犬腎細胞,MDCK(NBL-2)細胞 1）素爾生物專業(yè)細胞株細胞系，細胞透亮，光滑，飽滿，有光澤，傳代次數少，值得信賴，歡迎您致電咨詢 A3/KAW細胞株生長狀態(tài)|細胞形態(tài)|來源背景|蛋白表達|生長條件|傳代周期|貨期|價格|

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 犬腎細胞,MDCK(NBL-2)細胞   

1）素爾生物專業(yè)細胞株細胞系，細胞透亮，光滑，飽滿，有光澤，傳代次數少，值得信賴，歡迎您致電咨詢 A3/KAW細胞株生長狀態(tài)|細胞形態(tài)|來源背景|蛋白表達|生長條件|傳代周期|貨期|價格|說明書等詳細信息，更多好禮相送，敬請期待！

犬腎細胞,MDCK(NBL-2)細胞  

大規(guī)模培養(yǎng)常用方法

根據動物細胞的類型，可采用貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)等三種培養(yǎng)方法進行大規(guī)模培養(yǎng)。

一、動物細胞生長特性及培養(yǎng)溫度

1、細胞生長緩慢，易污染，培養(yǎng)需用抗生素

2、細胞大，無細胞壁，機械強度低，環(huán)境適應性差

3、需氧少，不耐受強力通風與攪拌

4、群體生長效應，貼壁生長（錨地依賴性）

5、培養(yǎng)過程產品分布細胞內外，成本高

6、原代培養(yǎng)細胞一般繁殖50代即退化死亡

依據在體外培養(yǎng)時對生長基質依賴性差異，動物細胞可分為兩類：

貼壁依賴型細胞：需要附著于帶適量電荷的固體或半固體表面才能生長，大多數動物細胞，包括非淋巴組織細胞和許多異倍體細胞均屬于這一類。

非貼壁依賴型細胞：無需附著于固相表面即可生長，包括血液、淋巴組織細胞、許多腫瘤細胞及某些轉化細胞。

培養(yǎng)細胞的適溫度相當于各種細胞或組織取材機體的正常溫度。人和哺乳動物細胞培養(yǎng)的適溫度為35~37℃。偏離這一溫度，細胞正常的代謝和生長將會受到影響，甚至死亡?？偟膩碚f，培養(yǎng)細胞對低溫的耐力比高溫高。溫度不超過39℃時，細胞代謝強度與溫度成正比；細胞培養(yǎng)置于39~40℃環(huán)境中1h，即受到一定損傷，但仍能恢復；當溫度達43℃以上時，許多細胞將死亡。當溫度下降到30~20℃時，細胞代謝降低，因而與培養(yǎng)基之間物質交換減少。先看到的是細胞形態(tài)學的改變以及細胞從基質上脫落下來。當培養(yǎng)物恢復到初始的培養(yǎng)溫度時，它們原有的形態(tài)和代謝也隨之恢復到原有水平。

犬腎細胞,MDCK(NBL-2)細胞

 

SUER0597(XR)    T2細胞，人轉HLA-2基因B細胞

SUER0598(XR)    HPT-8細胞，人滋養(yǎng)層上皮細胞

SUER0599(XR)    WPMY-1細胞，人正常前列腺基質永生化細胞

SUER0600(XR)    RWPE-1細胞，人正常前列腺上皮細胞

SUER0601(XR)    MCF 10A細胞，人正常乳腺上皮細胞

SUER0602(XR)    ?PT67細胞，鼠逆轉錄酶病毒包裝細胞

SUER0603(XR)    LLC細胞，小鼠Lewis肺癌細胞

SUER0604(XR)    MEL細胞，小鼠紅白血病細胞

SUER0605(XR)    ?Neuro-2a細胞，小鼠腦神經瘤細胞

SUER0606(XR)    B95-8細胞，EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞

SUER0607(XR)    U14-GFP細胞，GFP標記的小鼠子宮頸癌細胞

SUER0608(XR)    FAT細胞，大鼠鼻咽癌細胞

SUER0609(XR)    GH3細胞，大鼠垂體瘤細胞

SUER0610(XR)    MMQ細胞，大鼠垂體瘤細胞

SUER0611(XR)    NR8383細胞，大鼠肺泡巨噬細胞

SUER0612(XR)    LLC-WRC 256細胞，大鼠腹水癌細胞

SUER0613(XR)    Walker256細胞，大鼠腹水癌細胞

SUER0614(XR)    CBRH-7919?細胞，大鼠肝癌細胞

SUER0615(XR)    CRL-1600細胞，大鼠肝癌細胞

SUER0616(XR)    R15細胞，大鼠肝癌細胞

SUER0617(XR)    RH-35細胞，大鼠肝癌細胞

SUER0618(XR)    H4-II-E-C3細胞，大鼠肝癌細胞

SUER0619(XR)    H-4-II-E細胞，大鼠肝癌細胞

SUER0620(XR)    UMR-106細胞，大鼠骨肉瘤細胞

SUER0621(XR)    IR983F細胞，大鼠骨髓瘤細胞

SUER0622(XR)    Y3-Ag 1.2.3細胞，大鼠骨髓瘤細胞

SUER0623(XR)    C6細胞，大鼠腦膠質瘤細胞

SUER0624(XR)    F98細胞，大鼠腦膠質瘤細胞

SUER0625(XR)    MADB106細胞，大鼠乳腺癌細胞

SUER0626(XR)    SHZ-88細胞，大鼠乳腺癌細胞

SUER0627(XR)    PC-12細胞，大鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞

SUER0628(XR)    PC-12(低分化)細胞，大鼠腎上腺嗜鉻瘤(低分化)細胞

SUER0629(XR)    PC-12(高分化)細胞，大鼠腎上腺嗜鉻瘤(高分化)細胞

SUER0630(XR)    RBL-2H3細胞，大鼠嗜堿性白血病

SUER0631(XR)    RBL-1細胞，大鼠嗜堿性粒性白血病

SUER0632(XR)    RIN-m5f細胞，大鼠胰島β瘤細胞

SUER0633(XR)    INS-1細胞，大鼠胰島瘤細胞

SUER0634(XR)    TMNE細胞，化學轉化小鼠鼻咽上皮細胞

SUER0635(XR)    DT40細胞，雞淋巴瘤細胞

SUER0636(XR)    DH82細胞，犬巨噬(狗腎惡性組織增生癥)細胞

SUER0637(XR)    P815*細胞，鼠肥大瘤細胞

SUER0638(XR)    MCA-RH7777細胞，鼠肝癌細胞

SUER0639(XR)    J558L細胞，鼠骨髓瘤細胞

SUER0640(XR)    CMT93細胞，鼠結腸癌細胞

SUER0641(XR)    WEHI 164細胞，鼠纖維肉瘤細胞

SUER0642(XR)    ?SH-2，3,4?細胞，鼠雜交瘤細胞

SUER0643(XR)    W6/32細胞，小鼠B雜交瘤細胞

SUER0644(XR)    LM9細胞，小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤細胞

SUER0645(XR)    LLC1[LL/2]細胞，小鼠Lewis肺癌細胞

SUER0646(XR)    LLC-RFP-puro細胞，小鼠Lewis肺癌細胞

SUER0647(XR)    E.G7-OVA細胞，小鼠T淋巴瘤細胞

SUER0648(XR)    PK136細胞，小鼠X小鼠細胞

SUER0649(XR)    EAC 細胞，小鼠艾氏腹水癌細胞

SUER0650(XR)    L1210細胞，小鼠白血病細胞

SUER0651(XR)    M1細胞，小鼠白血病細胞

SUER0652(XR)    P388細胞，小鼠白血病細胞

SUER0653(XR)    L6565細胞，小鼠白血病克隆系細胞

SUER0654(XR)    AtT-20細胞，小鼠垂體瘤細胞

SUER0655(XR)    Raw-Blue細胞，小鼠單核白血病細胞

SUER0656(XR)    J774A.1細胞，小鼠單核巨噬細胞

SUER0657(XR)    RAW 264.7細胞，小鼠單核巨噬白血病細胞

SUER0658(XR)    P815細胞，小鼠肥大瘤細胞

SUER0659(XR)    LA795細胞，小鼠肺腺癌細胞

SUER0660(XR)    S-180細胞，小鼠腹水瘤/小鼠肉瘤細胞

SUER0661(XR)    H22細胞，小鼠肝癌細胞

SUER0662(XR)    Hepa 1-6細胞，小鼠肝癌細胞

SUER0663(XR)    MH134細胞，小鼠肝癌細胞

SUER0664(XR)    MLTC-1細胞，小鼠睪丸間質瘤細胞

SUER0665(XR)    CRL-2836細胞，小鼠骨肉瘤成骨細胞

SUER0666(XR)    K7M2 wt細胞，小鼠骨肉瘤成骨細胞

SUER0667(XR)    FO細胞，小鼠骨髓瘤細胞

SUER0668(XR)    P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞，小鼠骨髓瘤細胞

SUER0669(XR)    P3X63Ag8細胞，小鼠骨髓瘤細胞

SUER0670(XR)    P3X63Ag8.653細胞，小鼠骨髓瘤細胞

SUER0671(XR)    SP2/0細胞，小鼠骨髓瘤細胞

SUER0672(XR)    Sp2/0-Ag14細胞，小鼠骨髓瘤細胞

SUER0673(XR)    B16細胞，小鼠黑色素瘤細胞

SUER0674(XR)    B16/??CRL-6323細胞，小鼠黑色素瘤細胞

SUER0675(XR)    B16-F0細胞，小鼠黑色素瘤細胞

SUER0676(XR)    B16-F1細胞，小鼠黑色素瘤細胞

SUER0677(XR)    Yac-1細胞，小鼠紅白血病細胞

SUER0678(XR)    F9細胞，小鼠畸胎瘤細胞

SUER0679(XR)    P19細胞，小鼠畸胎瘤細胞

SUER0680(XR)    F9細胞，小鼠畸胎瘤/小鼠胚胎癌細胞

犬腎細胞,MDCK(NBL-2)細胞   

二、貼壁培養(yǎng)（attachment culture）是指細胞貼附在一定的固相表面進行的培養(yǎng)。

1、生長特性：貼壁依賴型細胞在培養(yǎng)時要貼附于培養(yǎng)（瓶）器皿壁上，細胞一經貼壁就迅速鋪展，然后開始有絲分裂，并很快進入對數生長期。一般數天后就鋪滿培養(yǎng)表面，并形成致密的細胞單層。

2、貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點：

容易更換培養(yǎng)液；細胞緊密黏附于固相表面，可直接傾去舊培養(yǎng)液，清洗后直接加入新培養(yǎng)液。

容易采用灌注培養(yǎng)，從而達到提高細胞密度的目的；因細胞固定表面，不需過濾系統(tǒng)。

當細胞貼壁于生長基質時，很多細胞將更有效的表達一種產品。

同一設備可采用不同的培養(yǎng)液/細胞的比例。

適用于所有類型細胞。

3、貼壁培養(yǎng)的缺點：與懸浮培養(yǎng)法相比

擴大培養(yǎng)比較困難，投資大；

占地面積大；

不能有效監(jiān)測細胞的生長；

4、細胞貼壁的表面：要求具有凈陽電荷和高度表面活性。對微載體而言還要求具一定電荷密度；若為有機物表面，必須具有親水性，并帶陽電荷。

5、貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)：主要有轉瓶、中空纖維（后面專題介紹）、玻璃珠、微載體系統(tǒng)（后面介紹）等。

轉瓶培養(yǎng)系統(tǒng)：培養(yǎng)貼壁依賴型細胞初采用轉瓶系統(tǒng)培養(yǎng)。轉瓶培養(yǎng)一般用于小量培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)的過渡階段，或作為生物反應器接種細胞準備的一條途徑。細胞接種在旋轉的圓筒形培養(yǎng)器-轉瓶中，培養(yǎng)過程中轉瓶不斷旋轉，使細胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣，從而提供較好的傳質和傳熱條件。

轉瓶培養(yǎng)具有結構簡單，投資少，技術成熟，重復性好，放大只需簡單的增加轉瓶數量等優(yōu)點。 但也有其缺點：勞動強度大，占地空間大，單位體積提供細胞生長的表面積小，細胞生長密度低，培養(yǎng)時監(jiān)測和控制環(huán)境條件受到限制等。 現(xiàn)在使用的轉瓶培養(yǎng)系統(tǒng)包括二氧化碳培養(yǎng)箱和轉瓶機兩類。

反應器貼壁培養(yǎng) 此種培養(yǎng)方式中，細胞貼附于固定的表面生長，不因為攪拌而跟隨培養(yǎng)液一起流動，因此比較容易更換培養(yǎng)液，不需要特殊的分離細胞和培養(yǎng)液的設備，可以采用灌流培養(yǎng)獲得高細胞密度，能有效地獲得一種產品；但擴大規(guī)模較難，不能直接監(jiān)控細胞的生長情況，故多用于制備用量較小、價值高的生物藥品。

CelliGen、CelliGen PlusTM和Bioflo3000反應器是常用的貼壁培養(yǎng)式生物反應器，用于細胞貼壁培養(yǎng)時可用籃式攪拌系統(tǒng)和圓盤狀載體。此載體是直徑6毫米無紡聚酯纖維圓片，具很高表面積與體積比（1200cm2/g），利于獲得高細胞密度?；@式攪拌系統(tǒng)和載體培養(yǎng)是目前貼壁細胞培養(yǎng)使用多方式，用于雜交瘤細胞、Hela細胞、293細胞、CHO細胞及其它細胞培養(yǎng)。此種方式培養(yǎng)細胞，細胞接種后貼壁快。

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