免疫印跡最重要也是最后一步就是酶與底物反應進行檢測，本試劑盒以化學熒光發(fā)光方法檢測蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子。其原理是，蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉移到印跡膜上，以一抗及辣根過氧化物酶HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液，在可見光下室溫孵...

產(chǎn)品特點：

● 高靈敏度

● 低背景

試劑盒以外自備試劑和儀器

● 移液器 ● 雙蒸水

注意事項：

● ECL工作液配制過程中吸取試劑A和試劑B時務必跟換吸頭，工作液新鮮配制后立即使用，放置過久會影響靈敏度。

● 根據(jù)蛋白豐度不同曝光時間可能是數(shù)秒至數(shù)小時。

● 曝光時間過長會使背景加深，曝光不足會導致條帶模糊。

● 如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。

● 應使用高質(zhì)量保鮮膜。

使用方法：

1、使用合適的方法進行Western，直至用PBST洗滌二抗。

2、新鮮配制ECL工作液：試劑A和試劑B按1:1混合后， 用雙蒸水10倍稀釋，混合后即為ECL工作液。須立即使用！

3、印跡膜蛋白面朝上，用ECL工作液均勻滴加至印跡膜室溫孵育1-2分鐘。ECL工作液使用量大約為0.125mL/cm²膜或根據(jù)個人實驗習慣使用。

4、用平頭鑷夾住印跡膜，垂直置于吸水紙以吸去多余工作液。

5、快速將印跡膜置于二層保鮮膜之間，盡量趕盡氣泡。

6、將印跡膜蛋白面朝上，放于X光膠片暗盒內(nèi)。在暗室內(nèi)放入X光片，曝光，顯影。

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