SYA154 高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)?/h1>

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• 產(chǎn)品/服務(wù)：SYA154 高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)?/strong>
• 型 號(hào)：SYA154
• 品 牌：百奧萊博
• 單 價(jià)：面議 
• 更新日期：2023-06-06
• 有效期至：長(zhǎng)期有效
• 瀏覽次數(shù)：1109
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)捎杀本┌賷W萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)傻炔《綪CR檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示：包括高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：SYA154
產(chǎn)品規(guī)格：48次/盒



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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
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名稱：高致病性禽流感H5N2病毒雙重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：SYA154
規(guī)格：48次/盒

名稱：人副流感病毒1型單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：SYA174
規(guī)格：48次/盒

名稱：冠狀病毒(HCoV)通用單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：SYA178
規(guī)格：48次/盒

名稱：冠狀病毒(229E)單重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：SYA183
規(guī)格：48次/盒

名稱：博卡病毒(HBocaV)/偏肺病毒(HMPV)雙重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：SYA189
規(guī)格：48次/盒
本試劑盒適用于各種咽拭子、鼻拭子樣品等臨床樣品中偏肺病毒/博卡病毒的特異性檢測(cè)。適用于偏肺病毒/博卡病毒感染的輔助診斷、監(jiān)測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查，其檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考。

本試劑盒用一對(duì)偏肺病毒型特異性引物，一對(duì)博卡病毒型特異性引物，分別結(jié)合一條特異性熒光探針，用一步法雙重?zé)晒釸T-PCR 技術(shù)對(duì)偏肺病毒/博卡病毒RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。本試劑盒中偏肺病毒型的探針報(bào)告基團(tuán)為FAM，博卡病毒型的探針報(bào)告基團(tuán)為VIC/HEX/JOE。

試劑盒組成：

組份	數(shù)量	規(guī)格
偏肺病毒/博卡病毒反應(yīng)液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX)	1管	576μL/管
qRT酶混合物(qRT Enzymes MIX)	1管	192μL/管
無(wú)核酸酶水(Nuclease-Free Water)	1管	500μL/管
陰性對(duì)照(NTC)	1管	50μL/管
偏肺病毒/博卡病毒陽(yáng)性對(duì)照(HMPV/HBocaV-PTC)	1管	50μL/管

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期6個(gè)月。

使用方法：

一、樣品采集：
按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)采集。標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-80℃，但不能超過(guò)6個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用0℃冰壺。
?血清：用一次性無(wú)菌注射器抽取靜脈血2mL，注入無(wú)菌的干燥玻璃管，室溫(22-25℃)放置30-60min，血標(biāo)本可自發(fā)完成凝集析出血清，或直接使用水平離心機(jī)，3000rpm離心5min，吸取上層血清，轉(zhuǎn)移至1.5mL滅菌離心管。
?血漿：用一次性無(wú)菌注射器抽取靜脈血2mL，注入含EDTA2Na(乙二胺四乙酸二鈉)或檸檬酸鈉抗凝劑的玻璃管，立即輕輕顛倒玻璃管混合5-10次，使抗凝劑與靜脈血充分混勻，5-10min后即可分離出血漿，轉(zhuǎn)移至1.5mL滅菌離心管。
?拭子、分泌物等樣品：在裝有拭子或分泌物的離心管中加入500μL PBS或生理鹽水，劇烈振蕩30s。棉拭子盡量擠出液體轉(zhuǎn)移到無(wú)RNA酶污染的離心管中，6000rpm離心20s，取上清備用。
?病灶組織樣品：稱取組織約0.1g于研磨器或組織勻漿器中研磨(zuì好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理鹽水研磨至無(wú)塊狀物，然后將樣品轉(zhuǎn)至1.5mL滅菌離心管中，8000rpm離心2min，取上清液于1.5mL滅菌離心管中。

二、RNA提取：
可采購(gòu)北京百奧萊博科技有限公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒(過(guò)柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。
 注：陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無(wú)需提取)，直接取4μL 加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽(yáng)性對(duì)照濃度較高，建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽(yáng)性對(duì)照。

三、檢測(cè)步驟：
1．試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光qRT-PCR 反應(yīng)液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm 離心10s。
設(shè)所需要的PCR 反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑	每個(gè)反應(yīng)加入的量	N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液	12μL	N×12μL
酶混合物	4μL	N×4μL
總量	16μL	N×16μL

計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm 離心10s，向設(shè)定的N 個(gè)PCR 反應(yīng)管中分別加入16μL，向每管中加入處理后樣品/陰性對(duì)照(NTC)/陽(yáng)性對(duì)照(HMPV/HBocaV-PTC)4μL，10000rpm 瞬時(shí)離心10 秒。
2．qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入實(shí)時(shí)熒光PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。推薦循環(huán)條件：

	反轉(zhuǎn)錄(Reverse Transcription)	1循環(huán)	50℃ for 30 min
預(yù)變性	1循環(huán)	95℃ for 5 min
PCR擴(kuò)增	40循環(huán)	95℃ for 10 sec 55℃ for 45 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM和VIC(若儀器無(wú)VIC通道，可選擇HEX或JOE通道)。其中FAM基團(tuán)檢測(cè)HMPV，VIC/HEX/JOE基團(tuán)檢測(cè)HBocaV。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

四、結(jié)果分析：
1．結(jié)果分析條件設(shè)定
直接讀取檢測(cè)結(jié)果。基線和閾值設(shè)定原則根據(jù)儀器噪聲情況進(jìn)行調(diào)整，以閾值線剛好超過(guò)正常陰性樣品擴(kuò)增曲線的zuì高點(diǎn)為準(zhǔn)。
2．試驗(yàn)成立判定
?陰性對(duì)照(NTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均無(wú)擴(kuò)增。
?陽(yáng)性對(duì)照(HMPV/HBocaV-PTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均有擴(kuò)增。
?以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則，此次試驗(yàn)視為無(wú)效
3．結(jié)果判定
?FAM通道：Ct值≤35HMPV核酸為陽(yáng)性；Ct值顯示為無(wú)的樣本為陰性樣本，表明HMPV核酸陰性。
Ct值在35-40個(gè)循環(huán)之間，為灰區(qū)，需要進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。如果重復(fù)擴(kuò)增曲線為對(duì)數(shù)擴(kuò)增曲線，判為樣本陽(yáng)性，表明HMPV核酸陽(yáng)性；否則判為樣本陰性。
?VIC/HEX/JOE通道：Ct值≤35 HBocaV核酸為陽(yáng)性；Ct值顯示為無(wú)的樣本為陰性樣本，表明HBocaV核酸陰性。Ct值在35-40個(gè)循環(huán)之間，為灰區(qū)，需要進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。如果重復(fù)擴(kuò)增曲線為對(duì)數(shù)擴(kuò)增曲線，判為樣本陽(yáng)性，表明HBocaV核酸陽(yáng)性；否則判為樣本陰性。

五、注意事項(xiàng)：
?初次使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。并嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)步驟操作。
?所有使用的離心管zuì好高壓滅菌，而且必須不含RNA 酶。
?PCR 操作應(yīng)嚴(yán)格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)等)，防止實(shí)驗(yàn)室污染。
?樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺(tái)進(jìn)行，以免污染。
?試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

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