KFS092 1×電轉(zhuǎn)移緩沖液

產(chǎn)品簡介
1×電轉(zhuǎn)移緩沖液的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品,本制品用于科學(xué)研究,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多1×電轉(zhuǎn)移緩沖液等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括1×電轉(zhuǎn)移緩沖液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:1×電轉(zhuǎn)移緩沖液
產(chǎn)品貨號:KFS092
產(chǎn)品規(guī)格:1000ml
本產(chǎn)品作為蛋白電泳完畢后,將凝膠上蛋白電轉(zhuǎn)移到PVDF 膜或其它膜上的緩沖液,含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。本產(chǎn)品不含SDS,客戶可根據(jù)自身需求,自行添加0.1%的SDS。
儲存:4℃,有效期12個月。
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名稱:糖蛋白染色試劑盒
貨號:BTN131075
規(guī)格:10次
本產(chǎn)品為在SDS-PAGE凝膠或蛋白免疫印記硝酸纖維素膜上檢測糖蛋白的試劑盒。該方法使用三種試劑,所需時間僅需不到兩小時,而其他的染色方法需要四到五小時。染色后的糖蛋白為品紅色條帶,背景為淺粉色或者無色。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.包括一種陽性對照蛋白及一種陰性對照蛋白。
2.簡潔、易儲存的試劑盒。
3.本產(chǎn)品足夠10張mini-PAGE膠或20張8×8cm蛋白免疫印記硝酸纖維素膜染色。
產(chǎn)品組成:
成分 | 規(guī)格 |
氧化試劑 | 2.5g |
糖蛋白染色試劑 | 250ml |
還原試劑 | 1.25g |
陽性對照(辣根過氧化物酶) | 1mg |
陰性對照(大豆胰蛋白酶抑制劑) | 1mg |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。
自備試劑:0.9%NaCl溶液或PBS緩沖液、BCA工作液。
使用方法:
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.配制3%乙酸溶液:將30mL冰醋酸與970mL超純水混勻,室溫保存?zhèn)溆谩?br /> 2.配制50%甲醇溶液:將250mL甲醇與250mL超純水混勻,室溫保存?zhèn)溆谩?br /> 3.配制氧化試劑:向氧化試劑干粉中加入250mL的3%乙酸溶液,充分混勻溶解后得到氧化試劑溶液,室溫保存?zhèn)溆谩?br /> 4.配制還原試劑:向還原試劑干粉中加入250mL的超純水,充分混勻溶解后得到還原試劑溶液,室溫保存?zhèn)溆谩?br /> 5.配制陽性對照(辣根過氧化物酶):向1mg固體中加入0.5mL超純水,使得溶液濃度為2mg/mL。用SDS-PAGE上樣緩沖液將溶液稀釋到終濃度為1mg/mL。對于80mm×80mm的凝膠來說,每個泳道加5到10μl的陽性對照。將配制好的陽性對照分裝后-20℃保存。
6.配制陰性對照(大豆胰蛋白酶抑制劑):向1mg固體中加入0.5mL超純水,使得溶液濃度為2mg/mL。用SDS-PAGE上樣緩沖液將溶液稀釋到終濃度為1mg/mL。對于80 mm×80 mm的凝膠來說,每個泳道加5到10μl的陰性對照。將配制好的陰性對照分裝后-20℃保存。
7.樣品稀釋:用SDS-PAGE上樣緩沖液將樣品濃度稀釋為1mg/mL,對于80mm×80mm的凝膠來說,每個泳道加5到10μl的樣品。
凝膠染色的操作步驟(注意:請在通風(fēng)櫥中進(jìn)行以下操作)
1.取出電泳后的SDS-PAGE凝膠,加入到100mL 50%甲醇溶液中,完全浸泡30分鐘后,倒出甲醇溶液。
2.用100mL 3%乙酸溶液洗滌膠塊兩次,每次輕輕振蕩10分鐘。
注:如有需要,此步的膠塊可在超純水中4℃過夜處理。
3.將膠塊轉(zhuǎn)移到25mL氧化試劑中,輕輕振蕩15分鐘。
4.用100mL 3%乙酸溶液洗滌膠塊3次,每次輕輕振蕩5分鐘。
5.將膠塊轉(zhuǎn)移到25mL糖蛋白染色試劑中,輕輕振蕩15分鐘。
注:若染色試劑中有晶體析出,只需離心取上清液去除晶體即可,不要加熱來溶解晶體。
6.將膠塊轉(zhuǎn)移到25mL還原試劑中,輕輕振蕩5分鐘。
7.用3%乙酸溶液洗滌膠塊,然后用超純水洗滌至顯色,糖蛋白將顯現(xiàn)為品紅條帶。膠塊保存在3%乙酸溶液中。
硝化纖維素膜染色的操作步驟(注意:請在通風(fēng)櫥中進(jìn)行以下操作)
1.用20mL 3%乙酸溶液洗滌膜兩次,每次輕輕振蕩10分鐘。
2.將膜轉(zhuǎn)移到10mL的氧化試劑中,輕輕振蕩15分鐘。
3.用10mL 3%乙酸溶液洗滌膜3次,每次輕輕振蕩5分鐘。
4.將膜轉(zhuǎn)移到10mL的糖蛋白染色試劑中,輕輕振蕩15分鐘。(注:若染色試劑中有晶體析出,只需離心取上清液去除晶體即可,不要加熱來溶解晶體。)
5.將膜轉(zhuǎn)移到10mL還原試劑中,輕輕振蕩5分鐘。
6.用3%乙酸溶液洗滌膜,然后用超純水洗滌至顯色,糖蛋白將顯現(xiàn)為品紅條帶。膜可保存在3%乙酸溶液中。
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