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產(chǎn)品詳情

YT221 CREB凝膠遷移突變探針

  • 產(chǎn)品/服務(wù):YT221 CREB凝膠遷移突變探針
  • 型 號:YT221
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1164
產(chǎn)品簡介

CREB凝膠遷移突變探針由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,僅用于生物化學(xué)研究方面,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)位合理,需要CREB凝膠遷移突變探針等凝膠遷移EMSA產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示:包括CREB凝膠遷移突變探針(1.75μM)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:CREB凝膠遷移突變探針(1.75μM)
英文名稱:CREB Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
產(chǎn)品貨號:YT221
產(chǎn)品規(guī)格:60μl

本探針是用于EMSA(也稱gel shift)研究的CREB consensus oligonucleotide的突變體??梢宰鳛镋MSA探針-CREB的陰性對照,用于EMSA結(jié)合反應(yīng)中突變探針的冷競爭反應(yīng)等。一個(gè)包裝的突變探針,如果用于同位素標(biāo)記EMSA探針的突變探針冷競爭反應(yīng),可以進(jìn)行30-60個(gè)突變探針的冷競爭反應(yīng)。

CREB consensus oligo的序列如下:
5"-AGA GAT TGC CTG ACG TCA GAG AGC TAG-3"
3"-TCT CTA ACG GAC TGC AGT CTC TCG ATC-5"

EMSA突變探針-CREB中CREB的公認(rèn)的結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生了突變,從而使CREB無法和該突變探針結(jié)合。在探針冷競爭反應(yīng)中,正常的標(biāo)記探針和CREB的結(jié)合的條帶會被抑制;而在突變探針冷競爭反應(yīng)(cold competition)中,正常的標(biāo)記探針和CREB的結(jié)合的條帶不會被抑制。參考下圖。


一個(gè)典型的EMSA/Gel- Shift分析圖
1,陰性對照反應(yīng)(標(biāo)記探針);
2,常規(guī)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針);
3,探針冷競爭反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記探針);
4,突變探針的冷競爭反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記突變探針);
5,Super-shift反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+目的轉(zhuǎn)錄因子的特異抗體)。

注意事項(xiàng):
1. 避免加熱到40℃以上,溫度過高會導(dǎo)致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。
2. 對于EMSA的詳細(xì)操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說明。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

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名稱:凝膠遷移試劑盒(EMSA試劑盒)
貨號:YT185
規(guī)格:100次
本試劑盒是用于EMSA(也稱gel shift)研究的一個(gè)試劑盒。通過EMSA可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的結(jié)合情況,從而可以研究細(xì)胞內(nèi)一些轉(zhuǎn)錄因子的激活水平。本試劑盒提供了進(jìn)行EMSA實(shí)驗(yàn)的探針標(biāo)記、蛋白和DNA結(jié)合以及EMSA上樣等的主要試劑,使EMSA實(shí)驗(yàn)變得簡單方便。

試劑盒組份:
T4 Polynucleotide Kinase————————————100U
T4 Polynucleotide Kinase Buffer(10X)——————100μl
Nuclease-Free Water——————————————1ml
探針標(biāo)記終止液—————————————————100μl
5M 醋酸銨———————————————————600μl
EMSA/Gel-Shift結(jié)合緩沖液(5X)——————————200μl
EMSA/Gel-Shift上樣緩沖液(藍(lán)色,10X)——————200μl
EMSA/Gel-Shift上樣緩沖液(無色,10X)——————200μl
TE———————————————————————1ml/管,共2管

EMSA/Gel-Shift結(jié)合緩沖液(5X)中含有poly(dI-dC)等有效成分。其中poly(dI-dC)的濃度經(jīng)過優(yōu)化,可以很好的消除蛋白和標(biāo)記探針間的非特異性結(jié)合,同時(shí)又不會減弱目的轉(zhuǎn)錄因子和標(biāo)記探針間的結(jié)合。

每個(gè)EMSA/Gel-Shift試劑盒足夠標(biāo)記10-20次探針,足夠進(jìn)行100個(gè)蛋白和探針的結(jié)合反應(yīng)。

注意事項(xiàng):
1. 需自備待標(biāo)記的EMSA探針,需自備用于探針標(biāo)記的同位素,需自備EMSA膠配制的相關(guān)試劑。
2. 細(xì)胞核蛋白的抽提可以使用百奧萊博的細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒(YT041)。
3. 如需做super-shift,需自備用于super-shift的抗體。
4. 本實(shí)驗(yàn)涉及到同位素的操作,請嚴(yán)格按照同位素的相關(guān)管理?xiàng)l例進(jìn)行操作。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

名稱:EMSA結(jié)合緩沖液(Gel-Shift結(jié)合緩沖液)(5X)
貨號:YT186
規(guī)格:100次
本品是用于EMSA/Gel-Shift的結(jié)合緩沖液。本品中含有poly(dI-dC),DTT,甘油,EDTA,氯化鈉,氯化鎂以及Tris等有效成分。其中poly(dI-dC)的濃度經(jīng)過優(yōu)化,可以很好的消除蛋白和標(biāo)記探針間的非特異性結(jié)合,同時(shí)又不會減弱目的轉(zhuǎn)錄因子和標(biāo)記探針間的結(jié)合。

本EMSA/Gel-Shift結(jié)合緩沖液(5X)不僅適用于同位素標(biāo)記的探針,也適用于dì高辛(digoxin)或生物素(biotin)標(biāo)記的探針。每個(gè)包裝的EMSA/Gel-Shift結(jié)合緩沖液(5X),足夠進(jìn)行100個(gè)蛋白和探針的結(jié)合反應(yīng)。

通過EMSA,也稱gel-shift,可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的結(jié)合情況,從而可以研究細(xì)胞內(nèi)一些轉(zhuǎn)錄因子的激活水平。EMSA/Gel-Shift 結(jié)合緩沖液(5X)可以用于EMSA研究時(shí)細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子和特定的雙鏈寡核苷酸的結(jié)合反應(yīng)。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

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