北京百奧萊博供應(yīng)的PVDF膜(0.22μM)用于科學(xué)研究，我公司的PVDF膜(0.22μM)品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經(jīng)營血清、抗原、抗體等生物試劑產(chǎn)品，可以為您提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，以優(yōu)良的價格、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內(nèi)多家企業(yè)、單位建立了良好的長期合作關(guān)系，擁有較好的企業(yè)信譽和品牌形象。

特別提示：包括PVDF膜(0.22μM)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：PVDF膜(0.22μM)
英文名稱：PVDF Membrane(0.22μM)
產(chǎn)品貨號：WE0300
產(chǎn)品規(guī)格：1 sheet



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名稱：動物線粒體總蛋白提取試劑盒
貨號：BTN130891
規(guī)格：50次

名稱：植物線粒體總蛋白提取試劑盒
貨號：BTN130886
規(guī)格：50次

名稱：膽酸鈉
貨號：BTN131048
規(guī)格：5g
本產(chǎn)品用于制備脂質(zhì)體和分離脂質(zhì)。HPLC測定其純度＞99%。低紫外吸收(1%溶液的A280＜0.08)。可以重生固定化的多粘菌素B 親和柱。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

名稱：一站式長效期SDS-PAGE套裝A(>30KD)
貨號：BTN100908A
規(guī)格：30次
本產(chǎn)品是在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)套裝基礎(chǔ)上改良而得，主要改良的地方有兩處：一是配膠液的pH偏酸，二是將還原劑加入到電泳液中。

產(chǎn)品特點：
1．偏酸的pH使PAGE膠比常規(guī)SDS-PAGE 更加穩(wěn)定，便于配預(yù)制膠，增加實驗的可重復(fù)性。
2．能降低蛋白質(zhì)的脫氨反應(yīng)和烷基化反應(yīng)，也能阻止蛋白質(zhì)的二硫鍵再生成。
3．把還原劑整合到電泳液中，避免了蛋白質(zhì)在電泳過程中重新形成二硫鍵，蛋白條帶比常規(guī)SDS-PAGE 更加銳利。
4．可把分離膠和濃縮膠配膠液整合成一個，成分更簡單。
5．更換電泳液即可用于不同大小的蛋白(A型電泳液適合20 kD以上蛋白，B型適合2-50 kD蛋白)，分離多肽時不需要Tricine-SDS-PAGE。
6．即開即用，用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
7．安全，免去了實驗人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。
8．電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實驗。

產(chǎn)品組成：

成分	30T(A)	30T(B)
丙烯酰胺(干粉)	60g	60g
甲叉雙丙烯酰胺(干粉)	3g	3g
長效期SDS-PAGE 配膠液，4×	200ml	200ml
長效期SDS-PAGE還原劑	10ml	10ml
TEMED	1.5ml	1.5ml
過硫酸銨	1g	1g
長效SDS-PAGE上樣液，5×	1ml	1ml
長效期SDS-PAGE電泳液A型	20L	-
長效期SDS-PAGE電泳液B型	-	20L
說明書	1份	1份

儲存條件：常溫運輸和保存(SDS-PAGE上樣液需-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一、使用本產(chǎn)品不需要濃縮膠，直接配制分離膠。如果使用A型電泳液(分離30 KD以上蛋白質(zhì)用)，zuì好配制10%的PAGE膠；如果使用B型電泳液(分離2-30 KD的蛋白質(zhì)用)，zuì好配制12%的PAGE膠。也可以選擇其他膠濃度，但各成分用量需要按比例調(diào)整。
1．次使用本產(chǎn)品時需先配制30%丙烯酰胺溶液:在本產(chǎn)品提供的裝有60克丙烯酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自備的去離子水，充分搖晃直到溶解即得200mL 30%丙烯酰胺溶液(用手大約搖10-20分鐘)。
2．次使用本產(chǎn)品時還需配制30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺(19:1)溶液(簡稱30% AB溶液,下同): 不同實驗需要加入不同比例的甲叉雙丙烯酰胺。對長效期SDS-PAGE電泳，丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺比例一般在19:1，因為此時PAGE膠的孔徑zuì小，分辨率zuì高。制備方法是將3g甲叉雙丙烯酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙烯酰胺溶液中，搖晃溶解即得30%的AB溶液，該溶液zuì好4℃避光(可包上錫箔紙壁光)保存并在一個月內(nèi)用完。30% AB溶液具有神經(jīng)毒性，一定要戴手套操作。
3．新鮮配制10%的APS(過硫酸銨)：按每0.1克過硫酸銨干粉加1mL 去離子水的比例將去離子水加到裝有硫酸銨干粉的1.5mL EP 管中，搖晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
4．本產(chǎn)品不需要配制分離膠和濃縮膠兩種膠，只需要配一種連續(xù)膠。配制方法如下(以下是以配制10mL的膠的用量為例，用戶自己需要根據(jù)膠的大小決定所需體積)：

膠濃度	用量(mL)			總體積 (mL)
	去離子水	30% AB溶液	4×長效期SDS-PAGE配膠液
10%(對A型)	4.20	3.30	2.50	10
12%(對B型)	3.50	4.00	2.50	10

5．搖晃混勻后抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應(yīng)，不去除的話將影響丙烯酰胺聚合反應(yīng))。
6．加入50μL新配制的10%APS和30μL TEMED(這是配制10mL膠的用量，配制更大體積的膠則按比例增加)，迅速搖勻后倒膠。
7．在膠的液面達(dá)到頂部的時候停止灌膠并插入梳子，室溫聚合30-60分鐘(低溫抑制聚合反應(yīng))。
8．拔出梳子，用水沖洗加樣孔。
9．配制的PAGE膠可以在4℃長期放置數(shù)月，直到使用。注意：需要蓋上1×長效期SDS-PAGE 配膠液，否則PAGE膠會變干而無法使用。
10．使用時，將凝膠板固定在電泳裝置上，往上槽和下槽加入足夠量的1×長效期SDS-PAGE電泳液(A型或B型)。
 注意：長效期SDS-PAGE電泳液A型或B型均以干粉形式提供，足夠配20 L 1×電泳液。配制時需將全部干粉(含多種沒有充分混合的成分，必須一次性全部使用)溶解在去離子水中，并定容到1 L，得到20×長效期SDS-PAGE電泳液，使用時再用去離子水稀釋成1×電泳液。20×長效期SDS-PAGE電泳液不需要調(diào)pH，可以室溫放置。
11．在上槽中加入適量的1×長效期SDS-PAGE電泳液和1/200 體積(以電泳液體積為基數(shù))的長效期SDS-PAGE還原劑并用玻璃棒攪拌混合均勻。
12．在蛋白質(zhì)樣品中加入5×長效期SDS-PAGE上樣液(8μL樣品加2μL上樣液)，72℃加熱10分鐘。注意：上樣液中的一些成分在低溫保存時會沉淀，所以用前需要65℃保溫10分鐘左右使沉淀溶解，混勻后才能使用。上樣液中的2-巰基乙醇容易揮發(fā)，使用多次后用戶可以在10μl樣品(蛋白質(zhì)樣品+上樣液的混合液)中補加0.5μl自備的2-巰基乙醇原液，以便使蛋白質(zhì)充分變性。如果樣品是蛋白質(zhì)沉淀(如TCA沉淀得到的蛋白質(zhì))，則需要用Tris緩沖液將其pH調(diào)到中性(可用pH試紙檢測)，否則殘留溶劑可能會改變上樣液的pH，嚴(yán)重影響電泳效果。
13．短暫離心，取上清液上樣。上樣的蛋白總量跟檢測方法相關(guān)，如果用銀染，可以只上樣ng級別(對每條帶的蛋白量而言)，如果用考染，需要上樣μg級別(對每條帶的蛋白量而言)。
14．用150V恒壓電壓進(jìn)行電泳，直到染料進(jìn)入膠底部(在B型電泳液中，溴酚藍(lán)的速度相當(dāng)于3-5 KD的蛋白質(zhì))。注意：在長效期SDS-PAGE中的電泳速度要快于普通SDS-PAGE。在B型電泳液中的速度又快于A型電泳液。過程中，電流會降低，屬于正?，F(xiàn)象。
15．終止電泳，取出凝膠進(jìn)行后續(xù)的實驗處理(如染色或轉(zhuǎn)膜)。注意：Western轉(zhuǎn)膜需要專門的轉(zhuǎn)膜液(百奧萊博可以提供)。

二、如果需要更高分辨率，也可把上法配制的膠當(dāng)成分離膠，并在其上再疊加4%的濃縮膠，操作如下：
16．按上面方法配制分離膠，只是倒膠后在膠面距離頂部1.5cm的時候，或者距梳子齒0.5cm時，停止灌膠。然后覆蓋一層1-5 mm 厚的水，使膠頂部液面平整。室溫聚合30-60分鐘(低溫抑制聚合反應(yīng))后，用1×長效期SDS-PAGE 配膠液洗滌凝固的膠的頂部，待用。
17．配制4%濃縮膠(參考上節(jié)第4-6 步)。倒膠后在液面達(dá)到頂部時停止灌膠，插入梳子，室溫聚合30-60分鐘(低溫抑制聚合反應(yīng))。
18．拔出梳子，用1×電泳液(A型或B型)沖洗加樣孔，后續(xù)處理接第7步。

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