醋酸洋紅染色液是高品質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科學(xué)研究，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶稱道，了解更多醋酸洋紅染色液等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括醋酸洋紅染色液在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：醋酸洋紅染色液
英文名稱：Acetocarmine Solution
產(chǎn)品貨號(hào)：QN1269
產(chǎn)品規(guī)格：100ml

醋酸洋紅是一種比較常用的堿性染料, 常用于細(xì)胞核染色、染色體的固定和染色。在觀察植物細(xì)胞有絲分裂時(shí)，對(duì)染色體進(jìn)行染色，需要用堿性染液，此時(shí)可以使用醋酸洋紅或龍膽紫染液?；ǚ蹤z測中，可以采用醋酸洋紅檢測花粉是否處于單核期。

我司醋酸洋紅染色液采用經(jīng)典配方和進(jìn)口染料配置，含高濃度乙酸和洋紅，pH呈酸性，是很好的細(xì)胞核、線粒體染色劑。

儲(chǔ)存條件：常溫避光，有效期1年。

根據(jù)您的關(guān)注的醋酸洋紅染色液，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：



名稱：一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE電泳套裝(中pH)
貨號(hào)：BTN81212B
規(guī)格：30次
非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native PAGE)是目前電泳法分離活性蛋白的主要方法之一，跟SDS-PAGE根據(jù)分子量大小分離蛋白質(zhì)不同，它是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小、形狀、電荷密度三個(gè)主要參數(shù)分離蛋白質(zhì)。由于蛋白質(zhì)的pI各不相同，所以對(duì)不同蛋白質(zhì)需要選用具有不同pH的電泳體系。單獨(dú)配制不同pH的Native PAGE電泳膠十分繁瑣，為此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．即開即用，不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。還免去了實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺
2．非變性，電泳過程中蛋白質(zhì)保持天然的構(gòu)象和亞基之間的相互作用，得到的蛋白質(zhì)一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白沒有活性)。
3．可用于分析蛋白質(zhì)和DNA或RNA的相互作用、蛋白修飾、蛋白構(gòu)型改變、回收有活性蛋白質(zhì)等試驗(yàn)。
4．電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實(shí)驗(yàn)。
5．提供具有3種不同pH的緩沖液套裝，便于客戶選擇zuì適合的緩沖液體系。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格
丙烯酰胺干粉	60g
甲叉雙丙烯酰胺干粉	3g
TEMED	1.5ml
過硫酸銨干粉	1g
高中低緩沖液套裝選一	ABC之一(見下)
說明書	1份
高pH緩沖液套裝(只有BTN81212A有此成分)
高pH濃縮膠配膠液(pH6.7)，4×	100ml
高pH分離膠配膠液(pH8.9)，4×	200ml
高pH電泳液(pH8.3)	10L(干粉)
高pH上樣液，5×	1ml
中pH緩沖液套裝(只有BTN81212B有此成分)
中pH濃縮膠配膠液(pH5.5)，4×	100ml
中pH分離膠配膠液(pH7.5)，4×	200ml
中pH電泳液(pH7.0)干粉A	55.2g
中pH電泳液(pH7.0)干粉B	10g
中pH上樣液，5×	1ml
低pH緩沖液套裝(只有BTN81212C有此成分)
低pH濃縮膠配膠液(pH6.7)，4×	100ml
低pH分離膠配膠液(pH4.3)，4×	200ml
低pH電泳液(pH4.5)	10L(干粉)
低pH上樣液，5×	1ml

注：高、中和低pH緩沖液套裝里面均含100mL濃縮膠配膠液、200mL分離膠配膠液、10 L電泳液(干粉)和1mL上樣液，只是pH不同。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存(上樣液需-20℃保存)，保存期為一年。

使用方法：
如何選擇緩沖液?
高pH濃縮膠，高pH分離膠，高pH電泳液和高pH上樣液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此，不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。選擇適當(dāng)pH的緩沖液(包括上樣液，電泳液，配膠液等)對(duì)蛋白質(zhì)非變性PAGE非常重要，緩沖液的zuì佳pH又跟目的蛋白質(zhì)的pI值密切相關(guān)。如果pH遠(yuǎn)離pI，則蛋白質(zhì)分子帶電多(電荷密度大)，電泳速度快，分辨率高。但過酸過堿又容易使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變性，失去活性，所以zuì佳pH條件就是在電泳分辨率和維持活性之間尋找平衡，需要針對(duì)每種蛋白質(zhì)進(jìn)行摸索或通過滴定曲線來確定，沒有通用的電泳緩沖體系。由于有近半數(shù)的蛋白質(zhì)pI在4-6.5，所以在不知道目標(biāo)蛋白的pI時(shí)，可以先選用高pH緩沖系統(tǒng)。

一、配制分離膠
1．確定濃度。對(duì)分子量在100Kd以上的蛋白質(zhì)，可選用3-5%的膠；對(duì)分子量在20-150KD之間的蛋白質(zhì)，可選用5-10%的膠；對(duì)分子量在10-80KD之間的蛋白質(zhì)，可選用10-15%的膠。對(duì)未知樣品，建議使用7.5%的膠。
2．配制10%的APS(過硫酸銨)：按每0.1克過硫酸銨干粉加1mL去離子水的比例配制10%的APS溶液，該溶液可以在4℃存放一周。
3．配制30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺(19:1)溶液:在本產(chǎn)品提供的裝有60克丙烯酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自備的去離子水和3g甲叉雙丙烯酰胺,充分搖晃直到溶解(約需10-20分鐘)即得200mL 30%丙烯酰胺(19:1)溶液。此溶液zuì好在一個(gè)月內(nèi)用完，必須4℃避光保存。
4．配10mL分離膠(如果配制其他體積,請按比例調(diào)節(jié)各成分用量):在一個(gè)25mL的三角瓶中，先加入4.2mL去離子水、3.3mL 30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×分離膠配膠液。
5．搖晃混勻后抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應(yīng)，不去除的話將影響丙烯酰胺聚合反應(yīng))。
6．加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(這是配制10mL膠的用量，配制更大體積的膠則按比例增加)，迅速搖勻后倒膠。注意：如果購買的是低pH緩沖系統(tǒng)，由于在低pH緩沖液中PAGE聚合速度降低，所以需要增加上述兩成分的用量。
7．在膠面距離頂部1-1.5 cm的時(shí)候停止灌膠。然后覆蓋一層1-5 mm厚的水，使膠頂部液面平整。由于比重不同，水和丙烯酰胺溶液不會(huì)混合。
8．室溫聚合30-60分鐘后，用1×分離膠配膠液洗滌凝固的膠的頂部，待用。

二、配制濃縮膠(濃縮膠可以提高分辨率，適合于成分復(fù)雜的樣品，一般使用濃度為4%。使用濃縮膠時(shí)蛋白質(zhì)泳動(dòng)速度主要跟其尺寸和形狀相關(guān)。因濃縮膠pH跟分離膠pH不同，蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生聚合和沉淀。對(duì)成分單一的樣品，可以不用濃縮膠，此時(shí)蛋白的泳動(dòng)速度主要跟其電荷密度，尺寸和形狀相關(guān)。)
1．配10mL濃縮膠(如果配制其他體積,請按比例調(diào)節(jié)各成分用量):在一個(gè)25mL的三角瓶中，先加入6.2mL去離子水、1.3mL 30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×濃縮配膠液。
2．搖晃混勻后抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應(yīng)，不去除將影響丙烯酰胺聚合反應(yīng))。
3．按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(這是配制10mL膠的用量，配制更大體積的膠則用量需按比例增加)，迅速搖勻后在已經(jīng)凝固的分離膠上倒膠。
4．在液面達(dá)到頂部時(shí)停止灌膠，插入梳子。
5．室溫聚合30-60分鐘，拔出梳子，用1×電泳液沖洗加樣孔。

三、電泳
1．將凝膠板固定在電泳裝置上，往上槽和下槽加入足夠1×電泳液。注：本產(chǎn)品提供10升的三種不同pH的電泳液干粉中的一種，低PH和高PH值電泳液用前需將所有干粉溶解在1 L水中得10×電泳液，可以室溫放置，用時(shí)再稀釋成1×電泳液。一般不需要再調(diào)節(jié)pH，但保險(xiǎn)起見，可以用pH試紙測試一下1×電泳液。高中低pH電泳緩沖液的pH分別是8.3，7.0和4.5。
 注意：中pH值的電泳液干粉只能配1x電泳液，否則不溶解。稱取中pH電泳液(pH7.0)干粉A，5.52g,中pH電泳液(pH7.0)干粉B 1g混勻，加去離子水至徹底溶解，調(diào)PH7.0，定容至1L?？蛻舾鶕?jù)可實(shí)際需要量按比例增減。
2．連接電。如果濃縮膠和分離膠的pH高于目標(biāo)蛋白pI，目標(biāo)蛋白將帶負(fù)電荷并向陽移動(dòng)，可以按標(biāo)準(zhǔn)的SDS-PAGE方法接通電(上陰下陽)；如果濃縮膠和分離膠pH低于目標(biāo)蛋白pI，目標(biāo)蛋白將帶正電荷并向陰級(jí)移動(dòng)，此時(shí)應(yīng)該下陰上陽。
3．300V預(yù)電泳直到電流不再降低(約需要30分鐘)以去除殘留過硫酸銨。
4．換電泳液。
5．在液體蛋白質(zhì)樣品中加入5×上樣液(16μl液體樣品加4μL上樣液)后上樣。0.75 mm厚的膠可以上10μl，1.5 mm厚的膠可以上20μl。在未用加樣孔中也要加1×上樣液以防有樣品的空道的樣品擴(kuò)散。注意：如果用考染檢測，每個(gè)孔的蛋白zuì好在50-100μg總蛋白，如果銀染則只需要1ug即可。樣品如果是蛋白質(zhì)沉淀，可用1×上樣液直接溶解蛋白質(zhì)沉淀后再上樣。蛋白質(zhì)溶液或沉淀中不能含有能夠改變上樣液pH的殘留成分(如蛋白質(zhì)沉淀劑TCA)，用前zuì好用pH試紙測試一下，不在上樣液的pH范圍時(shí)就用酸或堿調(diào)到正常范圍。大量樣品可用透析法調(diào)pH。
6．上樣自備的天然PAGE蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)或等電電泳的標(biāo)準(zhǔn)品(如果有的話)。
7．用15 mA(對(duì)0.75 mm厚的膠)或30mM(對(duì)1.5mm厚的膠)的電流電泳直到染料移動(dòng)到分離膠底部。微型膠一般需要1-2小時(shí)。注意：電泳過程zuì好在冷室或有冷卻系統(tǒng)，以免電泳產(chǎn)熱使蛋白質(zhì)變性。
8．終止電泳，取出凝膠進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)處理(如染色或酶活性檢測)。

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