℃
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溶菌酶 50mg/ml
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1 ml
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-20℃
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DNase I
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1000 U
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-20℃
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使用方法:
一、可溶型蛋白操作方法(1 ml菌液為例)
1、8000rpm常溫離心 3min 后,棄上層培養(yǎng)基,留取管底部菌體(盡量棄除掉培養(yǎng)基) 。
2、加入 200μl細(xì)菌蛋白提取液,2μl DNase I和4μl 溶菌酶重懸菌體,用吸頭吹打至無可見細(xì)胞團(tuán)塊。
3、置于常溫孵育 10-15min,期間輕彈離心管數(shù)次以加速裂解。
4、裂解完成后 13,000rpm 于4℃離心5 min,將上清轉(zhuǎn)移至新的容器中,溶液可直接進(jìn)行下一步純化或檢測試驗。
二、包涵體蛋白操作方法(1 ml菌液為例)
1、上述步驟4 中,棄上清,保留沉淀組分,用200μl 的細(xì)菌蛋白提取液重懸沉淀。
2、加入4μl溶菌酶,混合均勻,常溫孵育 10-15 min。
3、加入 800μl 的滅菌水混合均勻。
4、13,000 rpm常溫離心5min,棄上清后用 900μl 滅菌水重懸沉淀,然后加入 200μl 細(xì)菌蛋白提取液,混合均勻。
5、13,000rpm 室溫離心5 min,重復(fù)步驟4 三至五次。
6、將沉淀溶解于變性溶液中,進(jìn)行下一步純化或復(fù)性試驗。
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