特別提示:包括一氧化氮合成酶測試盒(DAF-FM DA探針法)(熒光法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:一氧化氮合成酶測試盒(DAF-FM DA探針法)(熒光法)
英文名稱:Nitric oxide synthase (NOS) test kit (DA DAF-FM probe method)
產(chǎn)品貨號:SNM016
產(chǎn)品規(guī)格:100T
檢測指標:NOS;一氧化氮合成酶
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名稱:線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV試劑盒(正鐵細胞色素C氧化還原酶)
貨號:SNM099
規(guī)格:20管/10樣
檢測指標:線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV
線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(細胞色素C-氧化還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過細胞色素C氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)中還原性細胞色素C 氧化后吸光峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種線粒體(動物、人體、酵母等)呼吸鏈復(fù)合物IV 的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,操作簡捷,性能穩(wěn)定。
線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV (Mitocho
ndria Complex IV),又稱為細胞色素C 氧化還原酶(cytochrome coxidoreductase)或細胞色素C 氧化酶(Cytochrome c oxidase),存在于真核生物的細胞線粒體上,主要通過氧化磷酸化為細胞提供能量。呼吸鏈復(fù)合物IV 是由13 種不同的亞體構(gòu)成的復(fù)合物,其中含有2 個血紅素(heme)基團(a 和a3)和2 個銅原子,作為輔基(prosthetic groups)。呼吸鏈復(fù)合物IV 的遺傳變異導(dǎo)致氧化磷酸化類疾病,包括阿茨罕默綜合癥和腫瘤等?;诘孜镞€原型細胞色素C(reduced cytochrome c),受到呼吸鏈復(fù)合物IV 的催化,轉(zhuǎn)化為氧化型細胞色素C(oxidized cytochrome c),在分光光度儀下,出現(xiàn)吸光值的變化(550nm 波長),由此定量測定呼吸鏈復(fù)合物IV 的活性。
試劑盒組份:
緩沖液(Reagent A) 20 毫升
反應(yīng)液(Reagent B) 1 毫升
稀釋液(Reagent C) 1 毫升
穩(wěn)定液A(Reagent D1) 1 管
穩(wěn)定液B(Reagent D2) 500 微升
保存方式
緩沖液(Reagent A)和稀釋液(Reagent C)保存在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentB)避免光照;有效保證6月。
注意事項
1. 本產(chǎn)品為20 次操作,包括背景對照
2. 操作時,須戴手套
3. 線粒體樣品中忌用DTT 和巰基乙醇等處理
4. 線粒體樣品檢測前,須溶解;建議凍存融解(-70℃至37℃)循環(huán)3 次
5. 如果增強酶活檢測,建議使用線粒體復(fù)合物待測樣品預(yù)處理試劑盒-S10342
6. 每增加1 個樣品,增加反應(yīng)工作液為:反應(yīng)液(Reagent B)50 微升+穩(wěn)定工作液1.5 微升,以此類推。配制反應(yīng)工作液時,須根據(jù)樣本數(shù)量配制實際工作液容量
7. 系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1 次
8. 分光光度計波長嚴格設(shè)置在550nm,誤差10nm 將不產(chǎn)生信號
9. 加樣后3 秒內(nèi)進行比色測定
10.比色測定后,比色皿須清洗徹底
11.背景空對照0 秒讀數(shù)通常0.2 至0.8 為理想狀態(tài)
12.背景空對照的正常讀數(shù)差值(0 秒-60 秒)通常為0.001至0.005(正負即可)
13.樣品0 秒讀數(shù)通常和背景空對照0 秒讀數(shù)一致
14.樣本測定60 秒讀數(shù)低于0 秒讀數(shù)表明具有酶活性
15.線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV 酶活性單位濃度定義:在25℃室溫下,pH 7.0 的情況下,每單位酶在單位時間內(nèi)(每分鐘)氧化1 微摩爾的細胞色素C
16.建議待測樣本為線粒體裂解懸液,則蛋白濃度為2 微克/100 微升;如果樣本酶活性過低或過高,則可以增加或降低樣本量(本公司提供線粒體溶解試劑盒為后續(xù)的線粒體蛋白濃度測定的預(yù)處理試劑盒和 Bradford 蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒)
17.如果使用細胞或組織裂解懸液,則蛋白濃度為50 微克/100微升

關(guān)注
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