2F1-D4-F6細(xì)胞培養(yǎng)基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)

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2F1-D4-F6細(xì)胞凍存時(shí)使用的DMEM培養(yǎng)基，復(fù)蘇時(shí)使用MEM培養(yǎng)基，第二天發(fā)現(xiàn)復(fù)蘇不成功，細(xì)胞沒(méi)有貼壁，我又重新離心之后加入DMEM培養(yǎng)基，請(qǐng)問(wèn)大神對(duì)細(xì)胞有影響嗎？？之后是否可以貼壁生長(zhǎng)？

資源名稱 2F1-D4-F6
種屬 小鼠7
形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)

這兩個(gè)培養(yǎng)基成分差距不大，大部分細(xì)胞換用應(yīng)該沒(méi)什么影響。2F1-D4-F6細(xì)胞復(fù)蘇不貼壁的話可能是：1.凍存細(xì)胞有問(wèn)題，比如凍存細(xì)胞狀態(tài)不是很好，凍存降溫過(guò)快等；2.復(fù)蘇細(xì)胞有問(wèn)題，比如融化速度過(guò)慢，離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速有問(wèn)題；3.細(xì)胞本身特性，有些細(xì)胞貼壁很慢，過(guò)夜不一定會(huì)都貼壁，這種情況不動(dòng)是的，再離心的話細(xì)胞貼壁只會(huì)更慢。

2F1-D4-F6細(xì)胞爬片的步驟：

1 什么是細(xì)胞爬片？其用途是什么？

2 細(xì)胞爬片的步驟是怎樣的？

3 細(xì)胞爬片需要哪些實(shí)驗(yàn)材料和儀器？

細(xì)胞爬片就是讓細(xì)胞（貼壁細(xì)胞）在片子（蓋玻片）上生長(zhǎng)。主要用來(lái)做免疫細(xì)胞化學(xué)啊，原位雜交等吧。在做這些實(shí)驗(yàn)時(shí)，制作標(biāo)本有兩種，一是離心做細(xì)胞涂片，二是細(xì)胞爬片。利用貼壁2F1-D4-F6細(xì)胞在玻璃等物質(zhì)上貼壁生長(zhǎng)的特點(diǎn)，讓它在蓋玻片上生長(zhǎng)，可以使制作的細(xì)胞片子更牢固，在后面的洗滌過(guò)程中，不易脫落。特別是在用粘附劑如多聚賴安酸處理過(guò)的片子上，細(xì)胞貼得更牢固。

細(xì)胞爬片：將片子放在細(xì)胞培養(yǎng)板（均已經(jīng)消毒）中，加入一定數(shù)量的細(xì)胞懸液，讓它生長(zhǎng)24小時(shí)。待它貼壁后，細(xì)胞爬片就制作好了。

需要的器材：多聚賴安酸、合適大小的蓋玻片（根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)板孔大小而定）、細(xì)胞培養(yǎng)板、培養(yǎng)基。

 

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