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產品詳情
- 產品/服務：無血清細胞凍存液試劑
- 單 價：面議
- 更新日期：2024-09-24
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：2228
產品簡介
無血清細胞凍存液試劑 玻璃化冷凍法可以有效細胞在解凍后具有較高的存活率，因而已成為標準慢程序冷凍方法的重要替代方法。然而，玻璃化需要超快速的冷凍程序，從制造細胞懸浮液到冷凍在液氮中通常不超過15秒。...
產品詳細介紹
無血清細胞凍存液試劑：Cell Reservoir One,Vitrify
玻璃化冷凍法可以有效細胞在解凍后具有較高的存活率，因而已成為標準慢程序冷凍方法的重要替代方法。然而，玻璃化需要超快速的冷凍程序，從制造細胞懸浮液到冷凍在液氮中通常不超過15秒。
Cell Reservoir One,Vitrify是一種的用于玻璃化的無血清細胞培養冷凍培養基，其主要成分為從蠶繭中分離得到的水溶性糖蛋白絲膠蛋白。即使采用長時間的冷凍方案，Cell Reservoir One,Vitrify也能使靈長類細胞(如猴胚胎干細胞和人類IPS細胞)具有很高的存活率;從細胞收集到在液氮中冷凍長達60秒。
無血清細胞凍存液試劑 產品特點：
1. 經過較長時間的操作（長達60秒），仍可以保持細胞高存活率。
2. 對細胞低毒性，不含有DMSO和乙酰胺
3. 可以用于靈長類胚胎干細胞和人IPS細胞
應用實例1：人誘導多功能干細胞的存活率比較（201B7 細胞系*）
*Takahashi, K. et al. Cell, 2007 Nov 30;131(5):861-872
冷凍流程：60秒
人IPS細胞在Cell Reservoir One,Vitrify和DAP213中冷凍保存2周以上。
細胞解凍后4天用堿性磷酸酶檢測細胞存活率。Cell Reservoir One,Vitrify細胞存活率高，而DAP213大部分細胞死亡。
冷凍流程：15秒
人IPS細胞在Cell Reservoir One,Vitrify、DAP213和A公司產品中冷凍保存2周以上。
細胞解凍后4天用堿性磷酸酶檢測存活率。Cell Reservoir One,Vitrify保存的細胞表現出的生存能力。
結論：Cell Reservoir One (Vitrify) 在經過 15 或 60 秒冷凍時間后都顯示較高的細胞存活率。在 60 秒冷凍操作的情況下，Cell Reservoir One (Vitrify) 的細胞存活率顯著高于其它試劑產品。
應用實例2：靈長類干細胞恢復率的比較。
應用實例3：人iPS細胞(253G1)與競爭對手復蘇率的比較
人iPS細胞用不同公司的冷凍培養基中冷凍15秒，冷凍保存2小時。
解凍后4天評價復蘇率。Cell Reservoir One (Vitrify) 部回收率
應用實例4：人iPS細胞（253G1）復蘇率的比較及未分化狀態的檢測
與DAP213相比，Cell Reservoir One (Vitrify) 具有高的復蘇率。凍結操作的時間（15秒
或60秒）不影響細胞的復蘇率，以及未分化標記基因的表達也可以證明。
操作步驟：
細胞凍存
- 在干凈的工作臺附近準備鑷子和液氮。
- 分離靈長類動物的ES/iPS細胞（0.25%胰蛋白酶/膠原酶IV溶液），并小心收集細胞。
- 將細胞收集到離心管中，離心并盡可能多地去除上清。Cell Reservoir One (Vitrify)的濃度被上清液稀釋可能降低細胞活性。
- 加入200ul的Cell Reservoir One (Vitrify)，小心用移液器混合4-5次，以分散細胞。將細胞迅速轉移到凍存管中。
- 將凍存管2/3浸入到液氮中10秒，然后完浸沒。為了增加成功率，4-5步驟需要在60秒內完成。
- 將凍存管轉移到液氮培養罐保存。
無血清細胞凍存液試劑 細胞復蘇
- 在離心管中，37℃水浴預熱10ml細胞培養基。
- 從液氮罐中取出裝有冷凍細胞的低溫保存管，轉移到干凈的工作臺上，并其浸泡在液氮中。
- 從液氮中取出管子。打開蓋子，把管里的液氮倒置丟棄
- 在凍存管中加入超過800ul的預熱細胞培養基，并用移液槍吹打幾次，使細胞迅速解凍。根據凍存管大小加入的培養基越多細胞解凍越快。
- 將細胞懸浮液轉移到步驟1的離心管中。3-5步驟操作越快越好
- 用細胞培養基清洗凍存管，將培養基轉移到步驟1的離心管中。
- 離心收集細胞，轉移到新鮮培養基中培養。盡可能多的去除上清。
無血清細胞凍存液試劑 注意：
1) 使用前先對目標細胞進行預試驗。
2) NACALAI不承擔因使用本產品而產生的任何損害或損失的責任。
如果您覺得“無血清細胞凍存液試劑”描述資料不夠齊全，請聯系我們獲取詳細資料。(聯系時請告訴我從給覽網看到的，我們將給您最大優惠！)
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