TRIzol，一步法總RNA提取試劑，15596-026
- 產(chǎn)品/服務：TRIzol，一步法總RNA提取試劑，15596-026
- 型 號：15596-026
- 品 牌：Invitrogen
- 單 價：面議
- 更新日期：2020-04-21
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：1541
上海素爾生物強勢供應TRIzol一步法總RNA提取試劑，保證原裝進口，價格zui低！是各大實驗室的！訂購熱線：...
貨號：15596-026
英文名稱：TRIzol Reagent;TRIzol
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保存條件：廠商要求的保存溫度 |
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數(shù)量：現(xiàn)貨供應,請來電咨詢! |
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品牌：invitrogen |
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規(guī)格：100ML |
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上海素爾生物強勢供應TRIzol一步法總RNA提取試劑，保證原裝進口，價格zui低！是各大實驗室的！： TRIzol一步法總RNA提取試劑簡介 : TRIzol 是一種總 RNA 抽提試劑，可以直接從細胞或組織中提取總 RNA 。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。 TRIzol 在破碎和溶解細胞時能保持 RNA 的完整性，因此對純化 DNA 及標準化 RNA 的生產(chǎn)十分有用。 TRIzol一步法總RNA提取試劑的成分 : TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白，核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì)，但不能完全抑制 RNA 酶活性，因此 TRIzol 中還加入了 8 －羥基喹啉、異硫氰酸胍、 β- 巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源 RNase （ RNA 酶）。 ※ 0.1% 的 8 －羥基喹啉可以抑制 RNase ，與氯仿聯(lián)合使用可增強抑制作用。 ※ 異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質(zhì)變性劑，可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)消失，導致細胞結(jié)構(gòu)降解，核蛋白迅速與核酸分離。 ※ β- 巰基乙醇的主要作用是破壞 RNase 蛋白質(zhì)中的二硫鍵。 TRIzol一步法總RNA提取試劑的使用方法 : 用勻漿器將組織磨碎，加入 TRIzol 處理組織。 5 分鐘后加入氯仿，以每分鐘 12000 轉(zhuǎn)離心 5 分鐘，樣品即分成水樣層、中間層和有機層。 ※ RNA 存在于水樣層中，收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀 RNA 來還原。 ※ 在除去水樣層后，有機層中的 DNA 和蛋白質(zhì)也能相繼以沉淀的方式還原：乙醇能使中間層的 DNA 沉淀析出，在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質(zhì)。 每 100ml TRIzol 可以抽提 100 個六孔板中的樣品或 100 個 50-80mg 的組織樣品。無論樣品是人、動物、植物還是細菌組織，該方法對少量的組織 (50-100mg) 和細胞 ( 約五百萬個 ) 及大量的組織 (≥1g) 和細胞 ( 超過一千萬個 ) 均有較好的分離效果。 每一百萬細胞用 TRIzol 抽提可得 5-15 微克 RNA ，每毫克組織用 TRIzol 抽提可得 1-10 微克 RNA （產(chǎn)量因細胞和組織不同而異）。 TRIzol 操作上的簡便性允許其同時處理多個樣品，所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。 TRIzol 抽提的總 RNA 能夠避免 DNA 和蛋白質(zhì)的污染，故而能夠作 RNA 印跡分析、斑點雜交、 poly(A)+ 選擇、體外翻譯、 RNA 酶保護分析和單分子克隆（ PCR ）。 ※ 如果是用于 PCR ，當兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時，建議用級聯(lián)擴大的 DNase I(Cat. No. 18068) 來處理抽提的總 RNA 。 ※ TRIzol 試劑能促進不同種屬、不同分子量大小的多種 RNA 的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的 RNA 經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見許多介于 7kb 和 15kb 之間的不連續(xù)的高分子量條帶（ mRNA 和 hnRNA 成分），兩條核糖體 RNA 條帶位于 ~5 kb (28S) 和 ~2 kb (18S) ，低分子量 RNA 介于 0.1 和 0.3kb 之間 (tRNA, 5S) 。當抽提的 RNA 用 TE 稀釋時，其 A260/A280 比值 ≥1.8 。抽提小 RNA 時宜 -70 ℃ 沉淀過夜。 TRIzol 對人體有害，使用時應戴一次性手套，注意防止濺出。 acterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C. |
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