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價格：電議
所在地：北京
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更新時間：2017-01-12
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公司地址：北京市海淀區(qū)農(nóng)大南路廂黃旗都宜賓館二層
小朱(先生)
說明：X-gal作為β-半乳糖苷酶的發(fā)色底物用于藍(lán)白斑重組細(xì)菌
的篩選實驗。
分子式：C14H15BrClNO6 分子量：408.64
CAS＃：7240-90-6
外觀：白色粉末
特性：純度(％)：≥99
溶解性：溶于DMSO，參考濃度20mg/ml。
儲存條件：-20℃全稱：5-bromo-4-chloro-3-indolyl-&；beta；-D-galactopyranoside
中文名：5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷
貨號：1758-0300
CAS：7240-90-6
分子式：C14H15BrClNO6
分子量：408.6
外觀：白色粉末
純度（HPLC）：>；；=99％
比旋光度：[&；alpha；]20D -62o；； ±；； 2 (c=1 in DMF/H2O 1:1)
水分：&；le； 1％
溶解性：清澈溶液（2％in DMF）
儲存：4℃ 避光避潮；長期存放-20℃
儲液配制：溶解100mg X -gal 于5 mL DMF中，分裝成1ml，用鋁箔包裝避光保存。
用途：X-Gal是&；beta；-半乳糖苷酶(&；beta；-galactosidase)的顯色底物，在&；beta；-半乳糖苷酶的催化下會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。常用于&；beta；-半乳糖苷酶的原位染色檢測以及藍(lán)白斑篩選。溶于DMSO，溶解度可達(dá)20mg/ml。也溶于DMF。
藍(lán)白斑篩選：
1）載體質(zhì)粒和轉(zhuǎn)化受體菌株：
實驗所使用的載體質(zhì)粒DNA為pBS,轉(zhuǎn)化受體菌為E. coli DH5&；alpha；菌株。E. coli DH5&；alpha；菌株帶有&；beta；-半乳糖苷酶C端部分序列的編碼信息。載體質(zhì)粒DNA pBS上帶有&；beta；-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調(diào)控序列和&；beta；-半乳糖苷酶N端146個氨基酸的編碼序列。(這個編碼區(qū)中插入了一個多克隆位點,但并沒有破壞lacZ的閱讀框架,不影響其正常功能。)
在各自的情況下,pBS和DH5&；alpha；編碼的&；beta；-半乳糖苷酶的片段都沒有酶活性。但在pBS和DH5&；alpha；融為一體時可形成具有酶活性的蛋白質(zhì)。
這種lacZ基因上缺失近操縱基因區(qū)段的突變體與帶有完整的近操縱基因區(qū)段的&；beta；-半乳糖苷酸陰性突變體之間實現(xiàn)互補的現(xiàn)象叫&；alpha；-互補。
2）實驗用顯色方法
實驗中使用X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-&；beta；-D-半乳糖苷)和IPTG(異丙基硫代-&；beta；-D-半乳糖苷)而非直接使用&；beta；-半乳糖。X-gal 以及 &；beta；-半乳糖均為 &；beta；-半乳糖苷酶底物，但是X-gal不能誘導(dǎo)&；beta；-半乳糖苷酶操縱子。實驗中使用IPTG以誘導(dǎo)&；beta；-半乳糖苷酶操縱子。X-gal在&；beta；-半乳糖苷酶作用下生成深藍(lán)色產(chǎn)物
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