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產(chǎn)品名稱：土壤全鉀含量測定(火焰光度法)
產(chǎn)品貨號：SK333
產(chǎn)品規(guī)格：咨詢



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名稱：總SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)
貨號：YT309
規(guī)格：100次
本試劑盒是一種基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過比色來檢測細(xì)胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。本試劑盒可以檢測細(xì)胞或組織勻漿液上清、全血、紅細(xì)胞抽提物、血清等生物樣品中的SOD活性。一個試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測。

試劑盒組分：
SOD檢測緩沖液——————70ml
WST-8——————————800μl
酶溶液——————————100μl
反應(yīng)啟動液(40X)——————60μl

超氧化物岐化酶能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2)，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。

目前有多種SOD活性測定法，其中NBT(氮藍(lán)四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差，易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率達(dá)不到等，從而使檢測的靈敏度和度受到影響；細(xì)胞色素C法也是一種常用來檢測SOD活性的方法，但細(xì)胞色素C其氧化活性高，易受樣品中的還原劑干擾，另外該方法需要連續(xù)測定吸光度值，對于SOD的檢測靈敏度比較低，并且不太適合大批量樣本的檢測。

目前測定SOD比較的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理參考下圖，WST-8可以和黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，該反應(yīng)步驟可以被SOD所抑制。通過對WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計(jì)算SOD的酶活力。


基于黃嘌呤氧化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系和WST-8的SOD酶活力檢測原理圖。XO：xanthine oxidase。

WST-8的反應(yīng)產(chǎn)物是穩(wěn)定的水溶性產(chǎn)物，可以通過單個時間點(diǎn)的吸光度檢測來測定SOD活力，適合高通量篩選研究。同時WST-8法測定SOD酶活力時，zuì大抑制百分率可以接近，并且可以不受一些常見的干擾因素的干擾，使檢測效果比其它的一些常見方法顯著改善。

本試劑盒的檢測不受樣品中過氧化氫的干擾。很多細(xì)胞和組織樣品中含有內(nèi)源性的過氧化氫，會干擾SOD的檢測。本試劑盒通過添加適量過氧化氫酶等特殊方法，能有效去除常規(guī)樣品中過氧化氫的干擾。例如，對于SOD標(biāo)準(zhǔn)品的檢測，標(biāo)準(zhǔn)品中添加高達(dá)0.1mM的過氧化氫時，對于檢測結(jié)果仍無顯著影響。

注意事項(xiàng)：
1. 待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
2. 細(xì)胞或組織等樣品制備時不能采用含有Triton X-100等去垢劑的溶液，否則會干擾本試劑盒的檢測。
3. 抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色，如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

儲存條件：-20℃，有效期6個月。

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