HR0159 葉綠體蛋白提取試劑盒
- 產(chǎn)品/服務(wù)：HR0159 葉綠體蛋白提取試劑盒
- 型 號(hào)：HR0159
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-08-09
- 有效期至：長(zhǎng)期有效
- 瀏覽次數(shù)：918
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
葉綠體蛋白提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，本制品用于科學(xué)研究，我公司的葉綠體蛋白提取試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括葉綠體蛋白提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：葉綠體蛋白提取試劑盒
英文名稱：Chloroplast protein extraction kit
產(chǎn)品貨號(hào)：HR0159
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T
葉綠體是植物細(xì)胞所特有的能量轉(zhuǎn)換細(xì)胞器，光合作用就是在葉綠體中進(jìn)行的,由于具有這一重要功能，所以葉綠體一直是細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究對(duì)象。
葉綠體蛋白提取試劑盒用簡(jiǎn)便快速的方法可以從各種植物樣本中提取得到葉綠體總蛋白。
本試劑盒適用于提取新鮮植物樣本的葉綠體蛋白，用于凍存樣本的提取時(shí)由于凍存過程中大部分葉綠體會(huì)被破壞，葉綠體蛋白回收率較低。
本試劑盒含有的獨(dú)特配方能夠有效溶解葉綠體膜組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。
本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。
本試劑盒不含有EDTA，與金屬螯合層析等下游應(yīng)用兼容。
本試劑盒采用非酶法提取，提取過程簡(jiǎn)單方便，速度快，可在1小時(shí)內(nèi)完成，而且少交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法較低。酶法提取制備的葉綠體總蛋白，回收率提高，蛋白純度高，保持天然活性，但是耗時(shí)較長(zhǎng)。如果需要更加快捷的提取試劑盒，可以選擇非酶法的提取試劑盒，對(duì)提取速度沒有要求的話，可以選擇酶法提取試劑盒。
本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分，不可直接用于2D電泳，如下游實(shí)驗(yàn)需要直接用于等電聚焦、雙向電泳，請(qǐng)使用我公司其他貨號(hào)的試劑盒。也可以將zuì后樣本除鹽后再用于2D電泳，用脫鹽柱脫鹽處理。
儲(chǔ)存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。
【注】
●蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃保存，開蓋使用后-20℃保存
●蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
注意事項(xiàng)：
●本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 移液器、吸頭 ●離心機(jī)及離心管 ● 100μm細(xì)胞篩
● 振蕩器、渦旋混勻器、Dounce勻漿器 ●冰箱，冰盒
使用方法：
1．提取液制備：
每200μl預(yù)冷的蛋白提取液C中加入1μl蛋白酶抑制劑，混勻后置冰上備用。
【注】：
● 根據(jù)需要處理的樣品數(shù)量準(zhǔn)備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內(nèi)未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。
2．取200-500mg新鮮植物樣本葉片，洗凈擦干后去除葉梗和粗脈。用手術(shù)剪刀盡可能剪碎。
3．加入1ml-2ml試劑A，用組織攪碎機(jī)/勻漿機(jī)/Dounce勻漿器充分勻漿。
4．將勻漿液用100μm細(xì)胞篩過濾。
【注】：
● 沒有細(xì)胞篩的話，在4℃，稍微靜置，讓粗纖維，成團(tuán)組織塊等沉降，或者以低于100g力條件下離心1分鐘，收集細(xì)胞上清，棄組織沉淀。
●有些含粘液較多的樣品可能難以吸取，可以將1ml吸頭尖稍微剪掉一點(diǎn)使用。
● 液體量較少細(xì)胞篩不好過濾時(shí)可以補(bǔ)加2ml PBS緩沖液后過濾。
5．將濾液在500g條件下離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。
6．將上清在800g條件下離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。
7．將上清3000g力離心10分鐘，棄上清，收集沉淀。
8．將沉淀用試劑B重懸。
9．將懸液3000g力離心10分鐘，棄上清，收集沉淀。
10．在沉淀中加入200-300μl葉綠體蛋白提取液C，充分混勻。
【注】：
● 每400μl蛋白提取液C加入2μl蛋白酶抑制劑混合物。
11．在4℃條件下振蕩20-45分鐘。
【注】：
●試劑C處理時(shí)間根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)整。至葉綠體充分裂解，離心后沉淀體積減少。
● 振蕩時(shí)用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，保持液體稍微晃動(dòng)即可。
● 沒有振蕩條件也可不振蕩，稍微延長(zhǎng)試劑C處理時(shí)間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻。
12．在4℃，12000g條件下離心15分鐘。
13．將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到葉綠體總蛋白。
14．將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
【注】：
● 建議用BCA法進(jìn)行蛋白定量。
●蛋白樣品-80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細(xì)菌污染。
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貨號(hào)：BTN81218
規(guī)格：30次
本產(chǎn)品用于快速提取微量植物蛋白，用于SDS-PAGE凝膠電泳和Western印跡分析。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.可以處理各種植物材料，包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡(jiǎn)單。
3. 能有效去除植物樣品中常見的污染。
試劑盒組成：
| 成分 | 規(guī)格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 240ml |
| 溶液C | 1.5ml |
| 說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。
使用方法：
1．稱取植物樣品。如果是冰凍干燥的樣品，稱取50mg。如果是新鮮組織樣品，稱取100mg。在液氮條件下，用研缽充分研磨成為粉末。
2．將研磨得到的粉末轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。
3．加入1mL溶液A，在震蕩儀上充分震蕩5分鐘。
4．室溫12000g離心5分鐘，組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?br /> 5．將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中，在沸水中處理3分鐘。
6．冷卻至室溫后，轉(zhuǎn)移到一個(gè)10-15mL塑料離心管中，加入8倍體積的-20℃預(yù)冷的溶液B。
7．顛倒混勻后，置于-20℃冰箱中至少60分鐘以充分沉淀其中的蛋白質(zhì)。
8．12000g離心15分鐘，去上清液，保留蛋白沉淀。
9．室溫晾干之后，加入50μL溶液C并在震蕩儀上充分震蕩以讓蛋白沉淀充分溶解
10．將蛋白溶液在沸水中處理3分鐘。
11．室溫12000g離心5分鐘，上清可以直接用于蛋白濃度測(cè)定和SDS-PAGE。
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