HR8208 外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)
- 產(chǎn)品/服務(wù)：HR8208 外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)
- 型 號(hào)：HR8208
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-08-28
- 有效期至：長(zhǎng)期有效
- 瀏覽次數(shù)：965
本試劑盒按每個(gè)樣本處理2mL乳汁/唾液計(jì)，每個(gè)50T試劑盒大約可以用于提取100mL乳汁/唾液。如果需要處理大量的乳汁/唾液，將提取液按說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)操作的體積等比例調(diào)整即可。...
外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)
產(chǎn)品編號(hào)：HR8208
試劑盒組成：
|
組份 |
50T |
100T |
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組份A：外泌體提取液A |
100mL |
200mL |
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組份B：外泌體提取液B |
50mL |
100mL |
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組份C：外泌體保存液C |
10mL |
20mL |
儲(chǔ)存條件：
2-8℃保存，有效期1年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
總外泌體提取試劑盒（乳汁/唾液用）適用于從各種乳汁/唾液樣品中提取總外泌體。不需要超速離心，僅需通過(guò)簡(jiǎn)單的常規(guī)離心即可從樣本中獲取大量結(jié)構(gòu)完整的外泌體，具有快速簡(jiǎn)單，提取效率高的特點(diǎn)，可節(jié)省更多的實(shí)驗(yàn)時(shí)間和樣本。提取的外泌體可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠糜诤罄m(xù)的多種實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用范圍廣泛。
外泌體是活細(xì)胞分泌的來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體)的膜性小囊泡，直徑約為30-150nm，天然存在于血液、唾液、尿液和母乳等各種體液中，研究發(fā)現(xiàn)，Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)、mRNA 和microRNA，并且exosome能夠通過(guò)生物屏障，在細(xì)胞間傳遞功能性核酸分子，從而發(fā)揮各種生物學(xué)功能。
外泌體囊泡已經(jīng)成為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)，參與原核生物和高等真核生物細(xì)胞之間的生物信號(hào)傳遞，以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過(guò)程。外泌體囊泡的病理生理作用開始在包括癌癥、感染性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到充分認(rèn)識(shí)，顯現(xiàn)了外泌體作為疾病的早期診斷、治療干預(yù)的潛在新靶點(diǎn)的巨大應(yīng)用前景。此外，未修飾和工程化的外泌體囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用價(jià)值。
傳統(tǒng)的乳汁/唾液中分離和提取exosome 的主要方法是超速離心法，這種方法缺點(diǎn)是耗時(shí)耗力，往往需要30-70個(gè)小時(shí)，每次最多只能處理6個(gè)樣品，需要大量的起始材料，而且產(chǎn)量不高。
我公司的外泌體快速提取試劑盒產(chǎn)品，可以通過(guò)簡(jiǎn)單離心快速高效獲得高純度外泌體顆粒。本試劑盒提取的外泌體完好無(wú)缺，能用于各種功能研究、蛋白分析及RNA 分析等下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒按每個(gè)樣本處理2mL乳汁/唾液計(jì)，每個(gè)50T試劑盒大約可以用于提取100mL乳汁/唾液。如果需要處理大量的乳汁/唾液，將提取液按說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)操作的體積等比例調(diào)整即可。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
● 使用方便，無(wú)需超速離心，省時(shí)省力；
● 純度高，富集量大，應(yīng)用范圍廣；
● 獲取的Exosome 結(jié)構(gòu)和功能完整；
● 穩(wěn)定性好，便于運(yùn)輸，便于保存。
外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 離心機(jī) ● 移液器
使用注意事項(xiàng)：
● 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑。
● 以下以2mL乳汁/唾液為例，實(shí)際操作時(shí)按乳汁/唾液樣本和提取液用量體積比等比例調(diào)整使用即可。
● 不同乳汁/唾液樣本外泌體數(shù)量差異極大，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況選擇乳汁/唾液樣本的量，根據(jù)下游應(yīng)用和參考文獻(xiàn)確定。條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。
● 常規(guī)的乳汁/唾液樣本最佳上樣量為5-10mL及以上，條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。
● 已經(jīng)分離好的外泌體樣本如果需要進(jìn)行電鏡觀察，只能冰上或4℃保存，存放時(shí)間不超過(guò)兩天，注意不可冷凍保存，否則可能會(huì)影響電鏡觀察效果。
使用方法：
1、收集2mL待提取的乳汁/唾液樣品，置2-8℃保存。
【注】：
● 凍存樣品解凍后置2-8℃保存。
2、將樣品在4℃條件下，3000×g離心15分鐘。棄沉淀，收集上清。
3、小心將上清移入另一干凈離心管中。
4、將樣品在4℃條件下，10000×g離心20分鐘。棄沉淀，收集上清。
5、小心將上清移入另一干凈離心管中。
6、在2mL乳汁/唾液樣品中加入2mL提取液A，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。
7、在4mL液體樣品中加入1mL提取液B，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。
【注】：
● 試劑B使用前請(qǐng)充分混勻。
8、置2-8℃冰箱靜置過(guò)夜。
【注】：
● 靜置保存時(shí)間不少于10小時(shí)。
9、在4℃條件下，10000×g離心60分鐘。
10、小心移除上清，收集沉淀。
【注】：
● 盡可能吸干上清。
● 吸取時(shí)小心，防止吸掉沉淀。
11、取50-100μL外泌體保存液將沉淀重懸，即得到外泌體樣品。
【注】：
● 可以不用試劑盒中的外泌體保存液試劑C，根據(jù)下游實(shí)驗(yàn)需要用自己的其它緩沖液重懸保存外泌體。
● 也可直接用于蛋白提取。
12、將外泌體樣本-80℃保存或直接用于下游應(yīng)用。
【注】：
● 外泌體短期保存置于2-8℃保存即可，一周以上長(zhǎng)期不用時(shí)置-80℃保存。
● 保存前可以用0.22μm過(guò)濾除菌。
外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)常見問(wèn)題分析：
● 如何鑒定提取的外泌體？
通常使用透射電鏡檢測(cè)（形態(tài)）、粒徑檢測(cè)（大小）、外泌體標(biāo)志蛋白Western blot檢測(cè)等方法鑒定提取的外泌體。
● 外泌體WB標(biāo)志蛋白用什么？
在進(jìn)行WB檢測(cè)時(shí)，通常檢測(cè)外泌體標(biāo)志蛋白為CD63、CD9、CD81、TSG101、ALIX、HSP70 等。
● 進(jìn)行外泌體WB鑒定時(shí)有什么內(nèi)參蛋白可供選擇？
沒有，該檢測(cè)屬于定性檢測(cè)。
● 蛋白濃度低？
很多細(xì)胞外泌體量不夠下游應(yīng)用，在條件允許的情況請(qǐng)盡可能加大培養(yǎng)上清的上樣量。
處理部分樣本時(shí)可能沒有裂解完全，導(dǎo)致蛋白濃度低。請(qǐng)選擇高質(zhì)量的蛋白裂解液或蛋白提取試劑盒。
● 抽提得到的RNA 濃度低？
很多細(xì)胞外泌體量不夠下游應(yīng)用，在條件允許的情況請(qǐng)盡可能加大培養(yǎng)上清的上樣量。
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