SNM412 一步法植物活性蛋白提取試劑盒

產品簡介
一步法植物活性蛋白提取試劑盒是高品質的蛋白質研究產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科學研究,我公司的一步法植物活性蛋白提取試劑盒品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括一步法植物活性蛋白提取試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:一步法植物活性蛋白提取試劑盒
英文名稱:Plant active protein extraction kit
產品貨號:SNM412
產品規格:20T
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名稱:Western及IP細胞裂解液
貨號:YT038
規格:100ml
本品是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本細胞裂解液裂解的細胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Western及IP細胞裂解液的主要成分為20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白的降解,并維持原有的蛋白間相互作用。
用Western及IP細胞裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用百奧萊博的BCA蛋白濃度測定試劑盒(YT036,YT037)測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的Triton X-100等干擾物質,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
名稱:SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)
貨號:WE0286
規格:200ml
本產品為配制SDS-PAGE濃縮膠緩沖液,可用于配制各種濃度的變性及非變性PAGE凝膠,方便、快捷。產品中已加入10%SDS,使用時不用另外加入。
操作步驟:
根據目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度,zuì佳膠濃度請參考附表1。
I 灌制分離膠(各試劑使用量請參考附表2)
1、參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具。
注:加入上層篩板有助于加樣時保持填料與樣品均勻接觸,是否加入上層篩板可根據實際情況選擇。
2、將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和純水在小燒杯或試管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免產生氣泡。
4、在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel,凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可), 然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1 cm的水層,使凝膠表面保持平整。
5、靜置30-60分鐘,待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面后,表面凝膠已聚合。
II 灌制濃縮膠(各試劑使用量請參考附表3)
1、去除覆蓋在分離膠上的水層。
2、將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)濃縮膠緩沖液和純水在一個小燒杯或試管中混合。
3、加入10%過硫酸銨和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免產生氣泡。
4、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。
5、將梳子插入凝膠內,避免產生氣泡。
6、靜置10~20分鐘,等待濃縮膠聚合。
7、待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔。
8、進行常規電泳操作。
附表1. SDS-PAGE分離膠的濃度與zuì佳分離范圍
| SDS-PAGE 分離膠濃度 | zuì佳分離范圍 |
| 6%膠 | 50-150 kD |
| 8%膠 | 30-90 kD |
| 10%膠 | 20-80 kD |
| 12%膠 | 12-60 kD |
| 15%膠 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分離膠
| 分離膠濃度 | 凝膠體積 | 所需各組分體積(單位:ml) | ||||
| 純水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分離膠緩沖液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3. 配制5%SDS-PAGE濃縮膠
| 凝膠體積 | 所需各組分體積(單位:ml) | ||||
| 純水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 濃縮膠緩沖液(4×) | 10%APS | TEMED | |
| 2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
儲存條件:2~8℃

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