GL1454 亮抑酶肽溶液

產品簡介
亮抑酶肽溶液的品牌是百奧萊博,是優質的蛋白質研究產品,本制品用于科研目的,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多亮抑酶肽溶液等蛋白質研究產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)
產品貨號:GL1454
產品規格:1ml
用途:
蛋白酶抑制劑
注意事項:
工作濃度3ug/ml
儲存條件:-20℃,避光,18個月
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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名稱:Bradford法蛋白定量試劑盒
貨號:BTN80814
規格:100mL
Bradford法測定蛋白質濃度是zuì為常用的蛋白檢測方法之一,在酸性條件下,考馬斯亮藍染料能與蛋白質結合形成復合物,其zuì大吸光值也由465nm轉移到595nm,通過顏色的強弱測定蛋白質濃度的高低。本產品是基于Bradford法蛋白檢測原理開發的產品。
產品特點:
1.快速,10-20個樣品只需要10分鐘即可完成測定。
2.穩定,加樣混勻后2分鐘既可測定,1小時內吸光度變化不超過10%。
3.線性范圍在 50~1000μg/mL。
4.zuì小測量體積為1-20μL,zuì低測量蛋白量為0.5μg。
5.即開即用,不需要單獨購買每個成分再配制。
6.有常規和微量兩種檢測模式。
7.不受大部分樣品中的化學物質的影響。巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。
8.但受略高濃度的表面活性劑影響,各種蛋白質與染料的結合效率可能有差異。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 100ml |
| BSA標準(2mg/mL) | 1ml |
| 濾紙 | 20張 |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸和保存,BSA 標準-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、常規檢測流程:
此方法在蛋白濃度30-1000μg/mL范圍內呈現R2 = 0.996的直線線性回歸,可定量蛋白濃度在此范圍內的蛋白樣品。
1.制備 1×工作液。溶液A與無菌水按1:4 比例充分混合即為1×工作液(例:4mL溶液A+ 16mL 無菌水 = 20mL 1×工作液)。
2.濾紙過濾。過濾后的工作液室溫條件下可穩定使用1-2 星期。
3.檢測:蛋白樣品與1×工作液按1:50 比例混合(例:100μl蛋白樣品 + 5mL 1×工作液,適用于3mL的比色杯;40μl蛋白樣品 + 2mL 1×工作液,適用于1mL的比色杯;20μl蛋白樣品 + 1mL 1×工作液,適用于平底透明96孔板)。
4.加樣后,充分混勻。
5.室溫放置5分鐘。
6.檢測吸光度。波長設定 = 595nm。
注意事項:
1.不同型號、規格的濾紙,具有不同的孔徑,導致可通過的分子各不相同。請使用本公司提供的濾紙,否則會導致不同的測定結果。
2.檢測樣品之前,應先制備蛋白標準曲線。一般可使用BSA。
a)常規檢測:建議使用下述濃度的BSA。
0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量檢測:建議使用下述濃度的BSA。
0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3.檢測細胞提取物或純化蛋白樣品,應使用相應的緩沖液制備蛋白標準曲線。
4.用 96孔板測定時,應確保沒有氣泡,否則會增加吸光度的讀數。
5.此檢測試劑不受大部分樣品中的化學物質的影響。巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略高濃度的表面活性劑影響。若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量樣品加水稀釋到適當濃度,再行測定。
二、微量檢測流程:
此方法在蛋白濃度1~20μg/mL范圍內呈現R2=0.992的直線線性回歸,可定量蛋白濃度在此范圍內的蛋白樣品。
1.蛋白樣品與溶液A按4:1比例混合,例:
| 蛋白樣品 | 溶液A | 適用性 |
| 400μL | 100μL | 平底透明96孔板 |
| 2mL | 0.5mL | 1mL的比色杯 |
| 4mL | 1mL | 3mL的比色杯 |
2.加樣后,充分混勻。
3.室溫放置5分鐘。
4.檢測吸光度。波長設定= 595nm。
注意事項:
1.Bradford蛋白濃度測定的顯色反應受許多去污劑的影響。應避免使用SDS,Triton X-100,Tween等溶解蛋白樣品。對于難溶解的蛋白樣品,可用1MNaOH 溶解和稀釋。
2.Bradford蛋白濃度測定的顯色反應依賴于蛋白中精氨酸殘基的數目,因此不同蛋白間測定的差異可能較大。
3.標準品曲線配制時,如果吸量不準確或者加樣槍不會造成標準曲線相關系數減小,可根據需要使用倍比梯度稀釋的方法來配制,或者使用度高的加樣槍。
4.由于Bradford法在蛋白濃度增高到一定時候,顏色反應并不成比例增加,因此得到的標準曲線只是在一定范圍內可以近似看成直線,每次應按照實際測得的標準曲線計算出相對的蛋白濃度。
5.不像其它一些蛋白濃度測定方法(包括Lowry法),Bradford法測定蛋白濃度不受大部分樣品中的化學物質的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達1M,二流蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%,可以考慮用超純水稀釋,透析/除鹽,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超純水等方法來消除干擾物質的影響。
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