特別提示:包括胃蛋白酶測試盒(微量法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:胃蛋白酶測試盒(微量法)
產(chǎn)品貨號(hào):SK123-1
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
測定意義:
胃蛋白酶由胃粘膜主細(xì)胞分泌,分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低酸癥的鑒別,慢性胃炎、慢性胃擴(kuò)張、慢性十二指腸炎等癥狀時(shí)也會(huì)引起胃蛋白酶分泌的減少。
測定原理:
胃蛋白酶可催化血紅蛋白水解,水解產(chǎn)物與福林試劑反應(yīng)后顯藍(lán)色;一定范圍內(nèi),其顏色的深淺與胃蛋白酶活性呈正比。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
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貨號(hào)
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名稱
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規(guī)格
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SNM016
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一氧化氮合成酶測試盒(DAF-FM DA探針法)(熒光法)
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100T
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植物可溶性糖含量測試盒(比色法)
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分型巰基(-SH)測定試劑盒
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24T(微板法)|100管/24樣(分光光度法)
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50管/48樣
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SNM320
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磷測試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))比色法(磷鉬酸法)
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100管/96樣
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關(guān)注
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名稱:Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)
貨號(hào):YT310
規(guī)格:100次
本試劑盒是一種基于WST-8的顯色反應(yīng),通過比色來檢測細(xì)胞、組織或其它樣品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或總SOD活性的試劑盒。本試劑盒可以檢測細(xì)胞或組織勻漿液上清、全血、紅細(xì)胞抽提物、血清等生物樣品中的SOD活性。一個(gè)試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測。
試劑盒組分:
SOD檢測緩沖液———————70ml
WST-8———————————800μl
酶溶液———————————100μl
反應(yīng)啟動(dòng)液(40X)——————60μl
Cu/Zn-SOD抑制劑A——————500μl
Cu/Zn-SOD抑制劑B——————500μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2),是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。
目前有多種SOD活性測定法,其中NBT(氮藍(lán)四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差,易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率達(dá)不到等,從而使檢測的靈敏度和度受到影響;細(xì)胞色素C法也是一種常用來檢測SOD活性的方法,但細(xì)胞色素C其氧化活性高,易受樣品中的還原劑干擾,另外該方法需要連續(xù)測定吸光度值,對(duì)于SOD的檢測靈敏度比較低,并且不太適合大批量樣本的檢測。
目前測定SOD比較的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理參考下圖,WST-8可以和黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan dye),該反應(yīng)步驟可以被SOD所抑制。通過對(duì)WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計(jì)算SOD的酶活力。

基于黃嘌呤氧化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系和WST-8的SOD酶活力檢測原理圖。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反應(yīng)產(chǎn)物是穩(wěn)定的水溶性產(chǎn)物,可以通過單個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度檢測來測定SOD活力,適合高通量篩選研究。同時(shí)WST-8法測定SOD酶活力時(shí),zuì大抑制百分率可以接近,并且可以不受一些常見的干擾因素的干擾,使檢測效果比其它的一些常見方法顯著改善。
本試劑盒的檢測不受樣品中過氧化氫的干擾。很多細(xì)胞和組織樣品中含有內(nèi)源性的過氧化氫,會(huì)干擾SOD的檢測。本試劑盒通過添加適量過氧化氫酶等特殊方法,能有效去除常規(guī)樣品中過氧化氫的干擾。例如,對(duì)于SOD標(biāo)準(zhǔn)品的檢測,標(biāo)準(zhǔn)品中添加高達(dá)0.1mM的過氧化氫時(shí),對(duì)于檢測結(jié)果仍無顯著影響。
哺乳動(dòng)物編碼3種SOD。在大部分組織中,含量zuì高的是定位在細(xì)胞漿中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表達(dá)在線粒體中,并且Mn-SOD是可以被誘導(dǎo)表達(dá)的。Mn-SOD在某些情況下也可以定位在細(xì)胞漿中。有些組織或體液中會(huì)含有第三種SOD,extracellular SOD,簡稱EC-SOD。EC-SOD也是一種Cu/Zn-SOD,和編碼細(xì)胞漿Cu/Zn-SOD的基因相似性很高,但有所不同。綜上所述,細(xì)胞或組織內(nèi)共有兩類SOD,即銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。這兩種SOD酶活性的總量就是總SOD的酶活性。當(dāng)用Cu/Zn-SOD的抑制劑抑制其酶活性時(shí)測定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此時(shí)同時(shí)測定總的SOD酶活性,就可以計(jì)算出Cu/Zn-SOD的酶活性。
KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性,也被大量用于測定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有劇毒,并且對(duì)Cu/Zn-SOD的抑制百分比達(dá)不到很接近。
本試劑盒采用了一種的兩步雙重抑制Cu/Zn-SOD的方法,在避免使用有毒yào品的情況下同時(shí)確保了對(duì)于Cu/Zn-SOD的抑制百分比達(dá)到高度接近,即對(duì)于Cu/Zn-SOD的抑制效果顯著優(yōu)于KCN或NaCN。使對(duì)于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的測定更加安全和準(zhǔn)確。
注意事項(xiàng):
1. 待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
2. 細(xì)胞或組織等樣品制備時(shí)不能采用含有Triton X-100等去垢劑的溶液,否則會(huì)干擾本試劑盒的檢測。
3. 抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
4. Cu/Zn-SOD抑制劑A對(duì)人體有刺激性,使用時(shí)請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期6個(gè)月。

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