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價格:電議
所在地:北京
型號:735004
更新時間:2022-02-07
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公司地址:北京市朝陽區湯立路216號東方郁金香A-507
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馬浩然(先生) 業務員


RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設計。獨特的裂解和孵育條件逆轉福爾馬林對RNA的修飾。并且裂解緩沖液可將RNA從組織切片中有效釋放出來,防止RNA的進一步降解。試劑盒同樣使用DNase和DNase Booster Buffer優化,去除基因組DNA的污染。使用RNeasy MinElute離心柱純化獲得的總RNA,洗脫體積可小至10 μl。整個純化流程可在QIAcube全自動核酸純化儀上全自動進行。
性能
用福爾馬林固定組織會導致RNA-RNA和RNA-蛋白質的交聯,這會影響RNA在酶學分析中的性能。FFPE樣本固定和包埋同樣會導致核酸的嚴重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了獨特的裂解和孵育條件來逆轉福爾馬林對RNA的修飾。裂解緩沖液能使RNA從FFPE組織樣本中有效釋放,并防止進一步的RNA降解。經優化的條件能純化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit從FFPE樣本中得到的RNA的產量比其他方法更高。
整個RNeasy FFPE操作流程可在85分鐘內完成(參見RNeasy FFPE procedure)。使用蛋白酶K裂解樣本僅需15分鐘。裂解后,樣本在80ºC下孵育15分鐘。之后,用DNase處理能有效去除樣本中的基因組DNA,包括小的DNA片段。后,使用RNeasy MinElute離心柱即可收集純化的RNA,洗脫體積14–30 µl。純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上全自動進行。
RNeasy FFPE Kit可純化FFPE 樣本中所有大于70 nt RNA,得到適用于RT-PCR等眾多下游應用的RNA片段。但是,從FFPE樣本中純化得到的RNA會嚴重片段化,不能用于需要完整RNA的下游應用。如果使用片段化RNA可能需要做些修飾(例如在RT-PCR時設計小的擴增子)。進行cDNA合成時,不能使用oligo-dT引物,而要使用隨機或基因特異性引物。
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