10×YTM Buffer是高品質的克隆與表達產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科研試驗，10×YTM Buffer是我司眾多優(yōu)質克隆與表達之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經營血清、抗原、抗體等生物試劑產品，可以為您提供專業(yè)的技術服務，以優(yōu)良的價格、優(yōu)質的服務、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內多家企業(yè)、單位建立了良好的長期合作關系，擁有較好的企業(yè)信譽和品牌形象。

特別提示：包括10×YTM Buffer(與NEB CutSmart Buffer成分相同)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱：10×YTM Buffer(與NEB CutSmart Buffer成分相同)
英文名稱：10×YTM Buffer(For Restriction Enzyme)
產品貨號：YT488
產品規(guī)格：5ml

百奧萊博的10× YTM Buffer是一種能讓超過200種限制性內切酶的活性達到的緩沖液。使用YTM Buffer，可以免去內切酶酶切時選擇buffer的麻煩，特別是在雙酶切時會變得更加簡單易行。此外，許多DNA修飾酶在YTM Buffer中也保留了酶活性，這樣在酶切后進行DNA修飾酶處理就無需進行DNA純化了。

各種內切酶和修飾酶在1× YTM buffer中的活性，請參考附錄1和附錄2。不同來源的限制性內切酶對于YTM Buffer的兼容性可能略有不同。1× YTM Buffer的組分為50 mM Potassium acetate, 20 mM Tris-acetate, 10 mM Magnesium acetate, 100 μg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃，與NEB公司的CutSmart? Buffer完全一致。一個包裝的本產品，如果用于20μl的酶切反應體系，共可以用于2500個酶切反應。

儲存條件：-20℃。

附錄1：
常用限制性內切酶在 YTM Buffer 中的活性和效能表如下：


附錄2：
DNA 修飾酶在 YTM Buffer 中的活性表格如下:


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名稱：大腸桿菌JM110化學感受態(tài)細胞
貨號：BTN130511
規(guī)格：10*100μl
 本產品是采用大腸桿菌JM110菌株經特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達106。本產品為dam-，dcm-的菌株，排除dam，dcm甲基化的影響。
 菌株基因型為：dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等。

使用方法：
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μL，根據實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。

注意事項：
1. 涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

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