特別提示:包括核酸內(nèi)切酶 IV在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:核酸內(nèi)切酶 IV
英文名稱:Nucleic acid enzyme IV
產(chǎn)品貨號(hào):SV1122
產(chǎn)品規(guī)格:5KU|1KU
特性:
單細(xì)胞凝膠電泳(彗星試驗(yàn))
堿洗脫
堿解旋
概述:
核酸內(nèi)切酶 IV 能夠作用于 DNA 分子上的幾種氧化性損傷。該酶是一個(gè)脫嘌呤/脫嘧啶(AP)核酸內(nèi)切酶,水解 DNA 上的完整 AP 位點(diǎn)。切割 AP 位點(diǎn) 5′ 端的個(gè)磷酸二酯鍵,產(chǎn)生 3′ 羥基和 5′ 脫氧核糖磷酸末端。該酶也具有 3′ 二酯酶活性,能從 DNA 的 3′ 末端釋放磷酸甘油醛、完整的脫氧核糖 5′ -磷酸和磷酸。
來源:
克隆有 Endo IV 基因的重組 E. coli 菌株。
反應(yīng)條件:
1X BalbBuffer 3
[100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 溫育。
熱失活:85℃ 加熱 20 分鐘。
質(zhì)保聲明:
核酸內(nèi)切酶 IV 經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),確保該產(chǎn)品具有zuì高的活性和純度。更多信息請(qǐng)聯(lián)系我們咨詢。
單位定義:
1 單位指在 10 μl 反應(yīng)體系中,37℃ 條件下,1 小時(shí)能切割 1 pmol 含一個(gè) AP 位點(diǎn)* 的 34 mer 寡核苷酸雙鏈所需要的酶量。更多信息請(qǐng)聯(lián)系我們咨詢。
* AP 位點(diǎn)的創(chuàng)建方法如下:37℃ 條件下,用 1 單位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)處理 10 pmol 含一個(gè)尿嘧啶堿基的 34 mer 寡核苷酸雙鏈 2 分鐘。
彗星試驗(yàn)的推薦稀釋倍數(shù):
1:104~1:105。詳細(xì)步驟請(qǐng)聯(lián)系我們咨詢。
濃度:
10,000 units/ml。
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名稱:DNA末端平滑試劑盒
貨號(hào):YT404
規(guī)格:20次
本試劑盒可以進(jìn)行20個(gè)常規(guī)的末端平滑化反應(yīng)。本品是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"的DNA外切酶活性,用于將酶切或PCR等反應(yīng)后產(chǎn)生的粘末端轉(zhuǎn)變?yōu)槠侥┒说脑噭┖?。?jīng)過本試劑盒處理產(chǎn)生的平末端DNA片段可以用于常規(guī)的平端連接反應(yīng)。
粘末端有兩種,一種為5"端突出末端,另外一種為3"端突出末端。本試劑盒可以將5"端突出末端補(bǔ)平,也可以將3"端突出末端削平(也稱打平)。
當(dāng)末端為5"端突出末端時(shí),T4 DNA Polymerase可以利用其5"→3"DNA聚合酶活性將末端補(bǔ)平;當(dāng)末端為3"端突出末端時(shí),T4 DNA Polymerase可以利用其3"→5"DNA外切酶活性將末端削平。
產(chǎn)品組份:
T4 DNA Polymerase(1U/μl)————20μl
Reaction Buffer(5X)———————100μl
dNTP Mixture(2.5mM each)—————50μl
Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT, 84mM(NH4)2SO4。
儲(chǔ)存條件:-20℃
名稱:堿性磷酸酶(來源于大腸桿菌)
貨號(hào):YT405
規(guī)格:200U
本品是一種熱敏感的,可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脫氧核糖核苷酸水解釋放5′或3′末端磷酸基團(tuán)的酶,也可以脫去蛋白質(zhì)絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基上的磷酸基團(tuán)。本酶是一種堿性磷酸酯酶,在我司的多種內(nèi)切酶和PCR緩沖液中可保持活性,對(duì)于各種類型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分鐘即可完成,并且75℃孵育5分鐘即可完全失活。
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被稱作堿性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1),是一類水解酶,通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去,并生成磷酸根離子和自由的羥基,其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白質(zhì)和生物堿等,并在堿性條件下zuì為有效。該酶是一組同功酶的統(tǒng)稱。
經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切的質(zhì)粒5′端帶有磷酸基團(tuán),在進(jìn)行基因克隆時(shí)為避免質(zhì)粒自連,可以使用本酶去除5′末端磷酸基團(tuán)。脫去5′末端磷酸基團(tuán)的質(zhì)粒不能發(fā)生自連。
特點(diǎn):快速去磷酸化,只需37℃孵育10分鐘即可;快速失活,75℃孵育5分鐘即可完全失活;使用方便,在各種內(nèi)切酶和PCR緩沖液中保持活性,可以和質(zhì)粒DNA的消化同時(shí)進(jìn)行;操作步驟簡(jiǎn)單,對(duì)于5′或3′突出末端、平端等各種DNA的脫磷酸化采用完全相同的操作步驟;可直接用于連接反應(yīng),經(jīng)本酶脫磷,并75℃孵育5分鐘失活后可直接用于后續(xù)的連接反應(yīng)。
用途:通過去除載體或DNA片段5′末端的磷酸基團(tuán),防止載體或DNA片段自連;質(zhì)粒DNA的同時(shí)內(nèi)切酶消化和脫磷;通過5′末端脫磷,為5′末端磷酸化放射性標(biāo)記準(zhǔn)備模板;去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基團(tuán);用于蛋白質(zhì)絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的去磷酸化。
來源:大腸桿菌表達(dá),表達(dá)基因?yàn)橐环N細(xì)菌堿性磷酸酯酶基因。
酶活性定義:37℃10分鐘內(nèi),催化1μg 線性化的pUC19 DNA5′末端脫磷所需的酶量定義為一個(gè)活力單位。
純度:不含DNA外切酶和內(nèi)切酶,不含RNA酶。
酶儲(chǔ)存溶液:20mM HEPES-NaOH(pH7.4),1mM MgCl2,0.1mM ZnCl2,0.1% Triton X-100,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃),50mM MgCl2,1M KCl,0.2% Triton X-100,10mM 2-mercaptoethanol,1mg/ml BSA。
失活或抑制:75℃加熱5分鐘可以使本酶失活。金屬離子螯合劑對(duì)本酶有抑制作用。
儲(chǔ)存條件:-20℃
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關(guān)注
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