水產動物基因組提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質的DNA提取純化產品，本制品用于生化實驗研究等領域，本品質量穩(wěn)定，價位合理，需要水產動物基因組提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經營血清、抗原、抗體等生物試劑產品，可以為您提供專業(yè)的技術服務，以優(yōu)良的價格、優(yōu)質的服務、優(yōu)先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內多家企業(yè)、單位建立了良好的長期合作關系，擁有較好的企業(yè)信譽和品牌形象。

特別提示：包括水產動物基因組提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產品名稱：水產動物基因組提取試劑盒
英文名稱：Marine Animal DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0182
產品規(guī)格：50次

  本試劑盒適合于從多種水產動物(如魚類、蝦類、貝類等)組織中提取總DNA。純化過程不需苯酚或lǜ仿等有機溶劑，無需乙醇沉淀。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA特異的結合到硅膠質離心吸附柱上，其他污染物可流過膜，蛋白、PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步有效的洗滌步驟被有效去除，zuì后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。

試劑盒組成：

組份	50次
Buffer GTL	15ml
Buffer GL	15ml
Buffer GW1(濃縮液)	13ml
Buffer GW2(濃縮液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25mg
蛋白酶K 儲存液	1.25ml
吸附柱DM及收集管	50套

自備試劑：無水乙醇。

實驗前準備及重要注意事項：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置，避免反復凍融，以免影響其活性。
2、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
3、次使用前應按照試劑瓶標簽說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
4、使用前請檢查Buffer GTL和Buffer GL是否出現(xiàn)結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游實驗對RNA污染比較敏感，可以在加入Buffer GTL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本試劑盒并未提供，如需要可單獨向本公司訂購，貨號：WE0225S。

不同水產動物組織提取得率：

樣本	建議孵育時間	DNA得率
貝類組織	0.5 h	12-20μg
蝦組織	1 h	8-14μg
魚組織	1 h	15-40μg

操作步驟：
1、取不超過30 mg組織材料，液氮充分研磨后，放入離心管(自備)中，加入200μl Buffer GTL，渦旋振蕩15秒。
注意：
1)根據(jù)提取的組織不同，起始量也有不同，腮的細胞量較大，一般建議提取量不超過20 mg。
2)如需去除RNA，可在上述步驟完成后，加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(貨號：WE0225S)，震蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
2、加入20μl 蛋白酶K ，渦旋混勻，簡短離心，使管壁上的溶液收集到管底。56℃孵育，直至組織完全溶解，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：不同組織裂解時間不同，通常需0.5-2小時即可完成。對于難裂解組織可以適當延長孵育時間。
3、加入200μl Buffer GL，充分顛倒混勻，70℃孵育10分鐘，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：加入Buffer GL時可能會產生白色沉淀，一般70℃放置時會消失，不會影響后續(xù)實驗。如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，可能導致提取DNA量少和提取出的DNA不純。
4、加入200μl無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能出現(xiàn)絮狀沉淀，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
5、將步驟4所得到的溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm(～～13400×g)離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
注意：如需進一步提高DNA純度，可重復步驟7。
8、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數(shù)分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步目的是將吸附柱中殘余乙醇去除，乙醇殘留會影響后續(xù)酶促反應(酶切、PCR等)。
9、將吸附柱置于一個新的離心管中，向吸附柱中間部位懸空加入50-200μl Buffer GE，室溫放置2-5分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟9所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟9；若洗脫體積小于200μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會減少總產量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)因為保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。

儲存條件：室溫(15～30℃)。

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貨號	名稱	規(guī)格
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名稱：菌體內毒素清除劑
貨號：BTN90901
規(guī)格：200mL
內毒素是E.coli細胞壁的主要成分，傳統(tǒng)的去除內毒素的方法是將內毒素和DNA一起純化出來，然后再用各種方法去除其中的內毒素，操作繁瑣，DNA 回收率低。本產品可以直接把E.coli 表面的內毒素去除，從根本上避免了內毒素對后續(xù)操作(如質粒DNA提取，重組蛋白質提取)的污染。

產品特點：
1. 個在菌體收集階段去除內毒素的產品，從源頭上避免了內毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸，從根本上防止了可能產生的污染。
2. 操作簡單快速，用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細菌表面的內毒素，只需要10分鐘左右時間，不需要復雜儀器設備。
3.，能去除99%以上的內毒素。
4.跟各種質粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質提取等操作兼容，DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA 丟失率可以高達50%)。
5. 不影響DNA和大部分蛋白質的活性，處理過的質粒DNA可用于轉染實驗。
6. 既可小規(guī)模使用(在1.5mL離心管內)，也可放量用于大規(guī)模無內毒素質粒DNA提取和無內毒素蛋白質純化。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于菌液小于3mL的樣品
1. 收集1.5-3mL E.coli 飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細菌沉淀。
2. 加入1mL 本產品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘，棄上清(含內毒素)。
3. 再重復上述操作3-4次，得到的菌體可以直接進入后續(xù)的無內毒素質粒DNA提取或無內毒素蛋白質提取程序。

二：用于菌液多于3mL的樣品
整個操作同上，只是在15或50mL塑料離心管中進行，離心速度不能超過離心管的承受力，本產品的用量按比例增加。

疑難解答：
Q:為何用常規(guī)的方法很難去除生物樣品中的內毒素?
A:因為內毒素帶電性跟DNA和部分蛋白質相同，所以基于帶電性的分離方法(如硅膠膜吸附，離子交換吸附)不能將它們分開;同時內毒素又是雙性分子(類似于細胞膜的磷脂分子)，能夠形成大小不等的聚合物，跟質粒DNA和蛋白質大小接近，所以基于分子量大小的分離方法(如凝膠排阻過濾和氯化銫超速離心)也不能將其有效分離。

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