SY0111 AAT-promoter-Luc

產品簡介
AAT-promoter-Luc由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于生化實驗研究等領域,AAT-promoter-Luc是我司眾多優質報告基因檢測之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括AAT-promoter-Luc熒光素酶報告基因質粒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:AAT-promoter-Luc熒光素酶報告基因質粒
英文名稱:AAT-promoter luciferase reporter plasmid
產品貨號:SY0111
產品規格:1μg
AAT-Promoter熒光素酶報告基因(報告基因質粒)(AAT-Promoter luciferase reporter plasimd)是用于檢測AAT-Promoter轉錄活性水平為目的的報告基因。AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase,也簡稱為A1AT),又稱serine peptidase inhibitor,cladeA,member 1或serine proteinase inhibitor,cladeA,member 1(簡稱SERPINA1),是一種可以被分泌到細胞外的絲氨酸蛋白酶抑制劑,可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷時會導致肺氣腫(emphysema)或肝臟疾病等。
AAT-Promoter報告基因主要用于AAT-Promoter轉錄活性水平的檢測等。
pGMAAT-Promoter-Lu是我公司改造后的哺乳動物真核表達載體,在其多克隆位點插入了AAT啟動子,可以高靈敏度地檢測AAT-Promoter的轉錄活性水平。同時,對載體中預測出的其它轉錄因子以外的結合位點進行了適當的突變,增加了質粒對轉錄因子結合的特異性。另外,由于質粒體積減小,使得AAT-Promoter報告基因質粒更易于轉染。
質粒圖譜

注意事項
本質粒未經我公司允許不得用于任何商業用途,也不得移交給訂貨人實驗室以外的任何人或單位。
為了您的健康,實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
使用說明
pGMAAT-promoter-Lu可以采用常規轉染方法轉染哺乳動物細胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進行檢測。
儲存條件:-20℃。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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名稱:螢光素酶報告基因檢測試劑盒(螢火蟲)
貨號:YT271
規格:100次|1000次
本試劑盒是一種以螢光素為底物來檢測螢火蟲螢光素酶活性的試劑盒。
螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61kD的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的過程中,會發出生物螢光。生物螢光可以通過化學發光儀或液閃進行測定儀測定。本試劑盒的檢測原理參考下圖。

螢火蟲螢光素酶的檢測原理圖。
通過螢光素和螢光素酶這一生物發光體系,可以非常靈敏、地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉錄調控元件或5’啟動子區克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR區克隆在luciferase的下游等,構建成報告基因質粒。然后轉染細胞,用適當藥物等處理細胞后裂解細胞,測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。螢火蟲螢光素酶催化luciferin發光的zuì強發光波長為560nm。
注意事項:
1. 為取得zuì佳測定效果,在用單管的化學發光儀測定時,樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制在相同時間內,例如30秒內;使用具有化學發光測定功能的多功能熒光酶標儀時,宜先把樣品全部加好,然后統一加入螢火蟲螢光素酶檢測試劑。
2. 由于溫度對酶反應有影響,所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
3. 為保證螢光素酶檢測試劑的穩定性,可以采取適當分裝后避光保存的方法,以避免反復凍融和長時間暴露于室溫。經測試,反復凍融三次,對測定結果無明顯影響。
4. 樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進行測定。測定時間通常為10秒,根據情況也可以測定更長或更短時間,但是同一批樣品宜使用相同的測定時間。
5. 為避免由于質粒轉細胞時效率的差異而帶來的誤差,可以同時轉入海腎螢光素酶的報告基因質粒作為內參,采用百奧萊博的雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(YT273)進行檢測;也可以同時轉入β-半乳糖苷酶報告基因質粒作為內參,然后采用百奧萊博的β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(YT274)進行檢測。采用本試劑盒中的報告基因細胞裂解液裂解獲得的樣品可以直接用于β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(YT274)的檢測。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
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