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古朵課堂:培育基怎么消除組織培育的污染?
發(fā)布時間:2023-02-08瀏覽次數(shù):830返回列表
古朵課堂:培育基怎么消除組織培育的污染?
當(dāng)重要的培育污染時,研究者或許企圖消除或控制污染。首要,確認(rèn)污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,用試驗(yàn)室消du劑消du培育器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素或許對一些細(xì)胞系有du性,因而,做劑量反響試驗(yàn)確認(rèn)抗生素和抗霉菌素發(fā)生du性的劑量水平。下面是推薦的確認(rèn)du性水平緩消除培育污染的試驗(yàn)過程。
① 在無抗生素的培育基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。
② 分散細(xì)胞懸液到多孔培育板中,或幾個小培育瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。
③ 每天觀測細(xì)胞du性目標(biāo),如脫落,呈現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。
④ 確認(rèn)抗生素du性水平后,運(yùn)用低于du性濃度2-3倍濃度的抗生素的培育液培育細(xì)胞2-3代。
⑤ 在無抗生素的培育基中培育細(xì)胞一代。
⑥ 重復(fù)過程4。
⑦ 在無抗生素的培育基中培育4-6代,確認(rèn)污染是否以已被消除。
培育基操作建議:
1、商品化的應(yīng)根據(jù)運(yùn)用說明書上的要求進(jìn)行貯存。標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有批號,生產(chǎn)日期、有效期及有關(guān)特性。所選用的保藏和運(yùn)送條件應(yīng)使限度失掉水分并提供機(jī)械維護(hù)。
2、配制好之后應(yīng)保存在2~25℃避光的環(huán)境。若保存于非密閉容器中,一般在三周內(nèi)運(yùn)用;若保存于密閉容器中,一般在一年內(nèi)運(yùn)用,瓊脂培育基不得在0℃或0℃以下存放,防止冷凍破壞凝膠特性。若要長期保存,瓊脂平板應(yīng)密閉包裝或置于密閉容器中以防止水分丟失。
3、保存于密閉容器中,可防止水分丟失以延長保存時刻。
4、滅菌后應(yīng)立即取出,不得儲藏在高壓菌器中,避免影響質(zhì)量。制備好之后應(yīng)保存在2~25℃、避光的環(huán)境。
5、固體培育基滅菌后的再融化應(yīng)在加熱的水浴中或選用流通蒸汽進(jìn)行,只允許一次,融化后應(yīng)放在45~50℃的水浴中,不得超越8小時。
培育基上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。